Способ обнаружения и подсчета живых микроорганизмов в жидких средах
Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Текст
,д) С, 01 Й 21/84 ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ 1" м свщпвъа А ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРГЮ ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ(56) 1. Авторское свидетельство СССРУ 849858, кл. С 01 й 21/61 1979.2. Я.А.Воппег, Й.К.Нп 11 егг,К.О.Ячеек, Ь,А.НегхепЬегр Р 1 погевсепсе Асг 1 чаг.ей Се 11 Яогг 1 п 8, Кеч. Зс,1 пвйг., 1972,ч. 4 Л, , В 3, р. 404-409(прототип),. (54) (57) СПОСОБ ОБНАРУЖЕНИЯ И ПОДСЧЕ ТА ЖИВЫХ МИКРООРГАНИЗМОВ В ЖИДКИХ СРЕДАХ, включающий витальное окрашивание микроорганизмов красителем, облучение светом потока жидкой среды регистрацию излучения под углом к направлению распространения облучающ го света и обнаружение и подсчет микроорганизмов в жидкой среде по интенсивности регистрируемого излучения, о т л и ч а ю щ и й с я тем, . что, с целью повышения избирательности обнаружения и подсчета живых . микроорганизмов на фоне примесных частиц, в качестве красителя используют соли тетразолиев, а облучение жидкой среды и регистрацию излучения проводят в диапазоне длин волн от680 до 740 нм.11335Изобретение относится к микробиологии и может быть использованодля обнаружения и подсчета живыхмикробных клеток в жидких средах в ускоренном автоматизированном режиме.Известен способ обнаружения живыхмикроорганизмов, включающийокрашивание живых микроорганизмов, облучение светом среды, содержащей микроорганизмы, и определение количества 1 Оживых микроорганизмов по интенсивности флюоресценции красителя надлине волны 580 нм Я .Однако регистрация полезного сигнала флуоресценции может быть резко затруднена эа счет флуоресценции сонутствующих примесей, имеющих флюоресценцию втой же спектральной области. Этоприводит к ошибкам в анализе, в рядеслучаев делает его вообще невозмож Оным.Наиболее близким к изобретению потехнической сущности и достигаемомуэффекту является способ обнаруженияи подсчета живых микроорганизмов в д 5жидких средах, включающий витальноеокрашивание микроорганизмов красителем, облучение светом потока жидкойсреды, регистрацию излучения подуглом к направлению распространенияЭОоблучающего света, обнаружение иподсчет микроорганизмов в жидкойсреде по интенсивности регистрируемого излучения 12,Однако известному способу присущанедостаточно высокая избирательность35обнаружения и подсчета живых микроорганизмов на фоне примесных частиц.Целью изобретения является повышение избирательности обнаружения иподсчета живых микроорганизмов нафоне прнмесных частиц.Поставленная цель достигается тем,что согласно способу обнаружения иподсчета живых микроорганизмов в жидких средах, включающему витальное окрашивание микроорганизмов красителем,облучение светом потока жидкой среды,регистрацию излучения под углом к направлению распространения облучающегосвета и обнаружение и подсчет микроор- Оганиэмов в жидкой среде по интенсивности регистрируемого излучения, в качестве красителя используют соли тетразолиев, а облучение жидкой среды и регистрацию излучения проводят в диапазоне длин волн от 680 до 740 нм.Для осуществления данного способамогут быть использованы различные 18 2устройства для. определения концентрации и дисперсного состава частиц в жидких средах.Способ осуществляют следующим образом.Микроорганизмы исследуемой порции жидкости подвергают непосредственно в пробе витальной окраске солью тетразолия, например МТТ-метилтиазолилтет" разолием бромида С 18 Н Вг И 5Для чего в пробу вносят с помощью доза- тора 0,153-ный раствор соли, который готовят на фосфатном буфере Зеренсенав рН 8,2. Раствор соли вносят в пробу в соотношении 1:4 по объему, что является достаточным для витальной окраски микроорганизмов с исходной концентрацией 10 -10 клеток в 1 мл.со иИзбыток соли тетразолия не влияет на ход реакции витального окрашивания и не требует удаления (отмывки пробы). Смесь перемешивают, прогревают 2-5 мин при 39-42 С и направляютОв проточную кювету устройства для определения дисперсного состава частиц в жидких средах.Облучение жидкой среды и регистрацию издучения под углом к ньлравлению распространения облучающего света проводят в диапазоне длин волн 680- 740 нм. В этих условиях интенсивность излучения от живых микроорганизмов, прошедших витальное окрашивание, значительно превышает интенсивность излучения от примесных частиц неорганической и органической природыЭкспериментальную проверку способа проводили на различных жидких средах (физраствор, дистиллированная вода, водопроводная вода, натурные воды поверхностных водоемов и водо" стоков, сточная жидкость, смывные воды с поверхностей, концентрирующие жидкости импинджеров) с бактериальными нагрузками в диапазоне от единичных клеток вмл до 10 - 1 Окл/мл. Эксперименты проводили с помощью фотоэлектрического анализатора механических примесей ФС.Как показали результаты экспериментов, использование предлагаемого способа позволяет повысить избирательность обнаружения и подсчета живых микроорганизмов в жидких средах.Составитель Г. КоломейцевРедактор А. Шишкина Техред А.Кикемезей Корректор Г. Огар Заказ 9943/36 Подписное Тираш 898 ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Филиал ППП "Патент", г. Ушгород, ул. Проектная, 4 3 1Результаты подсчета микроорганизмов предлагаемым способом совпадали с результатами подсчета независимыми методами - путем подсчета окрашенных микроорганизмов в камере Горяева и методом посевов на твердые питательные среды по Коху, что указывает на 133518 4достоверность измерений данным способом.Таким образом, предложенный способ позволяет увеличить избирательность обнаружения и подсчета хивцхмикроорганизмов.
СмотретьЗаявка
3633951, 12.08.1983
ВСЕСОЮЗНЫЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ БИОЛОГИЧЕСКОГО ПРИБОРОСТРОЕНИЯ
ЯКОВЛЕВ ВАЛЕНТИН КОНСТАНТИНОВИЧ, ЮРЧЕНКО АЛЕКСАНДР СЕРГЕЕВИЧ, ШЕМЯКИН ЛЕВ АЛЕКСЕЕВИЧ, ПЕТРОВ АЛЕКСАНДР ИВАНОВИЧ, ЯКИМОВ ВЛАДИМИР АНТОНОВИЧ
МПК / Метки
МПК: G01N 21/84
Метки: живых, жидких, микроорганизмов, обнаружения, подсчета, средах
Опубликовано: 07.01.1985
Код ссылки
<a href="https://patents.su/3-1133518-sposob-obnaruzheniya-i-podscheta-zhivykh-mikroorganizmov-v-zhidkikh-sredakh.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ обнаружения и подсчета живых микроорганизмов в жидких средах</a>
Предыдущий патент: Способ определения метанола в воздухе
Следующий патент: Способ определения структурных характеристик монокристаллов
Случайный патент: Материал для электродов-инструл1ентов при электроэрозионной обработке