Способ выявления кровеносных сосудов на гистологических препаратах

Союз СоветскихСоциалистическихРеспублик ОП ИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ 1 1)957046Опубликовано 07.09.82. Бюллетень 33Дата опубликования" описания 17.09.82 по лелам иэооретеиий и открытий(72) Авторы изобретения Ордена Трудового Красного Знамени научно- " исследовательский институт экспериментальноимедйцийы АМН 1"ГСР(54) СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ КРОВЕНОСНЫХ СОСУДОВ НА ГИСТОЛОГИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТАХ1Изобретение относится к медицине, а именно к морфологии, и может быть использовано при гистохимическом исследовании срезов кровеносных сосудов.Известен способ выявления кровеносных сосудов на гистологических препаратах пу тем окраски их протравными красителями (гематоксилином, бразилином, кармином) и последующую дифференцировку солями трехвалентного железа 1.Однако известный способ длителен по времени и не позволяет получить необходимого уровня контрастности структур кровеносных сосудов,Известен также способ выявления кровеносных сосудов на гистологических препаратах железным гематоксилином по Гег квисту, заключающийся в окраске 1%-ным раствором гематоксилина до выявления желательных структур в срезах, предварительно протравленных в 5 й-ном растворе хлорного железа в течение 5 мин. Вся процедура выявления занимает 8 - 10 мин 12.Однако существующий способ выявления не позволяет достаточно контрастно дифференцировать нужные структуры кровеносных сосудов. Целью изобретения является повышение качества гистологических препаратов.Цель достигается тем, что согласно способу выявления кровеносных сосудов на гистологических препаратах путем их протравливания солями трехвалентного железа и окраски отличительной особенностью является то, что срезы после окраски обрабатывают 1%-ным раствором трилона В при 45 - 50 С.Предлагаемый способ осуществляется следующим образом.Срезы кровеносных сосудов протравливают солями трехвалентного железа (например, хлористым железом, железо-аммонийными квасцами). Концентрация растворов и время протравливания зависит от выбора соли, типа кровеносного сосуда и толщины среза. Затем срезы окрашивают одним из протравных красителей, например гематоксилином или бразилином, Причем окраску проводят с небольшим перекрашиванием изучаемых структур. После этого на срезы наносят 1%-ный раствор трилона В при 45 - 50 С, с помощью которого производят дифференцировку нужных структур,957046 формула изобретения Составитель С. Малютина Редактор Л. Гратилло Техред А. Бойкас Корректор Е. Рошко Заказ 6585/30 Тираж 887 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений н открытий 113035, Москва, Ж - 35, Раушская наб., д. 4/5 Филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4Пример. Проводят выявление коронарных артерий сердца человека на гистологических препаратах, Парафиновые срезы коронарных артерий, фиксированных в кальций-формоле, монтируют на предметных стеклах, после отводки окисляют в 0,5 о/о-ном растворе марганцевокислого калия - 2 мин, промывают дистиллированной водой, отбеливают 50%-ной щавелевой кислотой 1 - 2 мин и снова промывают дистиллированной водой. Окисление и отбеливание проводят для повышения качества окраски. Затем для протравливания наносят на срезы 6%- ный раствор железо-аммонийных квасцов, подогревают над пламенем спиртовки до 45 - 50 С - 2 - 3 мин, сливают квасцы и, не промывая, наносят на срезы для окраски 1/,-ный раствор свежеприготовленного гематоксилина, также подогревают над пламенем спиртовки до 45 - 50 С - 2 - 3 мин, добиваясь небольшой перекраски изучаемых структур, После промывки срезов дистиллированной водой для дифференцировки наносят на них 1/,-ный раствор трилона В, и предметное стекло снова подогревают до 45 - 50 С . Дифференцировку нужных структур проводят под контролем микроскопа в течение 1 - 3-х мин. В результате такого способа выявления коронарных артерий сердца человека на гистологических препаратах были получены контрастные изображения нужных структур данных артерий на неокрашенном фоне.Использование предлагаемого способавыявления кровеносных сосудов на гистологических препаратах обеспечивает возможность получения высокого качества гистологических препаратов не только единичных, но и серийных при небольших затратах времени и без участия высококвалифицированных лаборантов, а также вы явление более тонких тканевых и клеточных структур кровеносных сосудов. Способ выявления кровеносных сосудовна гистологических препаратах путем ихпротравливания солями трехвалентного железа и окраски, отличающийся тем, что, сцелью повышения качества гистологических препаратов, срезы после окраски обрабатывают 1%-ным раствором трилона Впри 45 - 50 С.Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1, Бенда, Гейденгайн, Лилли Р. Патогис 75 тологическая техника и практическая гистохимия. М., Мир, 1969, с. 158.2, Ромейе Б. Микроскопическая техника.М., Изд-во Иностранная литература, 1953,с. 164 - 165.