Способ прогнозирования возникновения гастроэнтерологического заболевания у детей

(19) (Н) 1 Н 33/50 ГОСУДА ПО ДЕЛ юл. У 39научно-исследоваческий институт а, Л.В.КоркоташвиВ.Г. и др,Дис гастроэнтероло Вопросы детск идемиология.О помощи, Профил ик. - Горький,актери- гичеси гас ганизаактМ 1983,ВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССРИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ Н АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ(54) СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ. ВОЗНИКНОВЕНИЯ ГАСТРОЗНТЕРОЛОГИЧЕСКОГО ЗАБОЛЕВАНИЯ У ПЕТЕЙ(57) Изобретение относится к медицине, а именно к гастроэнтерологин, иможет быть применено для прогнозирования возникновения гастроэнтерологических заболеваний у детей. Цельизобретения - повышение точностиспособа. У ребенка натощак собираютслюну в количестве 3,5 мл. Слюнуцентрифугируют 15 мин при 3000 об//мин. В центрифуге известными методами определяют концентрацию молоч"ной кислоты и гистамина. При значении отношения эти показателей 1,4 иниже прогнозируют возникновение заболевания.Изобретение относится к медицине, а именно к гастроэнтерологии, иможет быть использовано для прогнозирования возникновения гастроэнтерологических заболеваний у детей. 5Цель изобретения - повышение точности способа (на 287) за счет определения в слюне содержания молочной кислоты и гистамина.Способ осуществляют следующим об- Оразом,У ребенка утром натощак собираютслюну в количестве 3,5 мл. Слюну центрифугируют в течение 15 мин при300 об/мин. В центрифугате определяют концентрацию молочной кислоты иконцентрацию гистамина известнымиметодами.Ход определения. В центрифужныепробирки наливают 2 мл 27-ной трихлоруксусной кислоты и 0,4 мл слюны, перемешивают и центрифугируют10 мин. Берут 1 мл центрифугата, прибавляют 0,5 мл 207-ного Сп 804,5 мл Н 0 и 0,5 г окиси кальция (прокаленной), тщательно перемешиваютстеклянной палочкой до появления голубого окрашивания, оставляют стоятьв течение 30 мин, центрифугируют. За"тем в охлажденные в ледяной бане пробирки помещают 0,5 мл центрифугата,2 капли 57-ного Сп 804, 3 мл химически чистой концентрированной Н БО(для пробы Соваля), тщательно перемешивают. В контроль берут 1 мл35Н О, 4 капли 5%-ного Сц 804,6 мл Н БО2 4Ставят пробирки на 5 мин в кипящуюбаню, потом в ледяную и добавляютпо 2 капли (в контроль 4 капли) параоксидифенила. Размешивают палочкой, 40начиная с контрольной пробы. Пробирки помещают в баню при 33-36 С на30 мин после чего - в кипящую банюна 90 с (встряхивают в бане) и опятьохлаждают на льду Колориметрируют 45на ФЭ 1-56 в кюветах 5 мм при зеленомфильтре. Содержание молочной кислотынаходят по стандартной кривой в мг .,построенной по растворам молочнойкислотыс известной концентрацией.Для перевода результата в ммоль/лумножают результат на коэффициент0,111.Для определения содержания гистамина проводят предварительную обработку слюны: к 2,5 мл слюны приливают равный объем перегнанного ацетона и энергетичпо встряхивают. Смесь отгоняют до половины объема под вакуумом на водяной бане при температуре 50 С, охлаждают в холодильнике в течение 1 ч и после этого центрифугируют в течение 20 мин при 3000 об/мин,В пробирку со шлифол наливают 1 мл центрифугата, добавляют 1 мл 1 н. НС 10, 0,2 мл 5 н. ЕЕаОЕЕ, 1 г БаС 1 и 4 мл бутанол-хлороформной смеси. Пробы энергетично встряхивают 3 мин, а затем центрифугируют 10 мин при 1500 об/мин. Водную фазу отсасывают пипеткой, к органической фазе приливают 2 мл 0,1 н, МаОН, насыщенного ИаС 1, встряхивают 2 мин и центрифугируют 10 мин,3,5 мл органической фазы переносят в другие пробирки, содержащие 2,5 мл 0,01 н. НС 1, встряхивают 3 мин и центрифугируют 10 мин Кислотную фазу В количестве 1 мл, содержащую гистамин, отсасывают в отдельную пробирку.