Устройство для исследования физико-химических параметров живых микрообъектов

(56) 1. Камера для тканевых культур. Научно-технический бюллетень фирмы ОПТОН/ФРГ, В 1/75.2. Руководство по изучению биологического окисления полярографическимметодом. М,: Наука, 1973, с. 50-59.(54)(57) УСТРОЙСТВО ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИХ ПАРАМЕТРОВ ЖИВЫХ МИКРООВЬЕКТОВ, содержащее камеру с крьппкой и боковыми отверстиями, в которых размещены датчикиконтроля и изменения параметровсреды в камере, мешалку с крыльчаткой, а также предметное и покровное стекла, расположенные соответственно в дне камеры и в крышке,отличающееся тем, что,с целью обеспечения одновременногонаблюдения за движением живых микрообъектов, заданного изменения пара-гметров среды и их измерения, предметное и покровное стекла установленыс эксцентриситетом относительно осикамеры, а крышка установлена сможностью вращения и на ее внутней поверхности расположена крыльчатка мешалки.1 1191Изобретение относится к лаборторной физико-химической технике, а именно к устройствам для исследования физико"химических параметров живых микрообъектов, и может быть использовано в различных областях биологии и медицины для наблюдения за движением микрообъектов в слоях различных сред фиксированной толщины методами световой микроскопии при 1 О одновременном изменении и регистрации физико-химических параметров среды, связанных с жизнедеятельностью микрообъектов.Известна камера для наблюдения 15 фиксированных живых микрообъектов, состав среды в которой изменяется принудительно при замещении всего объема среды инкубации фиксированных клеток, зазор между предмет"20 ным и покровным стеклами составляет несколько миллиметров 1 .Данная камера непригоцна для на" блюдения за движением живых микро- объектов различными способами свето вой микроскопии в первую очередь методом "темного поля") при одновременном направленном изменении состава среды.Наиболее близким к изобретению по ЗО своей технической сущности является устройство для исследования физико- химических параметров живых микро- объектов, содержащее камеру с крьппкой и боковыми отверстиями, в кото 35 рые вставлены датчики контроля и изменения параметров среды в камере, мешалку с крыльчаткой, а также предметное и покровное стекла, расположенные соответственно в дне камерыи в крышке 2. С помощью такого устройства можно изменять физико-химические параметры среды и контролировать происходящие изменения. Однако посредством этого устройства невозможно наблюдать за движением живых микрообьектов методами световой микроскопии.Целью изобретения является обеспечение одновременного наблюдения за движением живых микрообъектов,заданного изменения параметров среды и их измерения.Укаэанная цель достигается 55 тем, что в устройстве для исследования физико-химических параметров живых микрообъектов предметное 782и покровное стекла установлены с эксцентриситетом относительно оси камеры, а крьппка установлена с возможностью вращения и на ее внутренней поверхности расположена крыльчатка мешалки.На чертеже схематически изображен общий вид устройства.Устройство включает камеру 1, в дно которой вмонтировано с эксцентриситетом предметное стекло 2. На боковой поверхности камеры выполнено отверстие 3. Крышка 4 камеры установлена с возможностью вращения и снабжена покровным стеклом 5, ось которого имеет. эксцентриситет с осью камеры и крыльчаткой б мешалки. Устройство имеет также уплотнительные кольца 7, термостатирующее устройство 8 с входным 9 и выходным 10 патрубками, прижимное неподвижное полукольцо 11, прижимное подвижное полукольцо 12, эксцентриковый прижим 13, опору 14 эксцентрикового прижима, подшипник 15 скольжения эксцентрикового прижима, подшипник .1 б скольжения камеры, шестерню 17 и гильзы 18- 20, в которые вставлены датчики.Устройство работает следующим образом.Рассмотрим случай исследования влияния высоких концентраций ионов натрия на подвижность Е. соГ в анаэробных условиях.Камеру 1 устанавливают на предметном столике микроскопа и фиксируют с помощью двух полуколец 11 и 12. Затем камеру нагревают до 30 С с помощью термостатирующего устройства 8, соединенного через патрубки 9 и 10 с выносным термостатом. В одну из гильз вводят электрод для измерения концентрации кислорода. Свет фокусируют %а предметном стекле 2 камеры. Далее камеру заполняют средой для инкубации бактерий и закрывают крьппкой 4. Избыток жидкости вытекает через отверстие 3, через которое в процессе наблюдения вводят добавки. Крышку 4 фиксируют с помощью эксцентриковых прижимов 13, предотвращающих подъем крышки 4 при вращении. Шестерню 17 крышки 4 присоединяют к валу двигателя. Объектив микроскопа опускают до попадания предметного стекла 2 в фокус, включают двигатель и перемешивают содержимое камеры с помощью крыльчатки3 ,11917 6. После стабилизации показаний кислородного электрода через отверстие 3 вносят суспензию бактерий. После равномерного распределения бактерий по камере двигатель выключают и опре-деляют скорость движения бактерий в течение 20-30 с, Затем перемешивание продолжают. Остановки крыльчатки мешалки не нарушают линейности показаний кислородного электрода.После исчерпания в среде инкубации кислорода скорость движения бактерий подает. Когда скорость движения бактерии достигает нуля, через отверстие 3 в камеру вносят необходимое 82 4количество концентрированного раствора хлористого натрия,перемешивают 30-40 с и производят наблюдение за бактериями. Наблюдение проводят 20-30 мин при периодическом перемешивании среды.Данное устройство позволяет регистрировать одновременно методом световой микроскопии скорость движения бактерий и концентрацию кислорода в среде инкубации, благодаря чему удается показать, что в анаэробных условиях экэогенные ионы натрия .(150 мкМ ) возобновляют движение бактерий на 2-3 мин. Заказ 7149/39 Тираж 896 Подписн