Способ массового разведения нематод-мермитид rомаnомеrмis culicivorax rотн and sмiтн

,с , 1 ; ЕТЕ Е.вЯй И(Н" 4 ВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССРИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ ПИСАНИЕ ИЗОБР АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТ(46) 23.11.87. Бюл. Р 43 (71) Институт медицинской паразитологии и тропической медицины им. Е,И. Марциновского(56) Регегвеп 1.Д. ОЬвегчагоп оп гЬе аавв ргос 1 цсгоп оГ Ношапошегпц. Сц 1 счогах, а пешагойе рагавСе о шов(1 цгоев. - Мовццго Нечв, 1978, ч. 38, 1( 1, р, 83-86.(54) (57) СПОСОБ МАССОВОГО РАЗВЕДЕНИЯНЕМАТОД-МЕРМИТИД КО 1 фАИОМЕКМ 18 СШ 1 С 170 ВАХ ЮТН. АНП БМ 1 ТН, включающийзаражение личинок комаров предпаразитическими личинками нематод, о т -л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения выхода нематод и сокращения трудозатрат при разведении личинок комаров, в качестве личинокиспользуют личинки комаров Сц 1 ех ррепв шо 1 ев 1 цв, полученный из автогенных кладок, а заражение личиноккомаров предпаразитическими личинками нематод осуществляют в соотношении (1:4)-(1:6).1225064 Изобретение относится к областимедицинской паразитологии, а именно,к биологическому методу борьбы с паразитическими насекомыми.Целью изобретения является повышение выхода нематод и сокращение трудозатрат при разведении личинок"комаров,П р и м е р 1, Для культивирования мермитид используют личинки комаров лабораторной культуры Сц 1 ех рр 1.епз шо 1 ез 1;из (штамм Московского государственного университета). Кладкикоыаров собирают, подсчитывают количество яиц в них и помещают в эмалированные кюветы (33 х 26 х 4 см) с дехло-.рированной водопроводной водой.В каждой кювете заражают от 1 до 5 тыс.личинок комаров 1-2-го возраста.Для этого заливают препарат мермитид водой определенного объема (обычно 50-200) мл для получения предпаразитических личинок. Препарат представляет собой песок с содержащимися в нем самцами, самками и яйцамимермитид. Через 2-3 ч эту воду сливают, тщательно перемешивают, берут10 капель по 0,1 или по 0,05 мл надно чашки Петри и определяют числопредпаразитических личинок в однойпробе под бинокуляром. Например, водной пробе содержится: 7, 16, 11,9, 12., 20, 11, 6, 8, т.е. всего 113личинок следовательно, в среднем 3Ь11,3 экз,в 0,05 мл, тогда в 100 млводы их содержится 22,600. Если вкаждой пробе (0,1 или 0,05 мл) содержится больше 20 предпаразитическихличинок, то объем воды, налитой впрепарат, следует увеличить в 2-3раза,Для заражения личинок комаров всоотношении 1:4 (хозяин:паразит) берут приблизительно 5500 личинок 2 го .возраста (5400 ф 100) в кювете идобавляют к ним воду с предпаразитическими личинками. Сравнение продукции Кошапошепп 1.з си 11.с 3 чогах приразличных соотношениях зараженияхозяин:паразит приведено в табл. 5 1 О 15 20 30 40 личинок комаров в соотношении 1:6 4550 На следующий день зараженных личинок комаров рассаживают по 1500- 2000 экзецпляров в кюветы размером 44 х 33 х 4 см. Кормят личинок пив-. ными или гидролиэными дрожжами, воду в кюветах периодически аэрируют с помощью микрокомпрессоров ИК-Л 12.На седьмые-восьмые сут. зараженныхличинок комаров сливают на сито,промывают и оставляют сито с личинками всосуде с водой, закрепив егона расстоянии 3-5 см от дна сосуда.