Способ размножения ягодных растений в культуре ткани

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИРЕСПУБЛИК 1722317 5)5 А 01 Н 4/00 ГОСУДАРСТВЕННЫЙПО ИЗОБРЕТЕНИЯМПРИ ГКНТ СССР МИТЕТОТКРЫТИЯМ ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕН К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(71) Московская сельскохозяйственная академия им. К.А.Тимирязева и Республиканская плодопитомниководческая станция(53) 581.143,6(088.8) (56) Методические указания по клональному микроразмножению красной и черной смородины, - М., 1986; с,8 - 12.(54) СПОСОБ РАЗМНОЖЕНИЯ ЯГОДНЫХ РАСТЕНИЙ В КУЛЬТУРЕ ТКАНИ (57) Изобретение относится к сельскому хозяйству, а. именно к размножению ягодных растений в культуре тканей. Целью изобретения является повышение приживаемости Изобретение относится к сельскому нозяйству, а именно к способам размножения ягодных растений в культуре тканей,Известны способы улучшения жизнедеятельности растений путем электростимулирования, В указанных решениях улучшение жизнедеятельности достигается путем пропускания токов через растения, электростимуляция осуществляется контактным способом. Работу проводят с растени-. ями, выращиваемыми в открытом и закрытом грунте, таких как подсолнечник, томаты, огурцы,Известен также способ регуляции роста каллуса табака (в стерильных условиях) пу.тем пропускания слабцх токов. Для осуществления способа используют две системы апексов, увеличение коэффициента размножения при одновременном улучшении качества адвентивных побегов. Цель достигается путем вычленения апексов, посадкой их на питательную среду для культивирования до получения первичных побегов. Побеги пересаживают на питательную среду для микроразмножения и культивируют на ней до получения адвентивных побегов, которые разделяют и культивируют до получения растений - регенерантов, При этом в процессе культивирования апексов и первичных побегов осуществляют воздействие на них электростатическим полем напряженностью 5-10 кВ/м, Способ Б позволяет увеличить приживаемость апексов, улучшить рост и количество адвентивных побегов, 2 табл,проводников, с одной из которых связан положительный электрод, а с другой - отрицательный. Первая система проводников находится в контакте с питательным суб с стратом, вторая соединена с каллусом. Кон- ф такт осуществляется с помощью тонких серебряных наконечников, предварительно простерилизованных в автоклаве, Токи пропускают величиной 1 и 2 мкА между средой и каллусом табака, что способствует заложению побегов в каллусе и усиливает его рост.Стимуляция роста каллуса составляет 500 Д, а заложение побегов несущественно,Недостатками способа являются его дороговизна, поскольку наконечники выполнены иэ драгоценных металлов, и большая трудоемкость (необходимость введения электродов в каждую пробирку),Наиболее близок к предлагаемому способ ускоренного размножения черной и красной смородиныНедостатками прототипа являются на этапе введения в культуру меньшая приживаемость апексов и слабое развитие регенерантов: на этапе микроразмножения - образование меньшего количества адвентивных почек и побегов и плохое их качество.Цель изобретения - повышение приживаемости апексов, увеличение коэффициента размножения при одновременном улучшении качества адвентивных побегов,Поставленная цель достигается тем, что регенерация побегов из апексов и размно-, жение микропобегов ягодных растений, находящихся на питательной среде, содержащей цитокинины, проводится в электростатическом поле напряженностью 5 - 10 кВ(м в стерильных условиях бесконтактным способом. Под действием электростатического поля увеличиваются аксиальные градиенты побегов. что приводит к улучшению их функционального состояния, и следовательно, к интенсификации роста и развития.П р и м е р 1. Апексы смородины, взятые с одревесневших побегов в зимне-осенний период, сортов Минай Шмырев, Сеянец Голубки помещают на среду в пробирки на среду Мурасиге-Скуга с добавками по 0,5 мг/л тиамина, пиридоксина, никотиновой кислоты,1,0 мг/л аскорбиновой кислоты, 100 мг/л мезоинозита, 1,0 мг/л БАП, 30 г/л сахарозы и 6 г/л агар-агара, Пробирки ставят в электростатическое поле, Экспериментально выяснено, что максимальный стимулирующий эффект достигается при напрякенности электростатического поля 5 кВ/м на этапе введения в культуру и 10 кВ/м на этапе микроразмножения. При этом отрицательный полюс источника питания соединяют с металлической сеткой, находящейся над растительным объектом, на высоте 25 - 30 см. Положительный полюс подсоединяют к алюминиевой пластинке, находящейся под растительным объектом, Растительные объекты находятся в пробирках или колбах.Для осуществления способа необходима следующая аппаратура: генератор высокого напряжения 8-5-24, алюминиеваяпластинка, токопроводящая сетка с ячейками 2 х 2 мм и провода,Воздействие электростатического поля5 на растительные объекты осуществляют напротяжении всего пассажа в течение 30дней). Это приводит к увеличению приживаемости апексов и улучшению качества регенерантов, что проявляется в образовании10 большего количества листьев и увеличениивысоты микропобегов (см, табл.1).Особенно сильное стимулирующее влияние электростатического поля проявляетсяна этапе микроразмножения,15 П р и м е р 2. Регенеранты сортов смородины Зеленая дымка, Минай Шмырев и М3 - 36-69, полученные на этапе введения вкультуру, были высажены на свежеприготовлен ную среду Мурасиге-Скуга, содержа 20 щую те же добавки, что и в примере 1.Содержание БАП составляет до 3 мг/л, Пробирки с регенерантами помещают в электростатическое поле. Электростатическимполем на этапе микроразмножения воздей 25 ствуют в течение 30 дней, в результате усиливается рост и развитие микропобегов иувеличивается дополнительчая пролиферация пазушных почек (см. табл.2).Предлагаемый способ позволяет повы 30 сить приживаемость апексов, увеличить коэффициент размножения приодновременном улучшении качества адвентивных побегов.Формула изобретения35 Способ размножения ягодных растенийв культуре ткани, включающий вычленениеапексов, посадку их на питательную средудля культивирования до получения первичных побегов, пересадку их на питательную40 среду для микроразмнокения и культивирование до получения адвентивных побегов,разделение адвентивных побегов и последующее культивирование их до получениярастений-регенерантов, о т л и ч а ю щ и й с я45 тем, что, с целью повышения приживаемости апексов, увеличения коэффициента размножения при одновременном улучшениикачества адвентивных побегов, при культивировании апексов и первичных побегов50 осуществляют воздействие на них электростатическим полем напряженностью 5 - 10кВ/м.1722317 Таблица 1 Влияние электростатического поля напряженностью 5 кВ/м на развитие апексов смородины ( к контролю)Таблица 2 Влияние электростатического поля напряженностью 10 кВ/м на рост и развитие побегов смородины в стерильной культуре ф к контролю) 1Составитель Л.ГавриковРедактор Л.Пчолинская Техред М.Моргентал орректор Н,Ревская аказ 1002 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СС . 113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5 одственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул,Гагарина, 101