Способ получения биостимулятора “спленивита” из селезенки животных

СОЮЗ СОВЕТСКИХ СОЦИАЛИСТИЧЕСКИ РЕСПУБЛИК 869 А 1(19)юою А 23 К 1/00 ИСАН ИЗОБ ТЕ У ОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯРИ ГКНТ СССР ТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛ(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОСТИМУЛЯТОРА "СПЛЕНИВИТА" ИЗ СЕЛЕЗЕНКИЖИВОТНЫХ(57) Изобретение, относится к сельскому хозяйству. Цель изобретения - повышение эффективности биостимулятора "Спленивита".Способ получения биостимулятора из селезенки животных включает измельчение пульпы, экстрагирование физраствором, термическую обработку, отделение осадка, фильтрацию и стерилизацию, причем после измельчения пульпы ее замораживают при Изобретение относится к сельскому хозяйству.Цель изобретения - повышение эффективности препарата.П р и м е р 1, На мясокомбинате во время убоя здоровых животных или не позднее 2 ч после нутровки их отбирают 10 кг селезенки, Очищают от жира и помещают в холодильник, выдерживают 5-6 сут при Т 2-4 С или можно заморозить в камере с Т (-18)+20) С и хранить в течении месяца.Через 5 - 6 сут селезенку отмывают водой, снимают капсулу, а пульпу гомогенизитемпературе (-)18,0 - 20 С в течение суток и размораживают 4 - 6 ч при 18 - 20 С, экстрагирование пульпы проводят забуференным физраствором в кислой среде при рН 4,4 в равных соотношениях-пульпы и физраствора, а после отделения осадка полученный фильтрат дополнительно фильтруют и стерилизуют в аппарате Сальникова и добавляют витамин 1 В 12 в количестве, 40 г на 1 л полученного препарата. При испытании спленивита на телятах установлено снижение заболеваемости на 10 и повышение среднесуточных привесов в среднем на 10 г на голову, При испытании на поросятах наблюдалось снижение падежа животных на 7- 13,8 и повышение привесов на 38,8 г по Б сравнению с контролем, Применение спленивита супоросным свиноматкам способствует снижению мертвых поросят на 6,6, увеличивая среднесуточные привесы на 20,7 г и выход поросят на 2,1 поросенка от каждой свино-матки. руют. Для повышения биологическои активности клеток гомогЬнизированную ткань замораживают при Т (-18)-(-20) С в течение суток, после чего медленно при комнатной температуре 18 - 20 С дефростируют (размораживают), а затем заливают забуференным физраствором в соотношении 1:1 (плюс 1 забуференного физраствора на выкипание), кипятят при 100 С в течение 1 ч, остужают до 40 - 50 С балластные вещества удаляют фильтрацией. Отфильтрованный раствор дополнительно пропускают через фильтрующе-стерилиэующие пластины в аппарате5 10 15 телятамдо 1 мес, возрастастарше 1 мес 1,0 1,5 1,5 2,0 2,0 3,0 20 30 35 40 50 55 Сальникова. Для фильтрации и стерилизации используют трехрамный фильтр ФС-З.Основные параметры фильтра: рабочеедавление внутри фильтра КПА (кгс мм) - 20(0,2); количество рам - 3; габаритные размеры, мм: в плане 360 334, высота 165, Диаметр пластин ГОСТ 480 68, мм:, фильтрующих 300, стерилизующих 300; толщина пластин, мм; фильтрующих 3-4, стерилизующих 4. Пропускная способностьпластин, л/ч и: фильтрующих 1920, стерилизующих 77. Стерильно добавляют витамина 812 из расчета 4000 мкг на 100 млфильтрата, расфасовывают по флаконам,Проверяют рН, стерильность, токсичность (О,З мл и/к 10 белым мышкам, вестинаблюдение в течение 7 сут - мышки должны быть здоровыми).Забуференный раствор готовится в экстемпоре и состоит иэ одной части однозамещенного фосфорно-кислого калия (9,006 на1 л дистиллированной воды, рН 4,4) и 9 частей физраствора (0,85-ной хлористыйнатр).Биологическую активность вещества,выделенного из селезенки, оценивали понарастанию массы тела и способности увеличивать число антителообразующих клетокв селезенке экспериментальных животных.П р и м е р 2, Эксперименты, проводимые на белых мышках весом 20 г; животныебыли разделены на три группы: контрольную и две опытных.