Способ выделения дрожжей

СОЮЗ СОВЕТСНИХса,иимшаетиРЕСПУБЛИН 0% О) цр С 12 И 1/02 ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ СТВ АВТОРСКОМУ 9 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОЧНРЫТИЙ,(71) Казанский ордена Трудового Краного Знамени химико-технологическийинститут им. С. М. Кирова и Производственное объединение промышленности микробиологического синтеза"Башпромбелок" Главного управлениямикробиологической промышленностиСССР(56) 1. Накамура Х. Химические методы отделения клеток обычных микробов. "Микробиология", т. 30, В 4,1961, с. 629.2. Авторское свидетельство СССР.ф 145877, кл. С 12 И 1/02, 1960.3. Авторское свидетельствоСССРпо заявке В 3564353/13,кл. С 12 0 1/02, 1983.(54)(57) СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ ДРОЖЖЕЙиз культуральной жидкости, полученной при культивировании дрожжей сиспользованием этанола в качествеисточника углерода, предусматривающий добавление высокомолекулярногореагента в концентрации 0,001-0,017к объему культуральной жидкости,о т л и ч а ю щ и й с я тем, что,с целью ускорения процесса и увеличения степени сгущения биомассыдрожжей, в качестве высокомолекулярного реагента используют поли-этил-метил-винилпиридинийбромид,при зтом процесс ведут при рН 6,5, Изобретение относится к микробно логической промышленности, а йменно к способу вьщеления дрожжей из куль туральной жидкости, полученной при культивировании дрожжей с использованием этанола в качестве источника углерода.Известны способы выделения микроорганизмов, предусматривающие добавление вспомогательных веществ ЦИзвестен способ вьщеления дрожжей из культуральной.жидкости, предусматривающий добавление в качестве вспомогательного вещества полиО 15 20 25 35 Известен также способ выделениядрожжей иэ культуральной жидкости,полученной при культивировании дрожжей с использованием зтанола в качестве источника углерода, предусматривающий добавление высокомолекулярного реагента в концентрации0,001-0,017 к объему культуральнойжидкости с последующим отделениемосадка, В качестве высокомолекулярного реагента используют фталоилжелатину. Процесс ведут при рН 34 31;Недостатками известного способаявляются недостаточно высокая скорость процесса и невысокая степеньсгущения биомассы.Цель изобретения - ускорениепроцесса и увеличение степени сгуще -ния биомассы дрожжей,Укаэанная цель достигается тем,что согласно способу вьщелениядрожжей из культуральной жидкости,полученной при культивированиидрожжей с использованием этанолав качестве источника углерода,предусматривающему добавление высокомолекулярного реагента в концентрации 0,001-0,01 Ж к объему культуральной жидкости, в качестве высокомолекулярного реагента используют поли-этил-метил-винилпиридинийбромид, при этом процессведут при рН 6,5-9,0.Способ осуществляют следующимобразом,Поли-этил-метил-.5-винилпиридинийбромид (ПЭМВПБ)-твердое порошкообразное вещество белого цвета, получают его радикальной полимеризацией 1-этил-метил-винилпиридинийбромида в растворе этилового спирта, причем инициатором служит перекись бензола, взятая в количестве 17 от содержания мономера.Мол. м. 3,2 ф 10.В дрожжевую суспензию, полученную при выращивании дрожжей на питательной среде, содержащей в качестве источника углерода этанол,при перемешивании добавляют ПЭМВПБв концентрации 0,001-0,017 к объему суспензии. Затем раствором аммиака доводят рН до 6,5-9,0. Смесьбыстро разделяется на два слоя.Время разделения 3-9 минСокращение времени разделениясуспензии особенно важно, еслиотделение биомассы ведут непрерывно в проточных реакторах. Степеньсгущения суспензии определяют поплотности осадка.Для определения плотности осадка используют визуальный метод фронтальных границ. 15 мл дрожжевойсуспензии с ПЭМВПБ при рН 3,8 заливают в специальный мерный цилиндремкостью 25 мл. При разделении суспензии происходит образование четкой границы раздела между надосадочной жидкостью и осадком. По высоте межфазной границы судят о плотности осадка, вычисляя отношениевысоты осадков. Высоту осадка вконтроле (без добавления вспомогательного вещества) принимают за 1.После разделения суспензии био-.массу дрожжей отделяют известнымспособом, например декантацией, сепарацией и т.п,П р и м е р 1. Используют культуральную жидкость дрожжей СапйЫа 1 ашЬ 1 са, выращенных на синтетической питательной среде, содержащей 13 этанола. Содержание дрожжей в суспенэии 20 г/л, рН 3,8. В культуральную жидкость добавляют при перемешивании водный раствор ПЭМВПБ, доводя его концентрацию до 0,013 к объему культуральной жидкости.Перемешивают в течение 2 мин и с помощью 253-ного раствора аммиака устанавливают рН 9. Смесь разделяется на два слоя, степень вьщеления дрожжей 99 Х. Время разделения 3 мин. Плотность осадка относительно контроля 4, Время разделения суспензии с рН 9 в контроле 19 мин. Плотность осадка, полученного с добавлением1133290 Составитель Т. МелентьеваТехред Т.Маточка Корректор А. Обручар Редактор Н. Джуган Заказ 9923/25 Тираж 525 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, 1 К, Раушская наб., д. 4/5Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, л. Проектная, 4 3той же концентрации фталоилжелатины при отйимальном для ее действиязначения рН 2,1, время разделения при этом 8 мин. П р и м е р 2. Осуществляют по примеру 1, но концентрация ПЭМВПБ составляет 0,0017 к объему культу- ральной жидкости. Степень выделения дрожжей 997. Время разделения суспензии 6 мин. Плотность осадка относительно контроля 4. Плотность осадка, полученного с добавлением той же концентрации фталоилжелатины при оптимальном для ее действия значении рН 2, время разделенияпри этом 9 мин.П р и м е р 3. Осуществляют опримеру 1, но процесс проводят прирН 6,5. Степень выделения дрожжей993. Время разделения суспензии7 мин, Плотность осадка относительно контроля 3,8, Время разделениясуспензии в контроле 28 мин.1 О Таким образом, предлагаемый способ выделения дрожжей позволяетускорить процесс выделения, а также увеличить степень сгущения суспензии, что упрощает и удешевляет 1 последующую сушку биомассы.