Способ выделения биомассы бактерий

(с( С2 11 1/02 ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕАВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ е щело агревани чений 2- л и ч а лью повы( в соотн обавление рость изме ед/мин. 2 отличто щелочной г тем с ющии ролизат путем на пературе 30-60 ми сы дрожжей получаютия биомассы при тем0С, рН 10-12 в тече биом рев 75 ГОСУДАРСТВЕННЫИ НОМИТЕТ СССПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТ(71). Всесоюзный научно-исследовательский институт биосинтеза белковыхвеществ (СССР) и Институт технической микробиологии, Берлин (ГДР(54)(57)1,СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ БИОМАССЫБАКТЕРИЙ из культуральной жидкости,предусматривающий добавленного гидролизата дрожжей,и доведение рН среды до зн4 добавлением кислоты, ою щ и й с я тем, что, сшения степени выделения бищелочной гидролизат вводятс биомассой дрожжей, взятошенин (6-10):1, при этом дкислоты ведут так, чтобы сконения рН составляла 0,2-1,0Изобретение относится к микробиологической промьпдлеености, а именнок способу выделения биомассы бактерий из культуральной жидкости.Известен способ выделения бактерий, предусматривающий добавлениераствора щелочи при нагревании с последукщим понижением рН до 2-5 с помощью кислоты.Известен также способ выделения ббиомассы бактерий из культуральнойжидкости, предусматривающий добавление щелочного гидролизата дрожжей,нагревание и доведение рН средыдо значений 2-4 добавлением кислоты 52, Степень выделения биомассы составляет 827.,Недостатком известного сгособаявляется недостаточно высокая степень. выделения биомассы, 20Цель изобретения - повышение степени выделения биомас.сы,Указанная цель достигается тем,что в способе выцеления биомяссь бактерий из культуральной жидкости, 25предусматривающем добавление щелочного гидролизата дроеокей, нягреваниеи доведение рН среды до значений 2-4добавлением кислоты предложено щелоч.ной гидролизат вводить в смеси с бисОмассой дрожжей. взятой в соотношении(6-10);1, при этом добавление кислоты нести таким образом чтобы скорость измерения рН состанляля 0,21,0 ед/мин. Предпочтительно шелочнойГидролизат биомассы дрожжей получатьпутем нагревания биомассы при температуре 75-95 С, рН 10-12 в течениео,30-60 мин.Способ осуществляют следуощим образом.Агрегацию бактериальной биомассыс содержанием АСВ абсолютно сухихвеществ) 0,9 - 2,5 Е проводят путем подкисления и добавления смеси дрожжей кс их гидролизатом, Изменение рН бактериальной суспензии цс значения 2,5 ч,0 осуществляют добавлением неорганической кислоты, например.сернойили Фосфорной. Затем в зту суспензию,. - ,добавляют заранее приготовленнуюсмесь биомассы дрсеОкей, в частностивыращенньх на н-парафинах, с их гидРоливатом в количестве 1-6 Е,Смесь биомассы дрожжей с. их гидролизатом получают следующи:; Образом, В концентрированную суспензию, содержащую 2-57 АСВ дрожжей, добавляют 207-ньй раствор Гидрата окиси калиядо рН 1-2 и полученную смесь вьдерживают 1 ри интенсивном перемешивании,температуре 80 С в течение 30-60 мин..оЗатем в полученный гидрслизят добав -ляют биомассу дрожжей. Весовое соотношение биомассы дрожже 1 и их Гидролизата составляет (б:1, Меньшееколичество дрсеокей в смеси не .-Гводит к повьшении степени кон;,:е:,рь 1 рования и эффективности выде:енкябактериальных клетоко щественноувеличивает расход до:,:о:ОстоящагоГицролизата Увеличение Весовой цслидрожжей в их г;".,"ролизате выше 10:снижает степень концентрированиябяктериаль 1 Ь 1 х к 1 етск,Послс добавления к Выделяемойбактевиял-:,но 11 био 1,1се к,1 С;О ы чсмеси бисма сы дрожжей и .