Способ определения стадий острого перитонита у детей

ОЮЗ СОВЕТСКИХ ОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 1522101 С 01 И 33/4 ПИСАНИЕ ЕТЕНИЯ ство СССР 00, 1982,ПРЕ ДЕТ мин. обрете Целью изобретение точности и упрСпособ осуществазом.После .установле вля ся повьппе особа.дующим обенно к щениеяют сл острог быть и степени т коза острого цесса при х органов брюш еритонита производроВи через силико т з.аб зиров енозной ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОЩРЦТИЯМПРИ ГКНТ СССР АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ(54) СПОСОБ О ДЕЛЕНИЯ СТАДИЙ ОСТРОГОПЕРИТОНИТА У ЕП(57) Изобретение относится к медицине,в частности к хирургии, и может бытьиспользовано для определения стадийострого перитонита у детей. Целью изобретения является повышение точностиспособа за счет возможности определениятоксической стадии острого перитонита,а также упрощение способа. Для этого всыворотке венозной крови определяют активность калликреина, предварительноотделяя его от остальных компонентовкининовой системы и других трипсиноподобных ферментов. После этого калликреин определяют в фильтре спектрофотометрическим методом по скорости гидролиэа этилового эфира И-бензоил-Ь-аргинина, Свободный калликреин практически отсутствует в норме. Кровь больного ие относится к медицине, пособам определения стаперитонита у детей, и моользовано при определении сти воспалительного прорургических заболеваниях ной полости у детей. центрифугируют. Для получения неадсорбированной фракции белков сыворотки крови 0,25 мл разводят в 3 раза фосфатным буфером, добавляют 2,5 мл сефадекса А, смесь перемешивают, добавляя 3,0 мл 0,02 И фосфатного буфера рН 7,0, содержащего 0,05 И,ИаС 1. Суспензию переносят на фильтр и фильтруют. Фильтрат переносят в мерную пробирку и доводят объем до метки 0,02 И фосфатным буфером, После этого к 1,0 мл Фильтрата добавляют 1,0 мл О, 1 11 трисбуфера рН 8,0 и 1,0 мл 1,5.10 И р-ра БАЭЭ, В контрольную пробу берут 2,0 мл 0,1 М трис-буфера рН 8,0 и 1,0 мл 1,5 10 З М БАЭЭ,Активность калликреина с: определяют спектрофотометрически при длине волны 253 нм и 25 , При значении этого показателя 54,54 мед/мл и менее определяют реактивную стадию, при значении 58, 18 - 90,90 мед/мл - токсическую, а при значении 94,54 мед/мл и более - терминальную стадию острого Меб перитонита у детей, Применение способа в медицинской практике позволяет повысить точность диагностики за счет возмож- у р ности определения токсической стадии острого перитонитаКроме того, способ прост в исполнении и для его осуществаай ления требуется 4511 полиэтиленовую или силиконизиронанную пробирку, Лктинность калликреина определяют следующим методом. Калликреин отделяют от остальных компонентов кипиновой системы и других трипсиноподобных ферментов путем кратковременного контакта исследуемого материала с суспензией ДЭАЭ-сефадекса Лн присутствии 0 02 М калий натрий фосфат 10 ного буфера рП 7,0. После отделения анионита фильтрованием калликреин определяют вфильтрате снектрофотометрическим методом по скорости гидролиза этилового эфира И-бензоил-Ь-аргинина. 15 Свободный (актинный) калликреин прак= тически отсутствует в нормальной сыворотке крови. Кровь больного центрифугируют при 3000 об/мин 15 мин. Для получения неадсорбированнойфракции бел- ц ков сыворотки крови О, 25 мп сыворотки крови разводят в 3 раза 0,02 М фосфатным буфером рН 7,0 и добавляют 2,5 мл густой суспензии сефадекса Л, уравновешенного тем же буфером, Смесь осторожно перемешивают 10 мин тонкой стеклянной палочкой, добавляют 3,0 мл 0,02 М фосфатного буфера рН 7,0, содержащего 005 М НаС 1, перемешивают еще 2 мнн. Переносят суспензию на фильтр и Фильтруют с небольшим отрицательным давлением, фильтрат количестненно переносят в мернуо пробирку на 5,0 мл, объем фильтрата доводят до метки 0,02 М фосфатным буфером.35Для определения активности калликреина к 1,0 мп фильтрата добавляют 1,0 ил 0,1 М трис-буфера рН 8,0 и 1,0 ил 1,5 "10-М раствора БАЭЗ в том же буфере, В контрольную пробу берут 2,0 мл 0,1 М трис-буфера рН 8,0 и 1,0 мл 1,5 10 М БАЭЭ (проба на спонтанный гидролиз эфира рН 8,0). Пробы переливают в кюветы спектрофотометра и измеряют прирост оптической плотности при длине волны 253 нм и 25.15 мин, отсчеты делают через каждые 5 мин, Содержание калпикреина выражают в миллиединицах н 1,0 мл сыворотки крови и вычисляют но формуле:15 50 Л: 1 3 5 -1000------- д В 3636,ц 15025 М 3 где д В , э - прирост оптической плотности за 15 мин (при линейном ходе реакции),1, 1 - Ю ,соответствующий образованию 1 икмоль И-бензоип-Ь-аргинина из БЛЭЭв 1 мл пробы,3 - объем пробы в кювете,ил,5 - объем неадсорбированнойфракции, мл,0,25 - количество сыворотки крови взятого анализа,мл.