Способ определения физиологического состояния животного при моделировании процесса перегревания у лабораторных животных

Изобретение относится к медицине,а именно к исследованию биологических объектов, и может быть использовано для оценки различных стадий пе 5регревания у лабораторных животных,Целью изобретения является повышение точности способа за счет дополни,тельного пропускания эритроцитарнойвзвеси через фильтр с диаметром пор5-7 мкм и определения процента задержанных на фильтре эритроцитов,.Способ осуществляют следующим образомеКровь, полученную из хвоста контрольной крысы, центрифугируют в тече-ние 10 мин при 3000 об/мин для отде,ления эритроцитов от плазмы. Полученные эритроциты, разводят Физиологическим раствором до экстинкции 0,400,так как это значение дает возможность,хорошо наблюдать как приращение, таки уменьшение полученных вновь экстинк ций, для чего используют Фотоэлектро колориметр красный светофильтр, кюветы 0,3 см. Полученную эритроцитарную взвесь пропускают через стекляндный фильтр ПСс диаметром пор 5 "7 мкм, что соизмеримо со средним диаметром эритроцитов, и замеряют экстинкцию Фильтрата, на основании чегорассчитывают процент задержанных эрит, роцитов. После перегревания животныхдо одной иэ стадий возбуждение, теп-.ловой удар, постгипертермическое предагональное состояние) проделываютту же операцию. Приняв процент задержанных эритроцитов в контроле за 100%,для различных стадий перегревания получают соответственно средние величины (93%, 82 , 77 ), на основании чего40делают вывод о той или иной стадииперегревания организма. Полученныеданные имеют высокую степень достоверности (Р0,001).45П р и м е р 1, Белую крысу массой165 г перегревали в течение 20 мин,Ректальная температура составила39,4 С, При визуальном наблюдении от-мечено беспокойство животного, гиперемия кожи и слизистых, учащение дыхания. Измеряют процент задержанныхна фильтре эритроцитов, который оказался равным 92 по отношению к аналогичному показателю у контрольных55животных. Данные гистологическогоисследования подтверждают развитиеу животного стадии двигательноге воз,буждения. П р и м е р 2. Белую крысу массой180 г перегревали в течение 20 мин.Ректальная температура составила39,1 С. Визуальная картина аналогична описанной в примере 1. Измеряютпроцент задержанных на фильтре эритроцитов, который составил 94 по отношению к контролю, Развитие состояниятеплового возбуждения подтверждаетсяданными гистологического исследования.П р и м е р 3, Белую крысу массой175 г перегревали в течение 20 мин,Ректальная температура составила39,3 С. Визуальная картина аналогична описанной в примере 1, Измеряютпроцент задержанных на фильтре эритроцитов, который составил 93 по отношению к контролю. Данные гистологического исследования подтверждаютразвитие у животного стадии двигательного возбуждения.П р и м е р 4, Белую крысу массой170 г перегревали до достижения рекотальной температуры 42,5 С. Визуально: у животного развилось коматозноесостояние, дыхание ритмичное, но по"верхностное, роговичный и болевойрефлексы сохранены. Измеряют процентзадержанных на фильтре эритроцитов,который составил 81% по отношению каналогичному показателю у контрольнойгруппы крыс. Развитие теплового удараподтверждается данными гистологического исследования.П р и м е р 5. Белую крысу массой185 г перегревали до достижения рекотальной температуры 43 С. Визуальнаякартина аналогична описанной в примере 4, Измеряют процент задержанныхна Фильтре эритроцитов, который со- .ставил 83% по отношению к контролю,Данные гистологического исследованияподтверждают развитие теплового удара.П р и м е р 6. Белую крысу массой175 г перегревали до достижения рекотальной температуры 42,5 С, Визуальная картина аналогична описанной впримере 4. Измеряют процент задержанных на фильтре эритроцитов, которыйсоставил 82 по отношению к контролю.Развитие теплового удара подтверждается данными гистологического исследования.П р и м е р 7, Белую крысу массой180 г перегревали до достижения рекатальной температуры 43 С. Визуально:Составитель Л. АртюшинаТехред А.Кравчук Корректор М. Шароши Редактор М. Бандура Заказ 2662/46 Тираж 847 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д, 4/5Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 3 13 животное находится в коматозном состоянии, роговичный и болевой рефлексы значительно ослаблены, дыхание аритмичное, акроцианоз. Измеряют процент задержанных на фильтре эритроцитов, который оказался равным 75 . по отношению к такому же показателю у контрольной группы крыс, Данные гистологического исследования подтвердили развитие у животного постгипертермического предагонального состояния.П р и м е р 8, Белую крысу массой 165 г перегревали до достижения реко тальной температуры 42,5 С. Визуальная картина аналогична описанной в примере 7. Измеряют процент задержанных на фильтре эритроцитов, который оказался равным 78 по отношению к контролю. Развитие у животного постгипертермического предагонального состояния подтверждается данными гистологического исследования.П р и м е р 9. Белую крысу массой 175 г перегревали до достижения рекотальной температуры 43 С, Визуальная картина аналогична описанной в примере 7. Измеряют процент задержанных на фильтре эритроцитов, составивший 76 . по отношению к контролю, Данные гистологического исследования подтверждают развитие у животного преда 99687гонального постгипертермического состояния.Таким образом, точность способа 5визуального наблюдения за поведениемживотного и измерения ректальной температуры составляет 67% при сравнениис данными гистологического исследования. При использовании предлагаемогоспособа точность метода возрастала до100(при сопоставлении с данными гыстологического исследования).1Формула изобретения 15Способ определения физиологического состояния животного при моделировании процесса перегревания у лабораторных животных путем наблюдения 20 за животным, о т л и ч а ю щ и й с ятем, что, с целью повышения точностиспособа, у животного берут кровь, получают эритроциты, пропускают полученную эритроцитарную взвесь через 2 Б фильтр с диаметром пор 5-7 мкм, опре"деляют процент задержанных на фильтреэритроцитов и при значении этого по"казателя 92-94% определяют состояниедвигательного возбуждения, при значе"нии 81-83% - состояние теплового удара и при значении 75-78% - состояниепостгипертермического предагоналъногосостояния,