х гидро. - ,:.=:=. зята суспензию бактерий нагревают дс 80"90и рязделяке О"яива 1 ием Еь;1 сепарацией. При этом степень концентрирования составляет о-:.9 до 11, а степень выделения биомассы 97-993.П р 1 и е р 1, 1 00 1 бактери -и Яльноп суспензии " рП О,7 полученнси при выращивании,"11 сосссспз шеКНЯПО.са н, метаноле, содержащей 18/ АСБ бактерей, добавляли 0,35 л 5,.-ного раствора фосфорной кислсть; и . в :ере- Мвгц 1 ВЯЛИ СУС;ЕНЗИЮ В ТЕЧЕНИЕ 3 МИН после чего :;нячение рН суспепзии стало 2 5 Блине 1 скогссть изменения рН была 1,0 ед/МИч., Затем добавляли 1 г сеси дрожжей суспензии из Фесментера и концентрированной дрожжевой биомассы, содержащей 15 АСВ, псдверГнутОй предвярительч О щелоч ной обработке, Щелочную обработку кснцент: "ОВЯнеОй биОмЯссы проводили следуюК.-4 Образом 02 кГ суспензии смешивачи с 20 ь 1 л 202 в но расрагидрата окиси квия и Выдерживалиее при интенсивном перемешивании,ОрН 12 темперЯтуре 80 С В течение 50 мин. Весовое соотношение дрсеюкиГидволизет в смеси состав ееОО 1 11 ос 1 е под,ислен:я 1 добавления смеси дрожжей с их гицрслчзатом бакте -риальную суспензию перемевивали принагревании до 80 С а течение 5 мини годавали на сепарацеею, Стеченьконцентсирсввния биомассы 10,2 приполноте выделения бяктерияльныхклеток 993,П р н м е р 2, ( 100 л бяктери.алькой суспензии с рН 6,.5, получен1045622 Редактор П. Горькова Техред М.Гергель Корректор Е, Рошко Тираж 525 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Заказ 2796/2 Филиал .ППП "Патент", г. Ужгород, ул, Проектная, 4 ной при выращивании МеСЬ 11 ососсцясаряц 1 аСия на природном газе, содержащей 2,2 АСВ бактерий добавляли 0,3 5%"ного растворафосфорнойкислоты и перемешивали суспензию в 5течение 2 мин, после чего рН суспензии стало 3,25, причем скорость егоизменения была равна 0,6 ед/мин.Затем в суспензию добавляли 9 г смеси дрожжевой биомассы и щелочного 10гидролизата концентрированныхдрожжей,содержащих 12% АСВ, подвергнутого предварительно щелочной обработке, Щелочнуюобработку концентрированной биомассыпроводили также, как в примере 2, 15оно при температуре 95 С, рН 11,0н течение 40 мин, Соотношение дрожжи.-гидролизат в смеси составило 8:1.Бактериальную суспензию перемешивалии сепарировали так же, как в примере 20. Степень концентрирования биомассы9 при полноте выделения бактериальных клеток 98 ,П р и м е р 3. К 1 О л суспензиибактерий Ряеойошопая риЬс 1 ег, содер жащих 0,92 . АСВ, добавляли 0,1 л5%-ного раствора серной кислоты иперемешивали суспензию в течение 2 мин, после чего значение рН суспензии стало 4,0, причем скорость его изменения была 0,2 ед/мин, Затем добавляли 0,7 г смеси дрожжевой суспензии из ферментера и концентрированной дрожжевой биомассы, содержащей 4 АСВ, подвергнутой предварительно щелочной обработке, Щелочную обработку проводили так же, как в примере 1, но при температуре 75 С, рН 11,5 в течение 60 мин. Соотношение дрожжигидролизат в смеси составило 6:1.Бактериальную суспензию перемешивали и сепарировали так же как в примере 2. При этом степень концентрирования биомассы составила около 11,0 , при полноте выделения клеток 97,1%,Таким образом, описанный способ обеспечивает увеличение степени концентрирования биомассы до 9-11, т.е. содержания АСВ в сгущенной биомассе 18-20 при этом степень выделения составляет 97-99 . Получение продукта, содержащего 18-202 АСВ, позволяет исключить стадию вакуум-выпарки из технологического процесса и направить биомассу после стадии выделения непосредственно на сушку.