Способ определения пороговой дозы нитратов

(5)5 О 33/4 ИЯ ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕН торных животных. разом.Группу половсой 150-200 г, уисследуют экстралгинальных мазковривают с самцаминаличию спермато зрелых крыс-самок масоторых предварительно -ный цикл с помощью вари наличии эструса спа самец на 2 самки), По нидов в матке влагалищГОСУДАРСТВЕННОЕ 1 АТЕНТНОВЕДОМСТВО СССРГОСПАТЕНТ СССР) ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПОРОГОВОЙДОЗЫ НИТРАТОВ(57) Использование: изобретение относитсяк медицине, в частности экспериментальной, и может быть использовано в токсикологии, Цель изобретения -. повышение Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной медицине.Цель изобретения - повышение точности и ускорение эксперимента,Поставленная цель достигается тем, что введение исследуемого препарата в различных дозах осуществляют в течение всего периода беременности, начиная с первого дня, а исследование крови проводят после родов, при этом определяют процентное содержание сульфгемоглобина от общего гемоглобина и по его увеличению по сравнению с контролем определяот пороговую дозу.Способ осуще твляется следующим обточности и ускорение способа, Сущность изобретения: затравку крыс исследуемым веществом проводят с первого дня беременности лабораторных животных до родов. После родов забивают самок и исследуют кровь, Определяют процентное содержание сульфгемоглобина от общего гемоглобина крови и по его величине определяют пороговую дозу исследуемого вещества. Положительный эффект: способ . является более быстрым по сравнению с традиционным, что позволяет не только сократить время эксперимента, но и сократить (в 10 раз) средства на содержание лабора- ,ного содержимого устанавливают" первыйдень беременности,В зависимости от количества изучаемыхдоэ химического вещества беременных са-мок рассаживают по группам, включая кон-трольную, не .менее 6-10 в каждую. С4первого дня и на протяжении всего периода ООбеременности самкам перорально вводят Одизучаемое вещество, После рождения йо- фй,томства самок забивают путем декапита-Дции, отбирают их органы и кровь, которыеф,исследуют для определения токсического действия гутем проведения наиболее спе- ., цифических методов исследования для изу-чаемого химического вещества,Порог вредного действия (минимальные дозы либо концентрации, вызывающие изменения биологических показателей, ныходящие за пределы приспособительных физиологических реакций) устанавливают по лимитирующему п)казателю, Как водно из табл,1, таким лимитирующим покнзате1783434 Таблица г аате ее ева в ее ееиаДоза нитратов (мг/кг массы тела беременной крысы по нитрат-иону)ть ттги е в вива аьт1/4 ЯДА 1/20 ДДуо 1/100 ЛДо 1/400 ЯДА КонтрольнаяСульфгемоглобин Д) Активность НАДНг зависимоймстгемоглобинредуктазы 3,470,7с 0,05 3450012 со, 052,72020,12со,а 5 1,65 хаое О 05 1,65 ьо, 1 г 12,5 0,30ро,о 5 9,50,32са,о 5 Содершание ЗЫ групп крови (ммоль/л) 12,900,30 9,7+0,22с 0,05 9,4+о,гг0,05 Ъ т а лем в предлагаемом способе оказался показатель содержания сульфгемоглобина. Концентрация сульфгемоглобина и его процентное содержание от. общего гемоглобина крови подопытных крыс в сравнении с контролем повышалась в зависимости от вводимой дозы, что коррелирует с содержанием нитратов в крови этих животных, Наименьшая концентрация сульфгемоглобина наблюдалась в крови крыс, которым вводили нитраты в течение беременности, в дозе 11,2 мг/кг.Результаты проведения хронического 10-месячного эксперймента приведены в табл.2 (как прототипа, так и предлагаемого способа).По результатам хрОнического эксперимента была установлена пороговая доза нитратов для крыс, равная 20 мг/кг, в то время как при проведении эксперимента по предлагаемому способу пороговая доза составила 11,2 мг/кг, т,е, почти вдвое меньше;Разница в длительности эксперимента составила 9 месяцев и 7 дней,Таким образом,.предлагаемый способ определения порогового действия токсического вещества (нитратов) является более быстрым по сравнению с традиционными, что позволяет не только сократить время эксперимента, но и сократить (в 10 раз) средства по содержанию лабораторных жи вотных. Предлагаемый способ является более чувствительным, что позволит разработать при его использовании действительно безопасные гигиенические нормативы для всего населения, включая его 10 декретивные группы. Формула изобретения Способ определения пороговой дозынитратов, включающий введение лабора торным животным исследуемого препаратаи последующее исследование крови, о т л ич а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения точности и ускорения способа, введение исследуемого препарата осуществляют в раз личных дозах в течение всего периодабеременности животных, начиная с первого дня, а исследование крови проводят после родов, при этом определяют процентное содержание сульфгемоглобина от общего ге моглобина и по его увеличению посравнению с контролем определяют пороговую дозу препарата.1783434 таблица 2 ае ю Доза нитратов (мгlкг массы тела крысы по нитрат-иону) Показатели 20 контрольная .группа 15 10 Гемоглобин Ийп (ммоль/л)йетгемоглобин Ийт (мкмоль/л)Р Оксигемоглобин (3) Сульфгемоглобин (3) 0,12+0) 02 2,950,084 Активность НАД.Н 2 зависимойметгемоглобинредуктазы 2,14220,32со,05 2,94+0,074 2,73+0,197т 0,05 )0,05 Содержание Н групп крови)0,05 Составитель О.СлободяникРедактор Т.Козлова Техред М.Моргентал Корректор М.Керецман Заказ 4512, Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям:и открытиям при ГКНТ СССР 113035. Москва, Ж, Раушская наб 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", 1. Ужгород, ул.Гагарина. 101 1,6210,10,0521,6 и 5, 7 гт 0,057,42+0,440, 050,1310, 02Р 0,05 1,474 0,2р 0,0522,02111,870,057,65+0,370,05 "О, 1210, 0180,05 1,59(0,120,0567,37 Н 2,32со,057,90+0,4470,050,19+0,017с 0,05 1,65 ф 0,125,95+6,967 50 фо,36