Способ моделирования процессов развития коры больших полушарий

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК ГОСУДАРСГВЕННОЕ П 8 ЕДОМСТВО СССР(57) Изобртальной мучить ускорноворождесутки беревводят дезримышечнтела,тение относитс дицине. Спосо нное развитие ных крысят. Д менности живо ксикартикосте в дозе 2,0 0,8 им. Патбы народов льство ССС 23/28, 1986 я к эксперименб позволяет полтеменной коры у ля этого на 7-14 тных - матерей рон ацетат внут мкг/100 г масс ы ПИСАНИЕ ИЗ АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ 1(71) Университет дружриса Лумумбы. (56) Авторское свидетеМ 1422238, кл. 6 09 В Изобретение относится к медицине и может быть использовано в экспериментальной гистологии для изучения закономерностей раэвитйя (процессов клеточной пролиферации и дифференцировки) различных органов и систем, в частности головного мозга. Оно может быть использовано также в эксперйментальной эндокринологии, фармакологии и других областях медицины.Известно, что введение минералокорти коидов в дозах 0,02-0,8 мкг/100 г массы интактным животным вызывает у них отклоненйя от нормы показателей мочи и крови, аналогичные изменениям, возникающим у человека при первичном альдостеронизме (синдроме Конна) Розен В.БОсновы эндокринологии, М., Высшая школа, 1984).Способ моделирования ускоренного развития коры больших полушарий мозга в литературе намине найден.Прототипом может служить способ моделирования нарушений развития коры большихполушарий у плода путем введения беременным животным биологически активных веществ, отличающийся тем, что, с целью ускорения способа, на 14-й день беременности однократно вводят продигиоэан (см, авт, св. М. 1422238), Однако в Б МОДЕЛИРОВАНИЯ ПРОЦЕСИТИЯ КОРЬ БОЛЬШИХ ПОЛпротивоположность авторам, создавшим модель недоразвития коры больших полушарий мозга, необходимо было получить модель ускоренного ее развития.Цель изобретения - получение ускоренного развития теменной коры.Цель достигается тем, что в способе моделирования ускоренного развития коры больших полушарий мозга путем введения биологически активного вещества в дозах 2,0 - 0;8 мкг/100 г массы тела в период 7 - 14 суток беременности самки, крысам вводят внутримышечно дезоксикортикостерон-ацетата в последние 1 - 2 недели беременностиСпособ осуществляется следующим образом,П р и м е р 1. ДОКА вводили внутримышечно ежедневно крысамгруппы в течение последних 7 суток беременности по 4 мкм. Так как масса тела самки в процессе беременности в эти сроки увеличивалась с 400 г до 500 г, доза ДОКА на 100 г массы постепенно пэдалд с 1,0 мкг до 0,8 мкг.П р и м е р 2. ДОКА вводили внутримышечно ежедневно крысам П группы в течение последних 14 суток беременности по 4 мкг. Так как масса тела самки в эти срокиния, подсчитывали количество тел нейронов 20(отдельно учитывая многоядрышковые) и глиальных клеток в нижних ее слоях (Ч-Ч), на площади, соответствующей 100 окулярным измерительным сеткам стандартной площади при увеличении 90 х 15 х 1,5 и устайавЛивали глиальныййндекс (глий/нейрон); на той же площади с по- мощью той же самой сетки подсчитывали процентное соотношение долей объема те-. менной коры, приходящихся на тела нейро нов, глиальных элементов и нейропиль.По результатам исследования проводили статистический анализ, Различия считали значимыми (по Стьюденту) при уровне Р 0,05, Расчеты выполнены на ДВК, 35Полученные результаты,группа. У новорожденных крысят от интактных самок нейроны коры - недостаточно зрелые клеточные элементы; что выражается в более или менее плотном их 40 расположении и преобладании крупного ядра над цитбппазмой, в отсутствие ипи слабом развитии гранулярнбго эндоппазматического ретикупума, Гпиальныеэлементы представлены преимущественно не дифференцированными и дифференцирующимися глиобластами. Астробласты и микрогпиоциты встречаются редко, обычно около сосудов; Гематоэнцефалический барьер обнаруж 1 лвает признаки структурно-фуйкцибнальной незрелости, вь рака. ющиеся вйедоразвитии базальноймембраны", отсутствием сплошной оболочкй на"кднцеых астроцитарных ножек и ре 50 зрелостй посперних, наличии широких эксгроувазапьных промежутков. Базапьная мембрана имеет вид нешироких полосок спабоосмиофильного фипаментозного материапа, В местах наибольшей удаленности клеточных теп (астробпастов, перицитов) и беременности увеличивалась с 200 г до 500 г, доза ДОКА на 100 г массы постепенно уменьшалась с 2,0 мкг до 0,8 мкг. Дозы ДОКА преднамеренно брали довольно высокими (1,0 - 2,0 мкг/100 ф учитывая, что. его 5 значительная доля задерживается плацентарным барьером, Ийтактные беременные крысы составили 1 контрольную группу. Новорожденные животные также были разделены на 3 соответствующйе группы. 10 Переднетеменную кору новорожденныхкрысят изучали методами световой и электронной микроскопии. На полутонких срезах, окрашенных толуидиновым синим, измеряли толщину коры с помощью окуляр микрометра определяли среднюю величину профильного поля тел, ядер и цитоплазмы 50 крупныхпирамидных нейронов Ч слоя и их ядерно-цитоппазматического бтношесо стороны экстравазальных промежутков она развита очень слабо или полностью отсутствует.