Затем в эту пробирку приливают 0,2 мл 1 н. ИаОН, перемешивают и добавляют 0,1 мл 0,1 в но раствора ортофталевого альдегида в метаноле, снова перемешивают. Через 4 мип приливают 0,1 мл 1,5 М раствора фосфорной кислоты для стабилизации флюорофора, Объем проб доводят водой до 5 мл и флюориметрируют. Величину флюоресценции измеряют при длине волны испускания 470 нм, используя для возбуждения флюоресценции светофильтр с максимумом пропускания 365 нм.Параллельно с опытом проводят анализ стандартного раствора и контрольной пробы. Стандарт: 0,05 и 0;1 мкг/мл гистамина доводят до 1,5 мл Н О, приливают 0 э мл 1 н.НС 10 и проводят через все этапы опыта. Контроль: 1,5 мл Н О 0,5 мл 1 н. НС 10 и проводят через все пробы, Расчет:А 0,1 мкг6,17(мкмоль/л)где А - интенсивность флюоресценциипробы за вычетом контроля;Б - интенсивность стандартнойпробы за вычетом контроля;6,17 -коэффициент пересчета.В качестве критерия неблагоприятного прогноза берут уровень индекса молочная кислота/гистамин ниже 1,4. Частота встречаемости сниженно1265 Таким образом, индекс МК/Г, равный 0,89, что ниже нормы в 3,6 раза, является объективным доказательством риска гастроэцтерологического заболевания.Иальчик в течение 1 г находился под диспансерным наблюдением, неоднократно осматривался врачом-педиатром. В связи с появлением жалоб на непостоянные боли в животе оц был 25 30 Составитель Л.АртюшинаТехред И. Попович Корректор И,Демчик Редактор Н.Яцола Заказ 5655/39 Тираж 778. Подписное ВНИИПИ Гасударственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская цаб., д. 4/5Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 го индекса молочная кислота/гистамин в группе здоровых детей 337, а у;детей. с гастроэнтерологической патологией 697.,П р и м е р 1. Валера К., 4 года, 5 отнесен к группе часто болеющих детей. В анамнезе у него частые (6- 7 раз в год) острые распираторцые заболевания, грипп, отит, аденоиды 11 степени. Сам факт частой заболеваемости считается риском по гастроэнтерологической патологии (вероятность 40 Ж).Для уточнения степени риска мальчику было дополнительно проведено 15 .исследование слюны по предлагаемому способу. Для этого определены в слюне концентрации молочной кислоты и гистамина и их соотношение, которые соответственно равны 1,11 ммоль/л 20 (норма 1,7 ммоль/л) 1,24 мк-моль/л (норма 0,99 мк-моль/л), 0,89 (норма 3,25). госпитализирован в клинику, где ца основании всестороннего комплексного обследования был поставлен клинический диагноз: хронический гастродуоденит.П р и м е р 2. Марина А., 6 лет, 40 посещает детский комбинат. Девочка отнесена к группе здоровых В ацам 613незе инфекционные заболевания отсутствуют. Распираторные заболевания 12 раза в год. Физическое развитиесоответствует возрасту. С целью прогнозирования возникновения гастроэнтерологического заболевания, у девочки была исследована слюна, определено в цей содержание молочной кислоты и гистамина, которые соответственно равны 1,23 ммоль/л и 0,87. Соотношение МКГ/Г равно 1,23 /0,87 = 1,41. Таким образом, индекс МК/Г, равный1,41 указывает ча отсутствие риска возникновения гастроэнтерслогического заболевания.При катамцестическом наблюдении отмечено, что девочка никаких жалоб це предъявля 6 т, в том числе гастроэнтерологических. Повторное исследование слюны по предлагаемому способу показало, что индекс МК/Г слюны равен 1,56, Заключецие врача-педиатра: здорова.Предлагаемый способ позволяет повысить точность прогнозирования на 283. На осуществление способа це требуется больших затрат времени, оц может быть проведен в течение 4-5 ч(известный способ - несколько дней). Формула из обре те ния Способ прогнозирования возникновения гастроэцтерологического заболевания у детей путем исследования слюны, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения точности способа, в слюне определяют содержание молочной кислоты ц гистамина и при значении отношения этих показателей 1,4 и ниже прогнозируют возникновение заболевания.