Способ количественного определения и -каротина в биологических материалах

/02 ЕТЕНИЯ инси По Йейег Асса2,сЬгошаайепез.Чда 86,Изобретение кой химии и мо при контроле з количеств (- и продуктах пита ческих матери месей в потокеэопропанола в цикло относится к анжет быть испольа содержанием ми6 -каротина вния и других бзлах. мешающих п о раствора алитичес- лен овано 2 Егекс не.р и м еотина вавками и ормах, ологиеф - и астворах тамина Определественных обавок А, Ее споротин Цель изобресоба и сокраще1 ения - упрощение времени анали 1 - . 30 мкл на в циклог добавок дру А, Е вво онку с с-карот и беэ добавк иноидо Способ включ ции; омыпение ца, экстракцию номе ВВод экстр кую колонку с щее разделениевитамиАическуюжидкостнграйа х ка хроматог бом С 18 накол го микроколоночн Иилихром" и элю 1 - 2 Х-ным раств го х омат уют Ж- и 3-каротином иэопропанола в ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И (ЛНРЫТИЯПРИ ГКНТ СССР ИСАНИЕ ИЗОБ(71) Научно-исследовательскийтут животноводства Лесостепилесья УССР(56) Апйге А. а.о. Зхшц 1 апеашдпасдоп оЕ 0-апй -сагойепе.Вой пцг 1 апйдса, 1975, ч. 24,р. 225-28,НЫцгац 1 оп Я. а.о. "ЪнцЫСодгарЬде Йейегв 1 паСдоп ог сасагС 1 е зегыа апй 1 жег - Тпшип апй Вайгач.с 1 оп ВезеагсЬ, 1ч. 56, И 4, р. 339-344. ает следующие операаналиэируемого образкаротинов циклогексаактав хроматографичессиласорб С 18, последую- и -каротина и отде 2Б КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕ-КАРОТИНА В БИОЛОГИЧЕС(54) СПОСОЛЕНИЯ М- И/3КИХ ИАТЕРИАПАК(57) Изобретение относится к аналитической химии и может быть использовано в сельскохозяйственном проиэводстве, пищевой промышленности, в здравоохранении при контроле эа содержаниеммикроколичеств К- и /3-каротина в кормах, продуктах питания и других биологических материалах, Цель изобретения - упрощение способа и сокращениевремени анализа. Способ включает омыление анализируемого образца, экстракцию каротинов циклогексаном, ввод экстракта в хроматограйическую колонку1651199 Таблица 1 Определено Содержани сопутствяощеговещества,айдено изомероваротина, мг/л опутст вуюее вещеро 8 каротин мг и О, 010 О, 050 О, 100 О, 010 0,500 О, 100 0,100 О, 100 О, 010 О, 0500,100 0,500 0,010О, 100 О, 100 О, 100,03 ,08 ,04 , 04 ,05 ,05 А 100 Е 100 и ВитаминВитаминКаротинады 0,03 0,06 растений на хроматографической колонке и опрержание по светопоглощению при 460 нм; Каротинделяют ы выделяютсуммарное с пиклогексане с детектированием в УФ- спектре при 274 нм. Расчет содержания М- и /5-каротина ведут по площадям их хроматографических пиков. Результаты определения О- и ф-каротина в искусственных растворах приведены в табл.1.П р и м е р 2. Определение 0- и -каротина в биологических материалах.К 0,5-5,0 г анализируемого образца 10 добавляют 5-20 мл 103-ного спиртового раствора КОН и ведут гидролиз в течение 30 мин при 60 С в атмо- сфере инертного газа. Экстрагируют ф- и 3-каротин 1-5 мл циклогексана, 15 очищенного от примесей, вводят 1 30 мкл экстракта вхроматографическую колонку (сорбент силасорб С 18) жидкостного микроколоночного хроматографа "Инлихром" и элюируют 0- и 3- 20 каротин 1 - 2 Х-ным раствором изопропанола в циклогексане с детектированием в УФ-спектре при 274 нм. Расчет содержания ф- ир-каротина ведут по площадям их хроматографических пиков . 25Результаты определения Ф- и 3-каротина в биологических материалах приведены в табл. 2.Как следует из представленных в табл. 1 и 2 данных, предлагаемый 30 способ может быть использован для анализа любых биологических материалов . Чувствительность определениями - и/3- каротина равна 0,01 мг/л, что является достаточным для анализа биологических материалов, при этом определению ф" и 3-каротина не мешают 1000-крат ные избытки других каротиноидов, витаминов А и Е. Таким образом, предлагаемый способколичественного определения Ф, - и 3 каротина в биологических материалахпо сравнению с известным способомимеет следующие преимущества: способ позволяет упростить опреде" ление К- и-каротина, так как не требуется проведение таких сложных операций, как упаривание экстракта досуха, растворение сухого остатка в малом количестве органического растворителя и отделение мешающих примесей на предварительной хроматографической колонкеспособ позволяет в 2 раза сократить время анализа за счет сокращения числа последовательных операций. Формула изобретенияСпособ количественного определения р- и (3-каротина в биологических материалах, включающий омыпение анализируемого образца, экстракцию каро- тинов, ввод пробы экстракта в хроматографическую колонку, заполненную сорбентом, и разделение компонентов пробы в потоке элюента, о т л ич а ю щ и й с я тем, что, с целью упрощения способа и сокращения времени анализа, в качестве экстрагента каротинов используют циклогексан, в качестве сорбента - силасорб С 18, а разделение осуществляют в потоке 1 - 2%-ного раствора изопропанола в циклогексане.0,02 0,05 20,60 0,05 30,86 0,01 376,95 0,06 402, 70 О, 06 14,7724,90 16, 14 0,05 0,01 1,30 0,24 0,37 4,69 0,06 6,51 О, 02 0,03 0,06 0,14 1,69 1,872,62 0,04 Не обн.0,01 0,03 0,01 0,80 0,01 е 0,23 0,80 0,41 2,45 0,063,29 0,01 0,05 0,04 0,20 Редактор В.Бугренкова Подписное Тираж 396 Заказ 1604 ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, 3-35, Раушская наб., д. 4/5Производственно-издательский комбинат ."Патент", г. Ужгород, ул. Гагарина, 101 Зеленая масса люцерны (абсолютно сухое веществ) То жеЗеленая масса кукурузы (абсолютно сухое вещество) То жеСено люцерновое (абсолютно сухое вещество)То жеСено овсяное (абсолютно сухое вещество)То жеМорковь (абсолютно сухое вещество) То жеПлазма крови (натуральная влажность)То же, Молоко (натуральная влажность) То жеПечень цыплят (натуральная влажность)То же Составитель В.ТолстыхТехред М.Иоргеитал КорректорС,Шекмар