Способ трипсинизации ткани и устройство для его осуществления

СОЮЗ СОВЯТСНИКСОЦИАЛИСТИЧЕСНИРЕСПУБЛИК. 571 6 46)С 12 ИЗ ГОС РЕТЕН ЕЛЬСТВУ АРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР АМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ ИСАНИЕВТОРСИОМУ СВИД(71) Всесоюзный научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности(56) 1. Авторское свидетельство СССВ 571516, кл. С 12 М 3/00, 1972.2. Авторское свидетельство СССРУ 652217, кл, С 12 М 3/00, 1974.(54) СПОСОБ ТРИПСИНИЗАЦИИ ТКАНЕЙИ УСТРОЙСТВО ДЛЯ ЕГО ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ.(57) 1. Способ трипсинизации ткани,включающий обработку Ферментом с последующим отделением клеточных сус- .пензий, о т л и ч а ю щ и й с ятем, что, с целью увеличения выходаклеток и повыиения чистоты клеточныхсуспензий, обработку проводят 0,080,1 Х-ным раствором трипсина,аотделение ведут при реверсивном вращении .измельчителя с частотой 500-800 об/1165716 2. Устройство для трипсинизации ткани, содержащее герметичный термостатируемый сосуд-трипсинизатор, .сооб щенный трубопроводами с емкостью для раствора трипсина и с холодильной камерой, и измельчитель ткани, вклю, чающий емкость для ткани и привод, отличающееся тем, что, с целью увеличения выхода клеток и повышения чистоты клеточных суспензий, емкость измельчителя установле-,на соосно в сосуде-трипсинизатореи соединена с приводом с возможностькреверсивного вращения для одновременной фильтрации клеточной суспензии, при этом стенки и дно емкости выполнены иэ металлического сетчатого материала квадратного плетения с острыми кромками.О На чертеже представлено устройство для тринсинизации ткани.Устройство для трипсинизации 20 ткани содержит герметичный стеклян-. ный териостатируеиый сосуд-трипсинизатор 1, сообщенный трубопроводами с емкостью 2 для раствора трипсинаи с холодильной камерой 3. На трубо проводе между емкостью 2 и сосудои-трипсинизатором 1 размещен перистальтический насос 4. Устройство содержит иэмельчитель ткани, включающий емкость 5 для ткани и привод 6. 3 О Емкость 5 иэмельчителя установлена соосно в сосуде-трипсинизаторе 1 и соединена с приводом 6 через магнитную муфту 7 с возможностью реверсивного вращения для одновременной фильтрации клеточной суспензии, при этом стенки и дно емкости выполнены из металлического сетчатого материала квадратного плетения с ост рыми кромками. 1Изобретение относится к биологии и может быть использовано для трипсиниэации тканей и органов животных с целью получения суспензии первичных клеток. 5Цель изобретения - увеличение выхода клеток и повышение чистотыклеточных суспензий.Способ осуществляют следующимобразом.Кусочки ткани или органы животных обрабатывают 0,08-0,17-ными растворами трипсина. Затем сосуд с клетками приводится в реверсивное вращение с частотой 500-800 об/мин с ин,тервалом 30 с. П р и м е р 1. Эмбриональная ткань птиц обрабатывается 0,083-ным раствором трипсина, Затем сосуд с тканью приводится в реверсивное вращение с частотой 500 об./мин с интервалом 30 с.П р и м е р 2. Ткань почек телят измельчается до размера 2-3 мм. Далее загружают в измельчитель, в который подают 0,17-ный раствор трипсина. После измельчитель приводится в реверсивное вращение с частотой 800 об./мин с интервалом 30 с.Устройство работает следующим образом.Измельченные кусочки тканей или органов животных асептически загружают в емкость 5, которую помещают в стеклянный сосуд-трипсинизатор 1. Затем в последний с помощью перистальтического насоса 4 подают раствор трипсина из емкости 2. После этого емкость 5 приводится во вращение через магнитную муфту 7 от элект". родвигателя 6 и совершает реверсивное вращение с частотой 500-800 об./ /мин с интервалом 30 с. Дезагрегация тканей и органов животных осуществ" ляется путем механического воздействия в центробежном поле в присутствии фермента трипсина, Под действиеи раствора трипсина ослабляются межклеточные связи в кусочках органов или тканей животных. Под действием центробежного поля диспергированные ку- сочки органов и тканей проталкиваются через сетчатую фильтрующую перегородку. Острые кромки фильтрующей перегородки разрушают кусочки органов и тканей до образования отдельных1165716 Составитель Л.Стебаеваредактор В.данко Техред О Яеце-Корректор С,Шекмар Заказ 4285/24 Тираж 525 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раущская наб., д; 4(5.филиал ППП "Патент", г.ужгород, ул.Проектная, 4 клеток. Таким образом, происходитдезагрегация органов и тканей животных и одновременно центробежноефильтрование клеточной суспензии.После достижения необходимой концентрации отдельных клеток в растворетрипсина в сосуде-трипсинизаторе 1создают избыточное давление, и клеточную суспензию перекачивают в холодильник 34Предлагаемый способ и устройство для трипсиннзации ткани обеспечивают увеличение выхода. клеток и повышение чистоты клеточных суспензий в 1,5- 2 раза больше по сравнению с известным способом,Кроме того,предлагаемое устройство обладает высокой производитель- ностью