И группа. При введении ДОКА в дозах 1,0-0,8 мкг/100 г увеличиваются абсолютная и относительная массы большого мозга, утолщается теменная кора; увеличивается профильное поле тела, ядра и цитойлазмы крупных пирамидных нейронов, уменьша-: ется их ядерно-цитоплазматическое отношение, нарастает число многоядрышковых нейронов. Укрупнение нейронов подтверждается и уменьШением их плотйости на единицу стандартной площади при неизменяющемся количестве долей объема, занятых их телами. Все эти изменения йейронов в совокупности с усилением базофилии цитоплазмы свидетельствуют о повышении степени их дифференцировки. Это подтверждается и следующими ультра-. структурными признаками: увеличением количества митохондрий, численности и протяженности цистерн гранулярного эндоплазматического ретикулума, гипертрофией пластинчатого комплекса Гольджи, повышенным образованием на телах и отростах нейронов конусов роста (мест образо-. вания отростков) и др. Чаще по сравнению с контролем встречаются митотически делящиеся глиобласты, а также дифференцирующиеся глиобласты и астробласты - клетки .: более крупнйе и дифференцированные, чем недифференцированные глиобласты. Плотность расположеййя глиальных элементов и количество долей объема, приходящихся на них, не изменяются. Тем не менее с утолщением теменной коры количество их в целом увеличивается. Повышается содержание микроглиоцитов и отмечаются признаки их активизацйи;В тонком строении гематоэнцефалического барьера установлены ультраструктурные признаки усиления синтетических и обменных процессов в эндотелйоцитахи перицитах (гипертрофия ядер и цитоплазмы, гиперплазия их органелл) удлинение и повышение осмиофильности специализированных плотных контактов между эндотелиоцитами, утолщение базальной мембраны и развитие ее на большем протяжении сосуда; увеличение числа и степени зрелости концевых ножек астробластов.И группа. При введении ДОКА в дозах 2,0 - 0,8 мкг/100 г в течение последних 14 суток беременности в теменной коре крысят возрастает количество долей объема, приходящихся на гпиапьные элементы, при неизменной плотности их расположения, Это является доказательством укрупнения зна читепьной части данных клеток. Митозы гпи1783571 Составитель И.ПавловаТехред М,Моргентал: Корректор А. Козориэ Редактор Заказ 4519 ТиражПодписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКЙТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб;, 4/5 Производственноиздатеевский комбинат "Патент", г. Ужгород, уз Гагарина, 101 5 бобластов отмечаются реже (в сравнении со . ера, Кора мозга у ДОКА - зависимых живо- И группой), Чаще встречаются дифференци- . тных по степени развития гематоэнцефалирующиеся глиобласты и астробласты (по ческого барьера, и дифференцировки сравнению с 1 и И .группами). Обнаружи- . глиальных нервных элементов соответствуваются едйничиые клетки, похожие на 5 ет коре 6 - 7 дневных белцгх крыс.олигодендроциты, Также повышается со-Модель очень удобна для изучения продержание микроглиоцитов и отмечаются: цессов пролиферации и дифференцировки признаки их активации. Еще в большей сте-клеточных элементов мозга и становления пени (в сравнении со И группой) выражены:.гематоэнгцефгалическогко барьера. Ее можно утолщение теменной коры; увеличение аб рекомендовать в качестве одной из моделей солютной и относительной масс большогодля изучения влйяния избытка минерало- мозга; свето- и электронномикроскопичЕ- кортикоидов в системе мать-плод на проские признаки дифференцировки крупных .цессы морфогенеза -различных систем и пирамидных нейронов и ускоренного разви- органов у потомства. Выявленные морфотия гематоэнцефалического барьера. В те функциональные критерии измененийоргаменной коре крысят 11 Г группы более нов у детенышей могут бытьиспользованы выражены(посравнениюси И)деструктив-."в разработке рекомендаций по коррекции ные изменения глиобластов, нервных отро- . этих изменений, что может быть внедрено в стков и сосудистой стенки, не имеющие:практику акушерства и педиатрии, широкого распространения, Однако увеличениедозДОКАсвыше 20 мкг/100 гидли-Формула изобретения тельности воздействий (более 14 суток): . Способ моделирования процессов размогут прйвести к грубым деструктивйым из-вития коры больших полушарий путем ввеменениям, отеку мозга и гибели животных, дения биологически активных веществТаким образом, при меньшихдозах ДО самке на 14 день беременности, о т л и ч а- КА (Игруппа) более выражены процессы,: ю щ и й с я тем; что, с целью получения пролиферации глиобластов, при больших.ускоренного раэвития теменной коры у по-" дозах и длительности воздействия гормо-: . томства вводят дезоксикортикостерон-аценом(11 группа) - процессы ускорениядиф-" тат в дозе 2,0-0,8 мг/300 г массй тела ференцировки нейронов, глиобластов и 30 внутримышечно .в период с 7 по 14 день становления гематоэнцефалйческого барь- беременности,