Способ консервации амниотической оболочки

Изобретение относится к медицине,а именно к хирургии и трансплантологии, и может быть использовано длялечения трофических язв нижних конечностей. 5Целью изобретения является увеличение срока хранения,Способ консервации амниотическойоболочки осуществляют следующим образом. 0Амниотическая оболочка заготавливается в нестерильных условиях в родзале путем отсечения ее от последа.Оболочка тщательно отмывается в проточной воде от крови. Затем материал 15погружается в стерильный сосуд с конверсирующей смесью, состоящей из 3540 процентов димексида и,60-65 процентов спермацета, которая заранее расплавляется до жидкого состояния в во дяной бане при 30-35 С. Затем герметически закрытый сосуд с оболочкойохлаждается и хранится в условияхбытового холодильника при 2-4 С наовесь срок консервации, 25Соединение, полученное из 35-407,димексида и 60-657 спермацета, представляет собой стойкую восковиднуюмассу, легко расплавляющуюся в водяной бане при 30-35 С. Уменьшение спер 30мацета менее 603 ведет к разжижениюсмеси, что не позволяет получить стойкую восковидную массу. Масса становится более текучей, что нарушает условия конвервации. Увеличение сперма цета более 657 не позволяет получитьоднородность массы. Подобная картинанаблюдается при изменении содержаниядимексида: увеличение его свьппе 40 Жприводит к большей текучести смеси;уменьшение его менее 357 не позволяетсоздать однородную смесь, Все эти/состояния нарушают условия созданиястойкой смеси.Применение смеси димексид-спермацет основано на том, что димексидобладает бактериостатическим, бактерицидным, противовоспалительным ианестезирующим свойствами, Кроме того, известна его способность быстро 50проникать через неповрежденную кожу,слизистые, переносить и депонироватьпри этом различные растворенные в немвещества, усиливая их действие.В результате применения димексида 55повьппается обмен белка в коже, чтоявляется одной иэ причин его терапевтического эффекта. Спермацет, представляя собой сложное природно-комплексное соединение, содержащееся в головных мешках кашалота, содержит витамиты А и Е, обладает бактерицидным и бактериостатическим действием, имеет выраженную биологическую активность, повьппая местные защитные реакции, что сказывается на течении раневого процесса, развитии грануляций и эпителизации.При консервации в смеси димексидспермацет стерильность оболочки наступает спустя 1 сут и регистрируется в течение всего срока консервации,Для оценки качества консервации амниотической оболочки произведены гистологические исследования в различные сроки консервации.В течение первой недели консерва - ции нарастают дегенеративные изменения во всех слоях оболочки, проявляющееся в набухании клеток и из вакуолизации. Ядра клеток становятся светлыми, гомогенными, Компактный слой разволокняется. В фибробластах/ нарастают дистрофические изменения, Межуточное вещество становится рыхлым, выглядит разволокненным.Через 12 сут после начала консервации в смеси димексид-спермацет эпителиальный слой представляется вакуолизированным; отечным. Компактный слой представлен участками гомогенного слабо зозинофильного вещества. Слой фибробластов становится широкий,. слабо окрашенным. Спонгиозный слой становится рыхлым, слабо окрашенным.Затем процесс дистрофии клеточных элементов заметно ослабевает и через 30 дней гистологическая картина примерно соответствует изменениям, наступившим за первые две недели. Клеточные элементы сохраняют слабую окрашиваемость. В них выражена белковая дистрофия и тем не менее четко определяются клеточные структуры, фибробласты сохраняют овальную форму. Все клетки имеют выраженные межклеточные границы. Слои становятся широкими, содержат прослойки гомогенной массы. Через 2 мес резкий сдвиг гистологической картины отсутствуе т.Макроскопически по прошествии двух недель после начала консервации в смеси димексид - спермацет амниотическая оболочка выглядит утолщенной, сохраняя свою эластичность и проч1169578 10 Составитель Т, ЖуравкинаРедактор С. Тимохина Техред С.Мигунова Корректор М.Самборская Заказ 4638/2 Тираж 743 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Филиал ППП "Патент", г.Ужгород, ул.Проектная, 4 ность в процессе хранения в течение 1 года.Преимуществом указанной консервации является отсутствие необходимости смены консерванта через промежутки времени,Амниотическая оболочка, консервированная по данному способу, применена в клинике при лечении 20 больных с трофическими язвами нижних конечностей. При этом исходили из того, что эмбриональные клетки амнио - тиче ской оболочки ускоряют развитие грануляций и эпителизацию, являясь биогенным стимулятором. Кроме того 15 оболочка создает условия "влажной камеры" в области язвы, способствуя лучшему заживлению язв. Учитывали также, что вместе с оболочкой, консервированной в смеси димексид-спермацет, в область трофических рас- . стройств вносятся вещества (димексид и спермацет), способствующие сниже". нию ме стно го воспалительного проце сса, улучшению течения метаболических и репаративных процессов, что сказывается на ускорении роста грануляций и эпителизации.Предлагаемый способ консервации амниотической оболочки позволяет увеличить срок хранения оболочки с сохранением ее биологических свойств. Кроме того, применение амниотической оболочки, консервированной по предложенному способу, при лечении трофических язв нижних конечностей позволяет сократить сроки пребывания больных в стационаре.