Способ моделирования митотической пролиферации гепатоцитов

СООЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК адовникова,в ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ ССС О ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИ ОПИСАНИЕ ИК .аВТОРСКОМУ ОВРВВТВВ.(56) 1. Блюгер А.ф. и др. Успехи гематологии, вып. Ч 11, Рига, 1972, с.327,21 Елисеева Н,В. и др. Влияние переменного низкочастотного магнитного поля на регенерационные процессы в печени крыс. " Сб. ф,Проблема регенерации патологических измененных органов и обратимости патологических изменений.ф. Горький, 1975, с. 382; ЛО 1015420 А 3 ЦВ 6 09 В 23/28 А 01 Н 1/02(54)(57) СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ ИИто.ТИЧЕСКОИ ПРОЛИФЕРАЦИИ ГЕПА 10 ЦИТОВ,включающий реэекцию доли печени споследующим воздействием на животноенизкочастотным магнитным полем, о тл и ч а ю щ и й с я теис что, с целью увеличения.ноличества митоэов,на животное в течение 30-60 мин воздействуют импульсным магнитным полем напряженностью 500-1000 Э, частотой 5 Гцимпульсамн треугольнойформы длительностью 14-16 мс.Изобретение относится к экспериментальной биологии и может быть использовано при изучении цитологи-ческих механизмов митотическогб деления клеток для быстрого получениябольшого количества митозов.Известен способ моделирования митотической пролиферации гепатоцитовпутем резекции доли печени )11 .Однако митотическая активностьгепатоцитов при применении однойтолько резекции недостаточно высокая(она составляет 11+0,7/оо).Наиболее близок к предлагаемомуспособ моделирования митотическойпролиферации гепатоцитов, включающий 5резекцию доли печени с последующимвоздействием на экспериментальноеживотное низкочастотным магнитнымполем. На животных после гепатэктомии воздействуют переменным низкочас-Ототным магнитным полем, которое по лучают от магнита, вращающегося соскоростью 15,6 об/минГ 23.Крыс располагают в Магнитном полетак, чтобы силовые линии проходиличерез печень. Для усиления напряженности магнитного поля под крысой вобласти печени помещают второй магнит разноименным полюсом к первому.Напряженность электрического поляпостоянного магнита, используемогов опыте, равна 60 Э, напряженностьполя на уровне. эксперимента меняют;от 100 до 200 Э.Однако малое количество митозов.ограничивает применение известногоспособа при изучении цитологическихмеханизмов деления клетки.Цель изобретения - увеличение количества митозов,Поставленная цель достигается тем,что согласно способу моделированиямитотической пролйферации гепатоци-,тов, включающему резекцию доли печени с последующим воздействием на животное низкочастотным магнитным полем, на животное воздействуют в течение 30-60 мин импульсным магнитнымполем напряженностью 500-1000 Э,частотой 5 Гц импульсами треугольнойФормы длительностью 14-16 мс.Предлагаемый способ осуществляютследующим образом.Животное фиксируют, дают эфирныйнаркоз, На брюшной стороне животногопо белой линии живота делают разрездлиной 2-3 см, вскрывают брюшную полость. Затем перевязывают, лигатуройлевую боковую и центральную доли печени и отсекаютих, Спустя 2 ч послеоперации на животных воздействуют 60импульсным магнитным полем напряженностью 500-1000 Э, частотой 5 Гц им.пульсами треугольной формы длительностью 14-16 мс в течение 30-60 мин.С этой целью экспериментальную,группу 65 животных (одновременно 5 крыс) помещают в соленоид прямоугольной формы. Эффект проявляется после. первой процедуры. Дальнейшее воздействие импульсного магнитного поля большого повышения митотического индекса не дает.Животное привязывают за четыре конечности к деревянной доске брюшной. стороной кверху. Дают эфирный наркоз масочным способом в течение 1-2 мин. готовят операционное поле размером 60 х 30 мм. Выше мечевидного отростка на 1 см и вниз на 5 см выщипывают шерсть. Смазывают кожу йодом, покрывают животное стерильной салфеткой и зажимами фиксируют ее к коже в области операционного поля. Дают эФирный наркоз в течение 2-3 мин. Набрющной стороне по белой линии живота делают разрез длиной 2-3 см. Послойно. разрезают кожу, апоневроз, мышцы.Рану расширяют и выводят центральнуюдолю печени, Ее перевязывают стерильным лигатурньй шелком и отсекаютВыводят левую боковую долю, также перевязывают и отсекают. В брюшную полость вводят раствор пенициллина в количестве 1 мл - 1000 Ед,.Предлагаемым способом в течение года проведено исследование митотической пролиферации гепатоцитов на120 белых беспородных крысах весом от100 до 250 г. Контрольная группа животных после гепатэктомии воздействиюимпульсного магнитного поля не подвергаласьОб интенсивности пролиферации в печени судят по величине митотического индекса (количество митозов на 1000 клеток).У экспериментальных животных, подвергавшихся воздействию магнитного поля, наибольший пик митотической активности гепатоцитов отмечалсяуже через 24 ч после резекции (сдвигвлево), по сравнению с контрольной группой, у которой максимум митотической .активности наблюдается на 23 сут после гепатэктомии. Относительный вес печени у опытных животныхвозрос в. 2 раза по сравнению с исходным значением и составлял 3,0, у контрольных животных относительный веспечени увеличивался лишь в 1,3 раза.Интенсивность митотической пролиферации возрастает в 7 раз по сравнению со стимуляцией только резекции печени,Предлагаемый способ непродолжите- леЪ во времени, Для достижения эффекта достаточно одной процедуры продолжительностью 30 мин.Стимуляция митотической пролиферации гепатитов наблюдается в 80 случаев. Минимальное значение величины митотического индекса после стимуля1015420 Составитель ВБруслик Редактор Ю, Ковач Техред.К.Мыцьо Корректор Е. РошкоЗаказ 3222/48 Тираж 488 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035 Москва, Ж, Рауаская наб., д. 4/5филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 циу предлагаемым способом составляло60 /ОО, максимальное повышение митотического индекса - до 110 /оо . Предлагаемый способ прост; не требует для своего осуществления дорогостоящей аппаратуры