Способ концентрирования бактериальных суспензий

СОЮЗ СОВЕТСНИСОЦИАЛИСТИЧЕСКРЕСПУБЛИН 370 9 0 4 С 12 й 1/02 ОПИСАНИЕ ИЭОБРЕТ ене онв ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИИ К А ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(71) Всесоюзный научно-исследовательский институт особо чистыхбиопрепаратов(54) СПОСОБ КОНЦЕНТРИРОВАНИЯ БАКТЕ РИАЛЬНЫХ СУСПЕНЗИЙ(57) Изобретение относится к микро биологической промышленности, а им но к способу концентрирования бакт риальных суспензий, Цель изобретения - повьппение степени концентрир вания, В культуральную жидкость, п лученную после культивирования бак терий, добавляют поликатионит до к центрации 0,01-0,05%, перемешивают течение 1-3 мин и вводят коллоидн раствор магнетита до концентрации 0,1-0,5%. Суспензию помещают в неоднородное поле с напряженностью 0,5-1,0 Т/м и отделяют сгущенную суспензию декантацией. В качестве поликатионита используют хитозан,споли-и-винилбензилтриметиламмоний хлорид) или полиэтиленимин. По сра нению с известным способом ппзво ляет вдвое увеличить степень концентрирования. 1 з,п. ф-лы.2 табл.Концентрация реагентов,Эффективность концентрирования мас,7 от последовательности введения компонент,% тМагнетит Хитозан-маг- Магнетит-хитозан Хитозан нетит 0,01 0,10 18 0,06 0,01 83 78 0,025 0,01 Изобретение относится к микробио Логической промышленности, а именно к способу концентрирования бактериальных суспензий.5Цель изобретения - повышение степени концентрирования,Способ осуществляют следующим образом.В культуральную жидкость, полу ченную в результате культивирования бактерий на питательной среде, добавляют флакулянт до его концентрации в культуральной жидкости от 0,01 до 0,057 В качестве флокулянта 15 используют водорастворимые поликатиониты: хитозан полиэтиленимин, поли(п-винилбенэилтриметиламмоний хлоРид), Через 1-3 мин после добавления поликатионита на стадии флокулообра зования вводят коллоидный раствор магнетита до его концентрации в культуральной жидкости от 0,1 до 0,5%, Указанные концентрации реагентов являются оптимальными, так как при25 П р и м е р 1. К культуральной жидкости бактерий Езс)1 ег 1 сз 1 а со 11 Мс концентрацией клеток 40 х к 10кл/мл при интенсивном перемешивании добавляют 0,2%-ный раствор хитозана до его концентрации в культуральной жидкости 0,01%.Через 3 мин в смесь добавляют 27-ный раствор магнетита до его концентрации 0,1%. Суспензию помещают в неоднородное магнитное поле с напряженностью 0,5-Т/м и через 15 мин сконцентрированную клеточную суспенэию отделяют декантацией. Выход меньших концентрациях не наблюдаетсядостаточный эффект концентрирования,а большие концентрации не приводят кего дальнейшему увеличению,Последовательность введения реагентов является существенным признаком способа, так как при введении вкультуральную жидкость с.начала магнетита, затем поликатионита степеньконцентрирования резко снижается Сгущенную суспензию отцеляют сепарированием в неоднородном магнитномполе с напряженностью 0,5-1,0 Т/м,Изобретение поясняется следующимипримерами.Влияние последовательности введения хитозана и магнетита на эффектиВность концентрирования бактериальныхклеток Е.со 11 штамм Мво внешнеммагнитном поле напряженностью 0,51,0 Т/м (время концентрирования15 мин) показано в табл,1,клеток 90%, концентрация суспензии 36.10" кл/мл. При концентрированиифбактерий с использованием только хитозана выход клеток 857 при концентрации суспензии 15.10кл/мл. П р и м е р 2. Способ осуществляют согласно примеру 1, но в качестве поликатионита используют полиэтиленимин. Выходы клеток 907, при концентрации суспензии 30.10 о кл/мл. Без добавление магнетита выхсд клеток 857 при концентрации суспензии 12,10" кл/мл.1 ЗЗ 3707 П р и м е р 3. Способ осуществляют согласно примеру 1, но концентрация хитозана в культуральной жидкости составляет 0,057., а магнетита 0,57., Выход клеток 987 при концентрации суспензии 35.10 о кл/мл, Без добавления магнетитавыход клеток 807. при концентрации суспензии 201 О" кл/мл, 10П р и м е р 4. К 1000 мл культуральной жидкости Вас 111 цз Ю 1 Ог 1 пп 1 епз 1 з уаг,депдгопаз, содержащей свободные бактериальные споры, токсические включения и остатки питатель ной среды, при перемешивании приливают 50 мл 17-ного раствора поли - (и-винилбензилтриметиламмоний хлорида) до концентрации его в культуТаблица 2 Способ концентрирования Титр спор Концентрация,мас.7. Степень Потерижизнеспособконцентрировафлокулянта магнети в надосадочно" ния ностиспор,7. та,жидкости,млрд/мл Сепарирование 2,86 0,21 3,9 0,08 5,3 флокуляция 0,1 2,86 5,4 Магнитное сепарирование 0,05 0,2 2,86 0,003 3,7 0,06 50 2. Способ по п.1, о т л и ч а ющ и й с я тем, что, в качестве поликатионита используют хитозан или полиэтиленимин, или поли(п-винилбензилтриметиламмоний хлорид) в концен трации от 0,01 до 0,0517. ВНИИПИ Заказ 3925/23 Тираж 499 Подписное Произв.-полигр. пр-тне, г, Ужгород, ул. Проектная, 4 Таким образом, предлагаемый способ по сравнению с известным позволяет вдвое увеличить степень концентрирования бактериальных суспензий, сократив при этом расход полимеров.,Формула изобретения 1.Способ концентрирования бактериальных суспензий, предусматривающий введение в культуральную жидкость поликатионитов с последующим отделением концентрированной суспензии, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения степени конральной жидкости, равной 0,057. Через 1 мин при помеиивании вносят 200 мл коллоидного раствора магнетита, содержащего 17 магнетита до конечной концентрации магнетита в культуральной жидкости 0,27 Полученную суспензию помещают в неоднородное магнитное поле и через 15 мин отделяют сконцентрированную пасту от надосадочной жидкости методом декантации.В табл.2 представлены результаты использования предлагаемого метода для концентрирования КЖ В,СЬцг 1 п 91 епз 1 з айаг. депдго 11 вцз в сравнении с методом флокуляции и сепарирования, являющегося регламентным методом получения биоинсектицидов,центрирования, через 1-3 мин послевведения поликатионита вводят коллоидный раствор магнетита до концентрации магнетита в культуральной жидкости от О,1 до 0,57, при этом отделение концентрированной суспензииведут в неоднородном магнитном полес напряженностью 0,5-1,0 Т/м.