Способ получения препарата крови

Изобретение относится к медицинеконкретно к производству препаратовиз крови человека, содержащих альбумин,- и,д-глобулины,Целью изобретения является сакра"щение времени проведения процесса засчет сокращения количества технологических операций,Цель осуществляется за счет использования в качестве исходногосырья балластного осадка, образующегося при получении альбумина из гемолизированной плазмы или сывороткикрови, обработки 15-25%-ным этаноломпри рН 4,5-5,5 суспендированногоосадка после разрушения гемпигментовперекисью водорода, удаления осадкацентрифугированием и осаждением целевого продукта этанолом в концентрации 30-40 и рН 3,8-4,5.На чертеже представлена схема про-цесса получения протеина и препаратакрови.П р и м е р 1. Балластный осадок белков, образующихся в процессе гроизводства альбумина спиртово-каприлатным методом, в количестве 1 кг заливают 6 л дистиллированной воды, гомогенизируют. К полученной суспензии добавляют 2 н, раствор ИаОН до рН 7,2 + 0,1, при этом раствор приобретает темно-красный цвет. Его равномерно нагревают до 60 С и небольшими порциями вносят 10%-ную перекись водорода до янтарного цвета раствора, аналогично стадии 3 известного устройства, Раствор выдерживают при 60 С в течение 2 ч, охлаждают до 1 Со о и снижают рН до 5,5 1 н. растворам НС 1. При непрерывном перемешивании вводят 2,5 л 96%-ного этанола (до концентрации 25 ). Температуру смесиоснижают до -3 С и выстаивают в этих условиях 3-4 ч. Смесь центрифугируют, осадок удаляют. Супернатант в количестве 9,5 л помещают в реактор, охлажедают до -2 С и при перемешивании вводят охлажценный этиловый спирт в количестве 2,4 л до концентрации 40%, а рН раствора снижают до 4,5. Через 3-4 ч выстаивания раствор центрифу" гвруют при температуре не вьппе -4 С.Осадок в количестве 0,21 кг (целевой продукт) собирают, подвергают сублимации для удаления остаточного спирта, растворяют в дистиллированной воде до концентрации белка 4,3-4,8%, устанавливают рН 7,0 ф 0,5, инактивируют вирус гепатита, подвергают осветляющей, стерилизирующей фильтрации и разливают по флаконам.П р и м е р 2. Балластный осадокбелков в количестве 1 кг заливают5 л дистиллированной воды, гомогенизируют и устанавливают рН 7,2 + 0,1.Суспенэию равномерно нагревают до60 С, путем добавления перекиси водорода осветляют раствор и через 2 чопонижают температуру до 1 С. Устанавливают рН 4,5 1 н, раствором НС 1 имедленно вводят этанол до концентра ции 15(всего 1,15 л). Температурасмеси к концу осаждения достигает-3 С. Коррегируют рН до 4,5 и выстаивают смесь 3-4 ч. Образующийся осадокудаляют центрифугированием. Супернатант 7,2 л переносят в реактор, охлаждают до -2 С и при перемешиваниидоводят концентрацию этанола до 30(1,3 л), рН раствора должен быть 3,8.ФПосле выстаивания целевой продукт 25 (0,16 кг) получают центрифугирова-.нием.П р и м е р 3. 5 кг осадка заливают 30 л дистиллированной воды игамогенизируют 30 мин, Не прекращаяперемешивания, повьппают рН до 7,20,1 введением 2 н. МаОН. Суспензияприобретает вид темно-красного опалесцирующего раствора. Его равномерно нагревают до 60 С и после достио35 жения заданной температуры порциямидобавляют 10 -ную перекись водородадо достижения янтарного цвета. После2 ч прогрева раствор охлаждают до1 С, снижают рН до 4,7 ф О, 1 добавле нием 1 н. НС 1. Медленно при перемеши"вании вводят 9,5 л охлажденного этанола до конечной концентрации 20 ,температуру к концу осаждения снижаютдо -3 С; рН поддерживают 4,7. Раствор 45 перемешивают 1 ч и после 2-3 ч, выстаивания удаляют осадок центрифугированием. Далее супернатант (42 л)охлаждают до -3 С, снижают рН доо4,1 й 0,1 и медленно вводят 7,4 л ох- БО лажденного этанола до концентрации35. К концу осаждения температуруоснижают до -5 С, Проверяют и при необходимости коррегируют рН. Растворперемешивают 2-3 ч. Возможно отстаи вание смеси 10-12 ч при температуре-3 С. Выпавшмй осадок собирают центрифугированием. Остаточный спирт удаляют сублимацией, сухую массу растворяют в воде до содержания белкаЬпод Стадие тодию гйаЭк иеисл. МеняйЯОЙм дондо Оподир ноев,Ю. РОФАтцоледой проди Руле 4,3"4,8 Х, инактивируют вирус гепатита прогреванием, раствор подвергаютосветлякщей и стерилизирующей фильтрации, разливают по флаконам и исполь зуют.Согласно предлагаемому способу получают препарат крови, близкий по своим свойствам к протеину, при электрофорезе и иммунофорезе распределение белковых эон и линий преципитаций 10 аналогично, как у протеина. Препарат крови не содержит НВу-антигена, бактериальной примеси и пирогенных веществ, конечный продукт содержит не. менее 753 альбумина. При использова Б нии запредельных концентраций спирта показателей рН конечный продукт содержит альбумина менее 757В результате предлагаемой технологической схемы процесс сокращен на 20 три стадии, вместо шести центрифугирований по известному способу необходимо проводить только два центрифугирования, общие затраты времени на технологический процесс по известно-. 25 му способу составляют 5-7 дней, а по предлагаемому - 1,5-2 дня. Про тотилигеЧвижуютгрфау дазЬя7 Формула изобретения Способ получения препарата крови путем обработки этанолом при низких температурах разрушения гемпигментов перекисью водорода в присутствии каприлата натрия, осаждением целевого продукта этанолом при низких температурах в кислых условиях, о т л и - ч а ю щ и й с я тем, что, с целью сокращения времени проведения процесса за счет сокращения количества технологических операций, в качестве источника сырья используют отходы производства - балластный осадок белков, образующийся в процессе получения альбумина из гемолизированной плазмы или сыворотки крови, при этом обработку этанолом проводят в концентрации этанола 15-25 Х при рН 4,5-5,5 после суспендирования осадка в дис" тиллированной воде и разрушения пигментов перекисью водорода, осадок удаляют центрифугированием, а целевойапродукт осаждают этанолом в концентрации 30-403 и рН 3,8-4,5.