Способ оценки качества спермы быков

.ЭТЕ-. СТВА СПЕРМ Бюл, ийски т плем физик ин,В урэа,ьскохозяйствентности в процеснения животных, особ предусматлученной сперме ии сперматозоиеляют время прорелаксации в%17научно-исследовательенного дела и Институт им. Н.Н. Семенова И, Деряженцев, К.Д, Куч.И. Сергеев и В.Ф, Турорганизации и технолои предприятий по искуснию с,-х, животных, М.: ция и анци семен ие колич ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕВЕДОМСТВО СССР(56) Инструкгии работы ст ственному оКолос, .1 981,Изобретение относится кственного осеменения сельсных животных.Цель изобретения - увеличен ества спермодоз,Цель достигается тем, что после предварительной визуальной микроскопической оценки подвижности и концентрации свежеполученной спермы производят измерение времени спин-спиновой релаксации в сперматозоидах, характеризующего состояние микровязкости их плазматической мембраны. Устойчивость. сперматозоидов к замораживанию зависит от структурного состояния их плазматической мембраны, в частности от ее микровязкости,Предлагаемый способ повышает точность прогноза высокой криоустойчивости, т.е, позволяет определить истинную подвижность сперматозоидов после оттаива(54) СПОСОБ ОЦЕНКИ КАЧ БЫКОВ(57)Использование: в сел ном животноводстве, в час сах искусственного осеме Сущность изобретения; сп ривает определение в по подвижности и концентрац дов. Дополнительно опред тонной спин-спиновой сперматозоидах, 2 табл. ния, что позволяет заранее увеличить степень разбавления свежеполученных эякулятов от быков с высокой криоустойчивбстьюи получить большее число замороженйыхспермодоз от таких производителей.Прогноз высокой криоустойчивостиспермы очень важен при комплектовании 6 дплемпредприятий производителями, При фЬ,этом возможно избежать покупки животных Яс низкой криоустойчивостью спермы и, сле- Д,довательно, уменьшить затраты на их приобретение и содержание до выбраковки поданному признаку,П р и м е р 1. Подготовка образца спермы для анализа. Берут 0,51 мл свежеполученной спермы, С целью ослаблениясигнала протонов воды производят замещение протонов воды (Н 20) в образце на дейтроны (020). Для этого сперму разбавляютдесятикратно 1-ным раствором МаС 1 в1813424 Таблица 1 Время протонной спин-спиновой релаксации в сперматозоидах быков в связи с их криоустойчивостью Абсолютный показатель выживаемосперматоз е в балла Оннои Сп СПИНОВО сле замования и сперматоаидов (усл лаксации 15,2 15,219,8,8 020 и центрифугируют при 2000 об/мин в течение 10 мин, В полученном образце измеряют время протонной спин-спиновой релаксации. Измерение проводят на приборе Миниспек" РСфирмы "Брукер" ФРГ при следующих режимах: импульсная последовательность КПМГ, количество измеряемых точек на экспериментальной кривой 50; количество накоплений 100-400 раз, диайазон измерения кривой спада намагниченности 80 мкс - 4 мс, Математическая обработка полученной кривой производилась на ЭВМ по программе Т В ЕХР", разработанной фирмой "Брукер", Анализ проводят при температуре+40 С в течение 10-20 мин,П р и м е р 2, На центральной станции искусственного осеменения сельскохозяйственных животных(Моск, обл.) отобрали 11 быков голштинской породы с различной криоустойчивостью сперматозоидов. Свежеполученные эякуляты предварительно оценивали визуально по подвижности сперматозоидов, чтобы определить их пригодность к замораживанию, и затем измеряли время спин-спиновой релаксации, характеризующее. микровязкость их мембраны, откоторой зависит устойчивость к замораживанию, Замораживали сперму в лактозожелточно-глицериновой среде. Оттаивали в 3;-ном растворе цитрата натрия при температуре +38 С. После замораживания-оттаивания оценивали подвижность сперматозоидов и абсолютный показатель их выживаемости при температуре +38 С, Результаты опыта представлены в табл, 1.Из табл. 1 видно, что с увеличением времени протонной спин-спиновой релаксации 4(т.е, с уменьшением микровяэкости мембраны) возрастает криоустойчивость сперматозоидов, о чем можно судить по большейподвижности и выживаемости сперматоэо 5 идов после замораживания-оттаивания,При этом подвижность сперматозоидов дозамораживания у всех быков была практически одинаковой,Распределение изученных эякулятов по"0 времени спин-спиновой релаксации и подвижности сперматозоидов после замораживания-оттаивания представлено в табл,2.Из табл, 2 видно, что если время протон 15 ной спин-спиновой релаксации в сперматозоидах до замораживания составляет0,261-0,272 мс, то прогнозируемая подвижность сперматозоидов составит 4,7 - 4,9 балла. Следовательно, степень разбавления20 свежеполученного эякулята можно увеличить на 17 - 19 по сравнению со степеньюразбавления, ориентированной на среднююподвижность, равную 4 баллам. 25 Экономический эффект от примененияизобретения обусловлен возможностью увеличения выхода замороженных спермодоз от одного производителя,30 Формула изобретенияСпособ оценки качества спермы быков,включающий визульное определение подвижности и концентрации сперматозоидов, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью 35 увеличения выхода замороженных спермодоз, дополнительно определяют время протонной спин-спиновой релаксации в сперматозоидах.Продолжение табл. 1 бл рректор 0; Густ Реда кто аказВН Составитель А,ЕрохиТехред М.Моргентэл 4 Тираж ПодписноеПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж, Раушскэя наб 4/5 оизводственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул,Гагарина, 10