Способ определения состояния обменных процессов в организме

ОП ИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Союз СоветскикСоцмалмстмческмаРеспублик(51)М, Кл, 6 01 М 33/48 1 Ьеудератваккый камнтет СССР Ао аелак нэобретеккй н открытейОпубликоваио 2 З 06,82, Бюллетень 2 ЗДата опубликования описания 23 06 82(72) Авторы изобретения Одесский научно-исследовательский институт стоматологии(71) Заявители и Всесоюзный ордена Ленина и ордена Трудового Красного Знамени селекционно-генетический институт(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОСТОЯНИЯ ОБМЕННЫХ ПРОЦЕССОВ В ОРГАНИЗМЕИзобретение относится к аналитической биохимии, а именно к способам определения состояния обменных процессов в организме путем введения меченых аминокислот в организм.5Известен способ определения состояния обменных процессов в организме путем введения в организм меченой аминокислоты с последующей гомогениэацией исследуемой ткани, неоднократо ной промывки гомогената, высушивания его и подсчета радиоактивности белковой фракции гомогената 1 1.Однако известный способ не обеспечивает высокой точности, требует значительных затрат времени и использования большего количества реактивов.Цель изобретения - упрощение и повышение точности способагоЭто достигается тем, что согласно способу определения состояния обмен ных процессов в организме путем введения в организм меченойаминокислоты с последующей гомогенизациейисследуемой ткани, неоднократнойпромывки гомогената, высушиванияего и подсчета радиоактивности белковой фракции гомогената, ткань пе"ред измельчением предварительно высушивают, а промывку гомогената проводят последовательно смесью спирта и эфира, затем дистиллированнойводой,Сущность способа заключается втом, что белки не осаждаются трихлоруксусной кислотой, а ткань сразу подвергают сушке при 100-115 С в течение 10-12 ч. При этом происходитденатурация белков, сопровождающаясяпотерей их растворимости. После высушивания ткани легче растираются вступке до однородного состояния, азатем подвергают одноразовой экстракции жирорастворителем например,спирт:эфир 1;1., однократной экстракГции дистиллированной водой, Оптималь"938156 31:50. Остаток (белка высушивают и используют для подсчета радиоактивности,П р и м е р 1. Навески тканей в 50-100 мг помещают в сушильный шкаФ при 105-115 С на 6-24 ч. Высушенные з ткани растирают в порошок, переносят в центрифужные пробирки, заливают жирорастворителями-смесью спирт:эфир 1 1:1и оставляют на 30 мин. Затем центрифугируют, осадок заливают ди стиллированной водой и ставят в водя ную баню при 60-70 С. После этого вновь центрифугируют, осадок высушивают. В 10 мг его подсчитывают ра" диоактивность, 15П р и м е р 2. Слизистую оболочку полости рта высушивают при 110 С в течение 12 ч.После высушивания ткань растирают до порошкообразного состояния в ступке. Порошок обрабатывают спиртом и эфиром в разведении 1:1, На 100 мг порошка добавляют 5 мл смеси жирорастворителя, оставляют на 30 мин, затем центрифугируют, К осадку приливают 5 мл дистиллированной 2 з воды, нагревают в водяной бане при 70 фС в течение 10 мин. Вновь центрифугируют. Осадок высушивают в течение 3 ч при 110 С растирают, затем навеску порошка используют для подсчета радиоактивности.П р и м е р 3. Печень высушивают при.100 С в течение 10 ч. Затем исследования проводят аналогично при- меру фПредлагаемый способ по сравнению с известным имеет в 2 раза меньше операций, получение конечного резуль. тата требует в 3 раза меньше времени, позволяет более точно определить включение меченых аминокислот в белки, поскольку достигается более высокая степень очистки белковой Фракции. Формула изобретения Способ определения состояния обменных процессов в организме путемвведения меченых аминокислот в организм с последующей гомогенизациейисследуемой ткани, неоднократнойпромывки гомогената, высушиванияего и подсчета радиоактивности белковой Фракции гомогената, о т л и ч аю щ и й с я тем, что, с целью упрощения и повышения точности способа,ткань перед измельчением предвари-.тельно высушивают, а промывку гомогената проводят последовательносмесью спирта и эфира, а затем дистиллированной водой,Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1. Брагинская Л,И., Суканова В.А.Включение радиактивного метионинав белки различных отделов желудочно-кишечного тракта." Балл,экспери(мент. биологии и медицины, 1964, М 9,т.58, с. 69-71Составитель Р.КатосоваРедактор А,Козориз Техред д, дчКорректор М.ШарошиишЗаказ 4451/67 Тираж 887 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5ШФилиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул, Проектная, 4