Способ обнаружения вирусных инфекций растений

, 1507 01 С 7 1 И 21/35 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТПО ИЭОБРЕТЕНИЯИ И ОТНРЫТИПРИ ГННТ СССР 3, 1 ,Л.-11. 3 Цса 1 , , 1 ЦОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ венныи уникоБойко я раститель.16-17.ВИРУСНЫХ ИИтся к с быть и е и Аитир ре ия по нению здоровым. ния у ра страцию сп араженного 3800 см. спектры, В Производят реги лощения листа з в области 400- ают полученные что они различ - 1750 см(120чаются достовьных областях Сравинеспекдиаются в об 00-5700 нм ерно в дру инфракрасн бретения - ускорение пужения и снижение его 850разлитрал поглощения чника в ии едставляет цов риме (Кар ят р 00 " стру лос,е, в пер ого пог АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(54) СПОСОБ ОБНАРУЖЕНИЯФЕКЦИЙ РАСТЕНИЙ(57) Изобретение относскому хозяйству и можезовано в растениеводстсологии. Цель изобрете Изобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано в растениеводстве и фитовирусо логииЦель иэоцесса обнартрудоемкости.П р и м е р 1. Лист здоррастения подсолнечника помещадержатель для пленочных обрафракрасного спектрометра, наИКС(ЛОМО, СССР) или И Цейсс, Мена, ГДР), и произвогистрацию спектра в области3800 см-, при скорости реги160-400 см -/мин,Аналогичную операциюс листом подсолнечника,вирусом табачной мозаикдень после заражения, тскрытой инФекции)ние обнаружения процесса и снижениеего трудоемкостиДля обнаружениявирусных инфекций листья здоровогорастения - стандарта помещают в инфракрасный спектрометр и регистрируют спектры в области 850-1750 смпри скорости регистрации 160 -400 см /мин, Аналогичную операциюпроводят с листом подсолнечника, за -раженным вирусом табачной мозаики(на 5-й день после заражения, т.е.в период скрытой инфекции)Сравнивают полученные спектры, Зараженнымсчитается образец, характеризующийся максимальной интенсивностью погло апазона.Спектр инфракрасного листа здорового подсолн тервале 850-1750 см п собой довольно широкую ктура которой мало выраж можно сказать с достато верностью о наличии мак щения с частотами около (нуклеиновая кислота) и (белок) с поглощением в относительных единиц со но (с учетом уровня фон3 150723 щения, определяемого базовой линией) .Спектр инфракрасного поглощения листа подсолнечника (сорт Кировоград -5 ский), зараженного подсолнечниковым штаммом вируса табачной мозаики, в интервале 850-1750 см- значительно отличается от спектра здорового листа в качественном и количественном отношениях. Эти существенные различия проявляются, прежде всего, в общем виде спектров: у зпорового листа имеются 2 выраженных максимума поглощения (на частотах 1080 и 1669 см -"), а в спектре зараженного листа 9 максимумов, шесть из которых имеют частоты около 1069; 1152; 1396; 1534 и 1652 см Вместе с тем различается поглощение на близких по частоте максимумах у здорового и зараженного листьев у зараженных листьев поглощение значительно больше, Отношение поглощения у зараженных листьев начастотах 1069 .и 1652 см- к поглощению здоровых листьев на тех жечастотах составляет 2,4 и 1,7.В целом чмеет место возрастаниепоглощения на частотах, зтвечаю" 30ших содержанию белков н нуклс.иновых кислот. Отношение интенсив .ностей поглощения на частотах1652-1069 см . у зараженных листьевравно 1,28, а на частотах 16671080 сму больных листьев равно0,88, т.е. имеет место перераспределение поглощения в спектрах здорового и зараженного растений. Приэтом наблюдается также сдвиг максимума поглощения у зараженного листа,т,е. (-15) см , и нуклеиновой кислоты с 1080 см - до 1069 см , т.е.частота снижается на 1 1 см. Наряду с изменением общего вида спект 45ров это служит диагностическим признаком вирусной инфекции в растениях,П р и м е р 2. Аналогично тому,как описано в примере 1, поочередно1регистрируют спектры инфракрасногопоглощения листа здорового томата(сорт Киевский) в интервале 8501750 сми зараженного вирусом табачной мозаики (сорт Невский).Сравнение спектров инфракрасногопоглощения здоровых и зараженныхлистьев свидетельствует об их существенных различиях. В частности,спектр здоровых листьев имеет слабовыраженную структуру - отмечено только 3 максимума на частотах около1089; 1442 и 1672 см. В то времякак в спектре листа зараженного растения наблюдается структура из 8 пиков, лять иэ которых имеют высокуюинтенсивность поглощения (частоты:1074; 1162; 1390; 1555 и 1667 см -),Показателем проявления структурыявляется отношение поглощения в максимуме и минимуме полосы поглощения. Они значительно различаются уздоровых и зараженных листьев. Например, отношение поглощений на частотах 089 (максимум) и 12 19 см (минимум), отвечающих нуклеиновой кислоте у эдоровь.х растений составляет1,25, а у. больных - 1,85. На частотах 1442 (максимум) и 15 10 см(минимум) у эдоровьн; растений это отношение равно 1, 17, а у зараженных(частоты 1401 и 1510 см ) - 1,75.Для листьев томата также как под"олнечника регистрируется возрастание интенсивностей поглощения на основных полосах, отвечающих белками нуклеиновым кислотам: это возрастание составляет и учетом фоновогопоглощения 1,2 на частоте около 107011000 сми 1,4 на частоте около-1660 см . Сдвиг частоты имеет место для частот, отвечающих нуклеиновойкислоте (1089 - 1074 см ) и белку(14422 - 1401 см ),11 олученные данные подтвержденыэлектронномикроскопическими и серологическими анализами.Предлагаемый способ значительно упрощает процесс обнаружения вирусных инфекций и позволяет достичь желаемого результата с меньшими затратами труда и средств,Формула изобретенияСпособ обнаружения вирусных инфекций растений, включающий измерение показателей у анализируемых растений и растения-стандарта и сравнение их, по результатам которого судят о наличии вирусной инфекции в растении, отличающий с я тем, что, с целью ускорения обнаружения процесса и снижения его трудоемкости, в качестве показателя регистрируют инфракрасное поглощение листаЗаказ 5470/2 Тирах 621 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГЕНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раущская наб., д. 4/5Производственно-издательский комбинат "Патент", г.узтород, ул. Гагарина,101 5растений в спектральной области 850-1750 см-, при этом заракенным вирусной инфекцией считают образец 1507253 6характеризующийся перераспределением интенсивностей, по сравнению со здоровым стандартом.