При активности калликреина,равной54,54 мед/мл и менее, определяют реактивную стадию при значении 58,1890,90 мед/мл - токсическую, при значении 94,54 мед/мп и более - терминальную стадно острого перитонитау детейСпособ определения стадий острогоперитонита был применен у 157 больныхн возрасте от 1 мес до 15 лет.Приэтом в реактивной стадии острого перитонита было 43 ребенка, активностькалликреина сыворотки крови составила 44,89+1,04 мед/мл,= 7,54Р С 0,5, В токсической стадии активность калликреина составила 7 б,24+ФО, 48 мед/Мл, Б = 4, 02, Р ( 0,05, В терминальной стадии острого перитонитаактивность калликреина составила103,5510,81 мед/мл, ь= 4,05, Р 0,05,П р и м е р1,Больной К 1 год 5 мес. После клинико-лабораторного обследования установлеп диагноз; Острый деструктивный аппендицит, перитонит, реактивная стадия, Для определения активности калликреина взят 1 ил венозной крови, Прирост оптической плотности составил дВ,0,015, а15содержание калликреина соответственно ЛВх 3636 = 0,015 х 3636 =- 54,54 мед/мл, что соответствует реактивной стадии острого перитонита. Больному проведена предоперационная подготонка как при реактивной стадии. Изменения, обнаруженные в брюшной полости но время операции, течение заболевания и динамика состояния больного в послеоперационном периоде подтвердили правильность установленного диагноза - реактивной стадии острого перитонита.П р и м е р 2, Больной Ю 12 лет, После клиника-лабораторного обследования установлен диагноз; перфоративная язва желудка, перитонит,реактивная стадия, Взят 1 мл ненозной крови для определения активности капли креина, Прирост оптической плотности составил ЛВ ,= 0,025, а содержание калликреина - 90,9 мед/мл,. что соот1522101 Формула изобретения Способ определения стадий острого перитонита у детей путем исследований сыворотки крови, о т л и ч а ющ и й с я тем, что, с целью повышения точности и упрощения способа,определяют активность калликреина и при значении этого показателя 54,54 мед/мл и менее, от 58,18 до 90,9 мед/мл и 94,54 мед/мл и более определяют соответственно реактивную, токсическую и терминальную стадии острого перитонита. Составитель Н.ВалееваТехред Л.Олийнык Корректор Э,Лончакова Редактор Н.Горват Заказ 6953/41 Тираж 789 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г,ужгород, ул, Гагарина, 10 ветствует токсической стадии острого перитонита. Больному произведено предоперационнал подготовка, соответствующая токсической стадии перитонита,Иэ 5 менения, обнаруженные в брюшной полости во время операции, тяжелое течение послеоперационного периода и медленная положительная динамика состояния больного подтвердили правильность установленного диагноза - токсической стадии острого перитонита.П р и м е р 3, Больной В., 16 дней, После клинико-лабораторного обследования установлен диагноз: язвенно-не кротический энтероколит, септический перитонит, терминальная стадия. Взят 1 мл венозной крови для определения активности калликреина. Прирост оптической плотности ЛЭд = 0,026, а со держание калликреина - 94,54 мед/мл, что соответствует терминальной стадии острого перитонита, Ребенку проведена предоперационная подготовка, соответствующая терминальной стадии перито нита, Изменения, обнаруженные в брюшной полости во время операции, крайне тяжелое состояние и течение заболевания (ребенок через сутки после операции умер) подтвердили правильность 30 установленного диагноза.П р и и е р 4, Больная Р., 4 года 8 мес. После клинико-лабораторного обследования установлен диагноз: пельвиоперитонит, реактивная стадия. У ре.бенка взят 1 мл венозной крови для определения активности калликреина. Прирост оптической плотности составил д 0 = 0,016, а содержание калликреина - 58,18 мед/мл, что соответствует токсической стадии острогоперитонита. Больной произведена предоперационная подготовка соответственно токсической стадии, Изменения,обнаруженные в брюшной полости во время операции, течение заболевания и динамика состояния больного подтвердили правильность установленного диагноза - токсической стадии перитонита. Применение способа в медицинской практике повышает его точность эа счет возможности определения токсической стадии острого перитонита.Способ прост в исполнении, для его осуществления требуется 45 мин, не требуется дорогостоящего оборудования и реактивов.