Способ приготовления препаратов бактерий для просмотра в сканирующем микроскопе

Оп ИСАНИВИЗОБРЕТЕН ИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Союз СоветениксоциалистическиеРеснубнии и 933700(53)М. Кд.С 12 М 1/00 С 12 й 1/00 РфРвреткккный квинтет СССР ав делам нзебретеннй н вткрвтнй(53) УЛ К 578.6: 086,3 (088,8) Дата опубликования описания 07.06.82 СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ПРЕПАРАТОВ БАКТЕРИЙЯ ПРОСМОТРА В СКАНИРУЮШЕМ МИКРОСКОПЕ(5 Изобретение относится к микробиоло. гии.Известен способ подготовки колоний бактерий для просмотра в сканирующем микроскопе, включающий замораживание бактерий и высушивание в замороженном состоянии 1 .Этот способ подготовки препаратов бактерий путем лиофилиэации требует специальной вакуумной камеры и охлаждение до температуры твердой углекислоты. Крь 1 О ме того, лиофилиэация сильно повреждает клетки за счет образования внихкристмликов льда, Данный способ не позволяет просмотреть колонию на разной глубине,1 качество. снимков очень низкое, способ трудоемок, время, необходимое на подготовку бактерий к просмбтру, составляет приблизительно по 246 ч.Известен также способ приготовления препаратов бактерий для просмотра в сканирующем микроскопе, включающий выращивание колоний бактерий на питательной среде с последующим фиксированием, при- . клеивание электропроводным кле еаюталлическому столику. и напыление металла на препарат 2 .,Однако извесжый способ очень трудоемок, долог и не позволяет изучатьмелкие микроорганизмы, например фитопатогенные бактерии,Целью изобретения является упрощениеспособа и сокращение времени приготов: ления,Для достижения поставленной целисогласно способу приготовления препаратов бактерий для просмотра в сканирующем микроскопе, включающему выращиваниеколоний бактерий на питательной. среде споследующим фиксированием, прикле иваннеэлектропроводным клеем к металлическомустолику и напыление металла на препарат,фиксирование колоний бактерий проводятпутем погружения их вместе с агаровойподушкой в концентрированный растворметалла на 2-72 ч, а после приклеивания к столику снимают поверхностнуюпленку и пооиэводят нанесение бороэдок3 9337 на поверхности колонии на глубину 0.1- 0,2 мм.П р и м е р . На питательных средах содержащих агар-агар выращивают коцо нии фитопвтогенных бактерий различных з родов, например, Раев 3 овое 3 В илк ЬМи 1 с 3Этк колонии зафиксированы вместе с агаровой подушкой в концентрированном метаноле в течение 2, 5-6, 10, 12, 24 0 и 72 ч при комнатной температуре.Далее колонии приклеивают клеем БФк специальному металлическому столику для сканирующего микроскопа 38 М 50-А, не дожидаясь испарения ме танола.Приклеенные колонии хранились от 1-2 ч до 6 мес. и при этом качество иэображений не менялось.Непосредственно перед напылением 20 металла на колонию проводят бороздки тонкой препвровальной иглой и снимают бвктериальную пленку.Колонии просматривают на японском сканирующем электронном микроскопе 25 марки ЯМ-А.Предложенный способ имеет следующие преимущества; фиксируется целая колония бактерий, что искиючает операцию приго товления взвесей; исключается центрифу- зе гирование, которое приводит к массовой гибели исходного материала; применяется одно легкодоступное фиксируюпже вещество; исключается применение спожных бу 00 4ферных смесей при фиксации; значительно сокращается время подготовки к просмотру в микроскопе. формула иэобре тен ия Способ приготовления препаратов бактерий для просмотра в сканируюшем микроскопе, включающий выращивание колоний бактерий на питательной среде с последующим фиксированием, приклеиваниеэлектропроводным клеем к металлическому столику и напыление металла напрепарат, о т л и ч а ю щ и й с я тем,что, с целью упрощения способа и сокращения времени приготовления, фиксирование колойий бактерий проводят путемпогружения кх вместе с агаровой подушкой в концентрированный раствор метанола на. 2-72 ч, а после приклеиванияк столику снимают коверхностную пленку и производит нанесение бороэдон наповерхности коажии на глубину 0,10,2 мм,Источники информации,принятые во внимание при экспертизе 1. Статья Мамекова К, Ю. и др. -фИэвестия АН СССРНГ. Сер. биологическая, Науквф, 1978, Ъ 6. 2, Большой практикум по.физиологии растений, МфВысшая школаф, 1978,с. 252-264,Составитель А,. МакаровРедактор Т, Веселова Техред М.Рейвес Корректор Ю. МакаренкоЗаказ 3863/6 Тираж 505 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по. делам изобретенийи открытий 113035, Москва,.Ж"35, Раушская наб., д. 4/5а ата аааааааааа та шьа ааааа еааеаааааюа а юфилиал ППГ 1 Патент", г. Ужгород, ул. Проектная 4