Штамм sтrертомyсеs sp. 74-продуцент арахидоновой кислоты

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ Союз СоветскихСоциалистическихРеспублик К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(22) Заявлено 050880 (21) 2990640/28-13 311 М. Кл.з с присоединением заявки Мо(23) Приоритет С 12 Р 1/061//С 12 Р 1/06С 12 й 1/465 Государственный комитет СССР по делам изобретений и открытий(53 УДК 615. 734.3 (0888) Дата опубликования описания 230882 К.Фг,/ ЛАВ;гй,: тЮХНН;и , .: ки ВИБЯУС) У(,1(72) Авторы изобретения З.Ш.Ломтатидзе, ДвгМ.Анели и Н.Г.Аревадзе Тбилисский ордена Трудового Красного Знамен государственный университет и Институт ботаАН Грузинской ССР(54 ШТАММ 5 ТВЕРТОИУСЕ 5 5 Р.74-ПРОДУЦЕНТ АРАХИДОНОВОЙ КИСЛОТЫ Изобретение относится к микробио.- логической промышленности и касается производства простагландинов.Источником получения арахидоновой кислоты являются различные органы жи вотных, например ткани печени, надпочечники, мозг свиней, коров, бычьи почки, селезенки, сердца коров или овец, Из животных тканей арихидоновую кислоту выделяют различными модифицированными способами. Однако биологические источникиарахидоновой кислоты и способ ее получения из животных тканей являетсядорогостоящим и трудоемким.Предложенный штамм новый, в патентной и научно-технической литературе не описан.Целью изобретения является новыйштамм 5 сгерсоаусев ар. 74, продуцирующий арахидоновую кислоту.Предложенный штамм 5 сгерсовусеээр.74 выделен из почвы Арагвского ущелья Грузии.Штамм 5 сгерсощусея эр.74 продуцент ардхидоновой кислоты хранитсяв музее культур микроорганизмов института "ВНИИгенетика" под номером ЦМПМ 5 в 4. Культурально-морфологические признаки. Споры гладкие, овальные, спороносцы спиральные.5 Клеточная стенка культуры содержит -диаминополимелиновую кислоту,галактозу и арабинозу.На ранней стадии развития штаммобразует белый воздушный мищелий,который с возрастом становится серымс розоватым оттенком,Рост 5 сгерсовусеэ эр,74 характеризуется следующими признаками на нижеперечисленных средах:Среда Гауэе 1. Рост хороший, воздушный мицелий развит, сероватый.Субстратный мицелий черный, питательная среда бесцветная.Среда Гаузе 2. Рост средний, воздушный мицелий развит местами хорошо, местами не развивается. Субстратный мицелий бесцветный, питательнаясреда бесцветная.Глюкоэо-аспарагиновый агар: ростслабый, воздушный мицелий слабо раэ"вит, белый, субстратный, мицелий бесцветный, среда бесцветная.Среда 1 с крахмалом: рост оченьхороший, воздушный мицелий хорошоразвит, сероватый .с розоватым оттенком.952959 Формула изобретения ВНИИПИ 3 аказ 6215/43 Тираж 505 Подписное Филиал ППП "Патент", г.ужгород,ул.Проектная,4 Среда 1 с глюкозой: рост слабый,воздушный, мицелий слабо развит,беловато-сероватый.Крахмально-аммиачный агар: ростхороший, воздушный мицелий слаборазвит, беловато-сероватый. 5Мучная среда: рост хороший, воздушный мицелий, беловато-сероватый.Среда Чапека: рост слабый, воздушный мицелий слабо развит, беловато-сероватый. 10Овсяная среда: рост очень хороший, воздушный мицелий хорошо развит, беловато-сероватый.Пептонно-кукурузный агар: ростслабый, воздушный мицелий слабо развит, беловатый.Мясо-пептонный агар: рост оченьслабый, воздушный мицелий очень слабо развит, розоватый.Голодная среда: рост очень сла Обый, воздушный мицелий очень слаборазвит, беловато- гряановатыйСреда.СОн: рост очень хороший,воздушный мицелий оцень хорошо развит, серовато-беловатый, субстратный мицелий бесцветный, питательнаясреда бесцветная.Среда Линдейбайна: рост оченьслабый, воздушный мицелий очень слабо развит, беловатый, субстратный,мицелий бесцветный,.среда бесцветная,ф Оболочка клеток содержит .-диаминопимелиновую кислоту, галактозу иарабиноэу.5 сгерйоаусеь ьр.74 хорошо усваивает крахмал, сравнительно слабо -глюкозу, рамнозу, плохо - сахароэу,сорбит, лактоэу, очень плохо - манит.Культура обладает антагонистической активностью против ряда грамположительных, грамотрицательных бактерий, Фикробактерий, грибов, дрожжей,актиномицетов и фитопотогенных бакте.рий. 5 йгерсовусеь вр.74 разжижаетжелатин, молоко не пентонизирует, 45хорошо гидролиэует крахмал, восстанавливает нитраты, растет на целлюлозе. Маланойдный:; пигмент не образует,Пример использования штамма. 50Посевную культуру 51 герсовусеэар. 74 выращивают на агариэованнойсинтетической среде (СР) с крахмалом (состав дается ниже) на чашках Петри. Культивацию продуцента 55проводят в термостате при 28 С.оНа шестой день культивации берутопределенное количество опор 5 ггеровусеь ьр.74 и засевают колбы, содержащие питательные среды следующие составадующего состава:1, Среда 1. Красильникова (синтетическая среда).Кйо, 1 гйаС 0,5 гКДН Р 04 0,5 гРе 504 СледыМ 9504 0,5 гСаСО 1 гКрахмал 20 г, агар 20 г (для ага ризованных сред), вода водопроводная 1 л (для жидких).2. Органическая среда (соевая).Соя 10 гГорох 10 гйаС 5 гСаСО 1 гПептон 0,5 г(йН 4) 04 1 гСтерилизация среды - 0,6 атм, 30 мин.Время культивирования 96 ч на качалках (160 об/мин) при 28 С.Биомассу 5 серощусе яр.74 отделяют от культуральной жидкости центрифугированием. Из биомассы липиды экстрагируют по методу Фольча.Жирные кислоты метилируют по методу Дуфека.Количественное содержание арахидоновой кислоты анализируют методом газо-жидкостной хроматографии.Выделение арахидоновой кислоты проводят путем хроматографии смеси жирных кислот на колонке с кремниевой кислотой (100 меш.).Выход целевого продукта.1. На 1 г биомассы 5 герйовусеь ьр.74 (культивируемой на органической среде) приходится 6,5-7,0 мг арахидоновой кислоты (липиды - 0,260-0,270 г, сумма жирных кислот 0,0170-0,0180 г (пересчет на сухую биомассу).2. На 1 г биомассы 5 сгерйощусеь ьр,74 (культивируемой на синтетической среде) приходится 3,0-4,0 мг арахидоновой кислоты (пересчет насухую биомассу). Штамм 5 йгерсовусеь ьр.74 (хранится в музее культур микроорганизмов института "ВНИИгенетика" под номером ЦМПМ 5-497") - продуцент арахидоновой кислоты.