По мере выхода из личинок комаровпостпаразитические личинки мермитидпроходят через сито и опускаются надно сосуда. Их затем сливают в меньшие сосуды, повторно промывают водойнесколько раз, осушают фильтровальной бумагой, взвешивают и помещаютв стеклянные чайки или кристаллизаторы (диаметром 60-100 мм), На днечашек находится промытый и прокипяченный речной песок (размер частиц0,4-1,6 мм). Слой песка в 1,5-2 см,покрытый водой, толщина водного слоя 0,1-0,2 см. Через 2-3 дня излишки воды оттягивают из песка пипеткой и ставят чашки с мермитидами на храонение в термостат при 26 С. Через 4-5 недель препарат.мермитид можно залить водок для получения предпаразитических личинок. После первогозалива препарата и выплода из неголичинок производят повторные заливы с интервалами 3-5 дней. Можно эа" ливать препарат в любое времяпосле истечения 4-5 недель храненияего в термостате (см. табл.).П р и м е р 2. Заражение личинокв соотношении хозяин-паразит как 1:5 проводят так же, как описано в примере 1. Для заражения, например, 2000 личинок берут 10000 предпаразитических личинок мермитид (см.табл.).П р и м е р 3, Для заражения берут соответствующее число предпаразитических личинок и проводят всеоцерации," как описано в примере 1(см. табл.). П р и м е р 4. Заражение личинок комаров в соотношении 1;10 проводят аналогично, масса продукции, получаемая в результате опыта, оказывается меньше, чем масса продукции при меньших величинах соотношений хозяин:паразит (см. табл.).П р и м е р 5. Заражение личинок комаров в соотношении 1:3 проводят, как в предыдущих случаях, масса продукции постпаразитических личинок оказывается меньше (см. табл,).П р и м е р 6 и 7. Заражение 1;7 и 1:1 О проводят так же, масса продукции постпараэитов тоже меньше, чемжмемааеееавеаеыевВ 4 Прототип Новый способ Параметры Вид комара Си 1 ех р 1 р 1 епв шо 1 евсцв Сц 1 ех р 1 р 1 епвоцп 1 поцеГавс 1 вйцв Соотношениехозяин/паразит 1:3 1:7 т 0 1:12 1:13 1;14 13155 11 29 28 40 3ф 4 151 ф 6 Число опытов8 13 11 Экстенсивностьзаражения 7паразитизма) 75 79 . 73 75 ВО 85 88 фПродукция мермитид из, тыс,личин"к Ьг) 470+52 620 т 60 590+65 613+68 506+58 512+53 440 495 480 535 Соотношение полов в потомст 1/2-/3 1/2-1/5 1/1-1/5 1/2-/4 1/3-1/15 / 10-1/30 ве Абсолютныйвыход самок(мг) 157- 117,5 207-103 290"98 204-122,5 26,5-31,6 4 Ь,5-16,5 Составитель В. ГорбатовскийРедактор С. Рекова Техред А.Кравчук Корректор О. Кравцова Заказ 5910 Тираж 628 Подписное ВИИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москве, И, Раушская наб.; д, 4/5Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 3 1225064масса предлагаемых оптимальных соот- самцы, Этим объясняется повышение ношениях хозяин:паразит (см. табл.), массы продукции мермитид при эаражеВ результате заражения личинок . нии 1:4 - 1:6, При увеличении числа комаров мермитидами пропорция полов самок повышается число отложенных (самки/самцы) при соотношении 1:4 - 5 ими яиц и, следовательно, эффектив;6 составляла 1/1-1/5, а при соот- ность препарата. ношении 1:10 она увеличивалась до В результате опытов из каждой ты/10-1/30,при повышении этого соот- сячи зараженных личинок комаров Соношения она будет еще выше. Самки . 1 ех рр 7.епа шо 1 езйиз получали в средмермитид весят в 2-25 больше, чем 10 нем 607 мг взрослых мермитид.Сравнение массы продукции мермитид Еошапошепп 1 в сц 11 сЫосахпри различных соотношениях заражения хозяин:Паразит