Животным первой опытной группывнутрибрюшинно вводили по 0,2 мл разведенного 1:10 препарата, полученного из селезенки по предлагаемому способу.Животным второй опытной группы вводили внутрибрюшинно по 0,2 мл разведенного 1:10 тканевого препарата, полученногоиз селезенки по В.П. Филатову (известныйспособ).Животным контрольной группы вводили,по 0,2 мл физиологического растворавнутрибрюшинно,Через,1 сут животным всех групп ввеливнутрибрюшинно по 0,2 мл 25 О-ной взвесиэритроцитов барана.За 5 дн вес животных контрольной группы увеличился в среднем на 0,65 г, первойопытной на 1,23 г, второй опытной на 0,8 г.Через 5 дн животных всех групп убили,В,селезенке, взятой от них, методом локального гемолиза определили число антитело образующих клеток (АОК),Установлено, что у контрольных животных на 10 млн спленоцитов имелось 592АОК. У животных первой опытной группы1993 АОК, у животных второй опытной группы 80 АОК. Таким образом, предлагаемый препарат обладает тканеспецифической стимуляцией иммунокомпетентных клеток вселезенке и значительно по этим свойствампревосходит тканевый препарат.Эксперименты проводили на телятах,поросятах и свиноматках.П р и м е р 3. Животные были разделенына восемь групп: контрольные и подопытные,Подопытным животным трехкратно синтервалом в 7 - 10 дней вводили полученный препарат "Спленивит" в дозах, мл:поросятам:до 1 мес. возраста 0,2 0,2 0,3старше 1 мес 1,0 1,0 1,0-1,5 свиноматкам за 30, 20, 10 дней доопороса 5,0 5,0 5,0 По результатам опыта получены следующие данныеПрименение "Спленивига" телятамстарше возраста 1 мес (97 годов) повышаетих общую резистентность, позволяет лучшеадаптироваться к новым условиям, снижает заболеваемость на 10 О, тем самым способ. ствует повышению среднесуточных привесов (951-907 г) по сравнению с контрольной группой (107 голов). У телят после. трехкратного внутримышечного введения препарата по сравнению с контрольными, не получавшими "Спленивит", повысилось Содержание общего белка, гаммаглобулина в сыворотке крови, бактерицидная активность его. Заболеваемость респираторными болезнями сократилась в 1,5 раза, а среднесуточные привесы возросли в среднем на 40 г на голову,Применение "Спленивита" новорожденным поросятам (307 голов (способствовало снижению падежа на 7 ОО (18,7 - 11,77 ь) выбраковке их до 35-дневного возраста на 13,8 О (40,9 - 27,1) и повышение среднесуточных привесов на 38,8 г(206 - 167,2 г) по сравнению с контрольной группой (336 голов). Применение спленивита поросятам на откорме повышает устойчивость их к заболеваниям, снижает выбраковку на 13 оь, повышает среднесуточные привесы на 50 г по сравнению с поросятами, которым "Спленивит" не применяли.Применение спленивита супоросным свиноматкам способствует повышению реэистентности их, снижая рождение мертвых поросят на 6.6 О, улучшая сохранность нор1695869 6 Формула изобретения Способ получения биостимулятора из селезенки животных, включающий измельчение пульпы, экстрагирование ее физраствором, термическую обработку, отделение осадка, фильтрацию и стерилизацию, о т л ич а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения Составитель В.Егоров Редактор М.Петрова Техред М.Моргентал Корректор В.ГирнякЗаказ 4246 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва. Ж, Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул. Гагарина, 101.мально развитых поросят к отъему на15,8, увеличивая среднесуточные привесы на 20;7 г и выход поросят на 2.1 поросенка от каждой свиноматки. эффективности препарата, после измельчения пульпы ее замораживают при температуре -18-20 С, в течение суток иразмораживают 4-6 ч при температуре 18- 5 20 С, а экстрагирование пульпы проводятзабуференным физраствором в кислой среде при рН 4,4 в равных соотношениях пульпы и физраствора, а после отделения осадка полученный фильтрат дополнительно филь труют и стерилизуют в аппарате Сальниковаи добавляют витамин В 12 в количестве 40 г на 1 л полученного препарата.