Способ оценки иммунного статуса каракульских овец

(5 ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОВЕДОМСТВО СССРГОСПАТЕНТ СССР) ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ и я,еи ив- сио с овы иммун,Н.МаЦЕНКИ СКИХ МУНЦ А ласти ветезовано для способных резистентого рогаторетение относится к оби может быть исполния слабых и нежизх по неспецифическоголовья крупного и меью изобретения являености и достоверностистатуса животных,Изоб ринарии определе животны ности по го скота, ся повышеоценки имние точмун ного Цель дос мического по миелоперокс после иммун мых животн активности среднего ци дят о низко 0,8-1,08 - о в тного, ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ(54) СПОСОБ ОТУСА КАРАКУЛ Ь л. %17кий государственный у авои нц, С,А.ПлескановскМ.А.Риш Р.В. и др. Биохимическиметоды определения ак и фермент-субстратныхи клеточной покализац 6, с. 43. Брок И. Осн о тигается тем, что в качестве биохиказателя используют активность идазы мышей, определяемую до и изации эритроцитами исследуеых, и по уменьшению через 1 сут фермента на 0,50-0,72 единиц тохимического коэффициента сум уровне, а по уменьшению на ысоком иммунном статусе живо(57) Изобретение позволяет определить состояние иммунной системы новорожденных животных и тем самым проводить раннюю выбраковку нежизнеспособных больных животных. Цель изобретения - повышение точности и достоверности способа. Сравнивают активность миелопероксидаэы нейтрофилов мышей до и после введения внутрибрюшинно эритроцитов тестируемых животных. Через 1 сут после иммунизации из капли крови мышей готовят мазки. Если иммунный статус животного низкий, то средний цитохимический коэффициент активности миелопероксидазы уменьшается на 0,5-0,72 единицы. При высоком иммунном статусе животного активность фермента иммунизированной мыш уменьшается на 0,8-1,08 единиц СПК. 1 табл Широко известно цитохимическое выявление активности миелопероксидазы внейтрофилах периферической крови человека и млекопитающих,Изобретение обладает новизной и существенными отличиями по сравнению с известной цитохимической реакцией определениямиелопероксидазы в нейтрофилах периферической крови человека и млекопитающих,согласно которой проводят дифференцировку клеток миелоидного ряда в костном:моЗге;,флых нейтрофилов и эозинофиловв кроаи,в:связи с чем используют при диагностике лейкозов, в то время как предлагаемый споСоб позволяет судить о состояниииммунной системы тестируемых животных.Реакция проводится на мазках периферической крови, приготовленных на предметных стеклах и фиксированных в течение15.с в смеси спирт-формалин (9;1). Мазки1813388 сидазы. Полученные данные приведены втаблице.Как видно из этих данных, из 25 текстируемых животных, находящихся под наблю 5 дением в течение 1,5 лет, пали 9 животныхот пневмонии и хронического тимпанита,являющегося признаком альбиноидизма.Павшие животные в 1-4-дневном возрастесогласно предлагаемому способу оценки10 обладали низким иммунным статусом, т,е,активность миелопероксидазы нейтрофилов мышей, иммунизированных эритроцитами этих 9 животных, уменьшилась толькона 0,5-0,72 единицы СЦК, Активность миело 15 пероксидазы нейтрофилов мышей, иммунизированных эритроцитами остальных 16животных, уменьшилась на 0,8-1,08 единицСЦК, Все они остались живы, что говорит одостаточно высоком их иммунном статусе,20 Таким образом, изобретение по сравнению с прототипом отличается высокой точностью определения, относительно просто,а самое главное позволяет прогнозироватьтечение и исход многих заболеваний, бакте 25 риальных инфекций, протекающих на фоненизкого иммунного статуса,ф о р мул а и зоб ретен и я Способ оценки иммунного статуса кара кульских овец, включающий определениебиохимического показателя, о т л и ч а ющ и й с я тем, что, с целью повышения точности и достоверности способа, в качестве биохимического показателя используют 35 активность миелопероксидазы нейтрофиловмышей, определяемую до и после иммунизации эритроцитами исследуемых животных, и, по уменьшению через сутки активности фер-.мента на 0,50-0,72 единиц среднего цитохи мического коэффициента судят о низкомуровне, а по уменьшению на 0,8-1,08 - о высоком иммунном статусе животного,Активность миелопероксидазы в нейтрофилах мышей, единицы С КЖивотное через 1 сут после имм низа ии1-3 нев ные ягнята 1,0 1,04 1,02 1,06 1,06 1,10 1,06 1,0 1,04 0,9 , 0,96 1,08 1,04 0,84 0,8 0,961,0 0,86 Черный 1,9 Я;0 2,1 2,1 1,9 1,9 2,0 2,0 1,9 Жив Серый промывают и инкубируют в течение 15-20 мин в среде следующего состава; 200 мг бензидина, 6 мл 96-ного этилового спирта, 4 мл дистиллированной воды, 1-2 капли 30 -ной перекиси водорода,Реактив годен к употреблению в течение 10-12 сут,После промывки проточной водой мазки окрашивают азур-эозином по Романовскому-Гимза 10 мин и микроскопируют с масляной иммерсией. Активность фермента вычисляют полуколичественным методом по Каров и выражают средним цитохимическим коэффициентом (СЦК),Предлагаемый способ заключается в следующем.Мышам вводят внутрибрюшинно суспензию эритроцитов 2% клеток по гематокриту в 0,9%-ном растворе МаС) тестируемых животных, Через день из капли крови мышей готовят мазки .и проводят цитохимическое выявление активности миелопероксидазы. До введения антигена и начала выработки антител СЦК активности мреолопероксидаэы у мышей составлял 2,1 + 0,9 единиц. После иммунизации через 1 сут наблюдается снижение активности фермента, При этом, чем выше иммунный статус животного, тем ниже падает активность миелопероксидазы нейтрофилов мышей, иммунизированных эритроцитами тестируемых животных, чем меньше падает активность, тем ниже иммунный статус организма животного. Более детально это видно на следующем примере,П р и м е р. От 25 животных (в данном случае каракульские овцы) была взята кровь, Эритроциты отделили от плзмы и развели 0,9%-ным йаС до 20 -ной концентрации по гематокриту. По 0,5 мл таких суспензий были введены внутрибрюшинно 25 мышам, На мазках крови мышей через 1 сут цитохимически выявлена активность миелоперокСостояние животного через 1,5 года после тестирования1813388 Продолжение таблицы Состоцни тного че года пос Активность миелопероксидэзы нейтрофилах мышей, единицы отное до иммуниза ции,5 5 1,9 2,0 2,1 ,96 б ер ние овце 0,90,970,96 ер Статистическая об аботка данных, М + 0,9 ф.0,08 ,94+0,07 6+0,09 2.ф.0,09 0 +0,18 99+0,12 Черные ягнятаСерыс ягнятагнята павшие отпневмонииАльбиноиды 0,69+0,020,58+0,04 36 0,04 44+0,03 5 +0,1 +0,06 Примечание, К - разница СЦК активностей миелоперкосидазы мышей до и через 1 сут после иммунизации. Составитель М. БалТехред М,Моргентал ректор Л. Ливринц дактор А,Хорин 3 1792 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж-З 5, Раушская наб., 4/5 твенно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул,Гагарин из 1 Альбиноид Альбиноид Альбиноид Альбиноид Альбиноид Альбиноид Альбиноид 2,0 2,1 1,9 2 0 21