Способ отбора форм тритикале на выполненность зерна

(56) Сборник научных работ НИИ сельского хозяйства централвно-черноземной полосы им. В.В. Докучаева, т, 13,вып,1, ч. 2, 1976, с. 130-137.(54) СПОСОБ ОТБОРА ФОРМ ТРИТИКАПЕНА ВЫПОЛНЕННОСТЬ ЗЕРНА(57) Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к биохимическим анализам белков растений,и может быть использовано : в селекции на повьппение качества зерна.Цель изобретения - повьппение эффек ОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОЧНРЫТИРИ ГКНТ СССР тивности отбор а з а счет воз мож ностицеленаправленного выделения формтритикале с генетически обусловленной выполненностью зерна. Зерновикиформ тритикале измельчают, получаютбелковые вытяжки. Перед проведениемэлектрофореза в ячейки геля вносятвытяжку, в оставшуюся часть вытяжкидобавляют трипсин, размешивают и наносят в следующую ячейку геля. Послеэлектрофорез а пластины геля окрашивают на проявление амилазного спектра и анализируют данные спектра. Вкачестве форм с выполненным зерномотбирают формы, в электрофореграммахкоторых имеются зоны с меныпей активностью амилаз алейронового слоя и появляются дополнительно фракции с 5 -амилазной активностью прн добавлениитрипсина. 2 ил., 1 табл.И зобретение относитея к сельскомухозяйству, в частности к биохимичес" ким анализам белков растений, и может быть использовано в селекции на повышение качества зерна.Цель изобретения " повышение эффективности отбора за счет возможности целенаправленного выделения форм тритикале с генетически обусловленной 10 ,выполненностью зерна.На Фиг.1 представлена электрофореграмма Формы с выполненным зерном, на фиг.2 - то же, с невыполненным эер" ном, где С - трек беэ трипсина, Д - 15 трек с трипсином, 1(а) - зона анали" за апейронового слоя, 1(б) - эона 3-амилаз.П р и м е р. Зерновики измельчают, заливают трис-глициновым буфером, рН 20 8,3, оставляют на холоде на 3 ч либо на ночь. Электрофорез проводят в плас" инах ПААГ, 8,5 . Перед анализом в ячейки геля вносят вытяжку, затем в оставшуюся часть вытяжки добавляют 25 трипсин (5 мг), размешивают и наносят в следующую ячейку геля После электрофореза ппастины геля окрашивают на проявление амилазного спектра. Для этого гель вы держнвают в крахмальном клейстере 5 мин (крахмал для,иодометрии), гель промывают водой и помещают на 5 мин в ацетатный буфер, рН 5,5, опять промывают водой и переносят в 6 раз разбавленном водой 0,3/-ном 1 в З -ный К. Отбирают образцы с меньшей шириной амилаэ алейронового слоя и среди них - образцы, имещцие дополнительные фракции с -амилазной активностью в треке с трипсином по сравнению с треком без трипсина.Проведена оценка 59 образцов тритикалепо ширине амилаз алейронового слоя и наличию дополнительных ком 45 понентов в зоне 1-амнлаы в сравнении с общим числом с -амилазных Компонентов и шириной компонентов ПП 20, визуальной оценкой выполнен- ности эндосперма по 10-балльной системе, принятой в ВИРе, и массой 1000 зерен; проведен пересев и оцен.ка потомства. Данные приведены в таблице, где из 50 семей селекционной популяции В 72 выделено 6 семей,характеризующихся меньшей активностью амилаз алейронового слоя иприсут ствием дополнит ельных компонентов в спектре 3-амилаз после действия трипсина, которые отобраны вкачестве форм с выполненностью зерна.Из данных таблицы видно, что в треке отобранной семьи В 59 после прибавления трипсина появились новыедополнительные компоненты с Р-амилааной активностью,в треке с трипсиномвыбракованной семьи В 8 такие элементы отсутствуют,1Отобранные семьи при пересеве увеличили массу,1000 зерен и выполнен- ность эндосперма либо сохранили указанные показатели, остальные (выбракованные) снизили как выполненность эщосперма, так и массу 1000 зерен даже при отсутствии провокационных усЛовий в сухой год. Учет общей гетерогенности амилазного спектра и ши рина компонента ПП 20 не дал четких различий по этим показателям.Формула изобретенияСпособ отбора форм тритикале на выполненность зерна, включающий получение из з,ерна анализируемых форм белковых вытяжек, диск-электрофорез белков в гелевом носителе, анализ полученных электрофореграмм и выделение зон амилаз, по которым судят овыполненности зерна анализируемых форм, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с.целью повышения эффективности отбора за счет возможности целенаправленного выделения форм тритикале с генетически обусловленной выполненностью зерна, перед дискэлектрофореэом к части вытяжки каждой формы добавляют трипсин, анализируют электрофореграмиа двух частей вытяжки, а в качестве форм с выполненным зерном отбирают те, в электрофореграммах которых имеются зоны с меньшей активностью амилаз алейронового слоя и появляются дополнительно фракции с /-амилазной активностью при добавлении трипсииа.1454324 Баэовый сдособ соб 85 198 5 О 1 6+ 48 6 не. "+"-об яме 59 + 38 44 8 - аз 4 О 5 О 11 18 зуальнан евка ка иолкевко арка, балл рин кен 20 тобраны з качестве форм с аодолненностъв нерв