Способ выявления бактерионосительства брюшно-тифозной инфекции

Е ИЗОБРЕТЕНИЯ СВ ЕЛЬСТ Н АВТОРСН 922/282.865 88 Бю тельства пр инсти-й щинв 1ева в Г.П. Гиги биология и фци ионяльерюшОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ ССО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫ(54) СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ БАКТЕРИОНО ТЕЛЬСТВА БРЮШНО-ТИФОЗНОЙ ИНФЕКЦИ (57) Изобретение относится к мед не, а именно к диагностике инфек ных заболеваний, предназначено дл выявления скрытого бактерионосит ства. Цель изобретения - повышен точности выявления скрытых форм но-тифозного носи и массовых обследованиях населения атравматическим способом. Для этого на обработанные 0,17-ным р-ром бычьего сывороточного альбумина, высушенные и фиксированные метанолом покровные стекла (10 шт,) наносят исследуемую мочу. Капли высушивают в токе теплого воздуха и фиксируют 1 О мин метанолом. На вымытые от солей мазки наносят кроличью сыворотку, специфическую к 1,-формам брюшно-тифозных бактерий (в разведении 1:1280). Стекла помещают во влажную камеру, инкубируют 30 мин при 37 О С, промывают и высушивают. Затем на мазки наносят антикроличьи антитела с введенным в их состав радиоактивным изотопом1 (в разведении 1:100). Подсчитывают радиоактивность каждого образца.в С: у-спектрометре. Аналогично и одновре менно производят анаЛиз контрольных образцов мочи заведомо здоровых людей. Результаты статистически обрабатывают.Изобретение относится к медицине,именно к диагностике инфекционныхаболеваний, и может быть использовао для выявления скрытого бактерио 5йосительства.Целью изобретения является повышение точности выявления скрытых формбрюшко-тифозного носительства примассовых обследованиях определенных 10,групп населения атравматическим способом,Способ осуществляется следующимобразом.Для исследования у больных иливозможных бактерионосителей берут наанализ мочу, На предварительно обработанные О, 1 -ным раствором бычьегосывороточного альбумина (БСА) высушенные и Фиксированные метанолом покровные стекла (10 шт,) наносят по0,03 мл исследуемой мочи. капли высушивают в токе теплого воздуха и фик сируют 10 мин метанолом. Зафиксиро"ванные мазки отмывают от солей в течение 5 мин проточной водопроводнойводой, После этого мазки высушиваюти наносят на них по 0,015 мл кроличьей сыворотки, специфической к ЬФормам брюшно-тифозных бактерий (в 30разведении 1:1280), Стекла помещаютво влажную камеру, инкубируют 30 минпри 37 С, промывают 20 мин проточнойводой и высушивают. Затем на мазкинаносят антикроличьи антитела с вве"денным в их состав радиоактивным изотопом 1 1 (й разведении 1:100). Обрабоганные стекла также инкубируютво влажной камере при 37 С в течение30 мин, промывают 20 мин проточнойводой и высушивают. Каждое покровноестекло опускают в специальные пробирки и подсчитывают радиоактивностькаждого образца в у-спектрометре. Одновременно с определяемыми образцамианалогичным образом. производят анализконтрольных образцов мочи заведомоздоровых людей. Результаты подсчетарадиоактивности контрольных и опытных образцов обрабатывают статистически по методу Стьюдента, используякритерий достоверности С, для оценкирезультата.П р и м е р 1. Ч.В.Т,; 75 лет. История болезни У 48749. В 19 б 7 г. приобследовании по контакту у нее былавыделена из кала культура Б.1 урЫ.Повторные исследования дали также положительные результаты, что было расценено как хроническое бактерионосительство. С этого времени и по 198 1 г. постоянно выделяла возбудитель. После проведенного в 1981 г. лечения антибактериапьными средствами обнаружить Б.урЫ в посевах крови, кала и мочи не удалось. Результаты серологического обследования (РПГА, иммуноферментный метод, реакция коагглютинации) были также отрицательными.Только предложенным способом с использованием иммунной сыворотки к Ь-формам Б. ТурЫ в пробах мочи удалось выявить специфический антиген.П р и м е р 2. Б,Т.П., 32 лет. История болезни У 32546. В 1974 г. перенес брюшной тиф в стертой форме, подтвержденный выделением копрокультуры. Через 2 недели после выздоровления вновь начап выделять Б.ТурЫ. С этого времени сформировалось хроническое бактерионосительство с периодическим выделением возбудителя. В момент обследования находился в фазе латенции: все бактериологические (посев крови, костного мозга, кала, мочи) и серологические (РПГА, с О- и ВИ-антигенами; реакция Видаля, реакция коагглютинации) исследования дали отрицательный результат. Только при исследовании образцов мочи предложенным способом с иммунной сывороткой против Ь-Форм Б.урЫ был выявлен антиген Ь-форм Б.ТурЫ и установлен факт хронического бактерио" носительства.Указанным способом параллельно было проведено исследование 11 образцов мочи от хронических бактерионосите" лей в Фазе латенции с другими методами диагностики бактерионосительства. Показано, что посев мочи на среды для бактериальных форм сальяонелл ни в одном случае не дал положительного результата, при посеве на специальные среды для выделения Ь-форм в одном случае выделена культура сальмонелл. С помощью РНГА сальмонеллезный антиген определен в тех же объектах в трех случаях. Применение радио- изотопного метода с сывороткой к бактериальной форме сальмонелл дало два положительных и четыре сомнительных результата, а с сывороткой к Ь-форме - положительные результаты во всех 11 случаях.13941 Формула изобретения Составитель Г.КрюковаТехред М.Моргентал Корректор А.Зимокосов Редактор Г. Волкова Заказ 2215/41 Тираж 847 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 Таким образом, предложенный способ позволяет быстро и точно в течение 3 ч диагностировать брюшно-тифозное бактерионосительство. Испольэо 5 вание этого способа позволяет диагностировать хроническое бактерионосительство также и в фазе латенции, т.е. в тех случаях, когда все остальные известные способы выявления бактерионосительства дают отрицательный ответПредложенный способ позволяет выявлять бактерионосительство не только измененных форм (1.-форм), но и бактериальных форм возбудителя 15 брюшного тифа.Предложенный способ использует минимальное количество ингредиентов.Кроме того, предложенный способ ,дает возможность экономить питательные среды при плановых массовых обследованиях определенных групп населения, подлежащих регулярной проверке на бактерионосительство, что чрезвычайно важно для решения вопросов 26 эпидемиологии данной инфекции.Поскольку отбор образцов мочи не связан с травмированием пациентов и не представляет технических трудностей, предложенный способ является удобным для проведения массовых обследований на бактерионосительство.Способ обеспечивает наиболее полное выявление брюшно-тифозного бакте 43 4рионосительства благодаря высокой точности эа счет выявления в латентный период болезни объективности оценки результатов, причем достоверность полученных результатов подтверждается статистической обработкой данных.Предложенный способ может быть автоматизирован, что позволит снизить затраты труда при проведении массовых обследований, причем при необходимости обработка полученных результатов может производиться с помощью ЗВМ,Способ выявления бактерионосительства брюшно-тифозной инфекции путем проведения иммунной реакции между исследуемым материалом и брюшно-тифозной антисывороткой с последующим определением наличия брюшно-тифозного антигена с помощью метки, о т л ич а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения точности за счет выявления антигенов возбудителя в латентный период носительства, в качестве исследуемого образца используют мочу и проводят иммунную реакцию с антисывороткой к Ь-формам Б.урЬ 1, а выявление брюшно-тифозного антигена осуществляют иммунорадиометрическим методом.