Блок геля для электрофореза

Соеэ Советсиия Социалистическик РеспубликОПИСАНИЕИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИ ИИЛЬСТВУ(51)М. Кл 3 6 01 Н 27/2 б Государственный коинтет СССР но ведам изобретеннй я открмтяй(71) Заявитель Онкологический научный центр АИН СССР(54) БЛОК ГЕЛЯ ДЛЯ ЭЛЕКТРОФОРЕЗА Изобретение относится к биохимии и может быть использовано в различных областях биологии и медицины. Более конкретно изобретение относит" ся к гельэлектрэфорезу.Известно выполнение гелевых носителей,цля элекрофореза в виде цилиндров (1.Недостатком их является невозможность одновременного анализа нескольких образцов.Наиболее близким к предлагаемому является блок геля для электрофореза, Блок представляет собой прямоугольный параллелепипед.Указанные блоки позволяют анали" эировать одновременно несколько образцов в .идентичных условиях (2). Однако указанная форма блока ге ля, как и цилиндрическая, позволяет получить невысокое разрешение составных компонентов пробы.. Разрешающая способность носителя улучшается выполнением последнего с 25 градиентом, Однако и в данном случае достигаемое разрешение не превышает 1000 Д.Цель изобретения - пов каение разрешающей способности блока геля. Щ Поставленная цель достигается тем, что блок геля для электрофореэа выполнен расширяющимся в направлении миграции разделяемых компонентов.Блок геля может быть выполнен в Форме пластины, противоположные широкие плоскости которой параллельны друг другу и имеют Форму равнобочной трапеции.Блок геля может иметь также клинообразную ФормуНа чертеже изображен блок геля дпя электрофореза. В указанной Форме блока геля напряженность электрического поля падает в направлении миграции разделяеввх компонентов, что приводит к формированию отдельных Фракций в виде узких полос.П р и м е р 1. Известнымспособом готовят градиент ПААГ (например, 5-20) с 0,1 808 в блоке"параллелепипеде и в блоке трапециевидной Фор" вк (или в Форме клина). Блоки ПААГ при этом имеют одинаковую высоту. Для сравнения разрешающей способности может быть взята любая смесь биополимеров. Для простоты можно при894533 формула изобретения НИИПИ Заказ 11473/69 Тираж 910 Подписно Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектна вести сравнительный электрофореэсмеси белков с известным молекулярным весом. Берут навески (по 1 мг)следующих образцов: Я-глобулин человека (мол.вес 160 КД), бычий сы"вороточный альбумин (мол.вес 68 КД),овальбумин (мол.вес) 43 КД), хема"трипсиноген А (мол,вес 25 КД), рибонуклеаэа (мол,вес) 12 КД),Белки растворяют в 1 мп электро"форетнческого буфера (ТРИС - глнциновый рН 8,3), ьекропипеткой наносят10-15,О 1 раствора на оба блока ПААГ.Электрофореэ ведут без префореза припостоянном токе 10-15,О А на блокПААГ. По окончании электрофорезагели извлекают и окрашивают 0,25Сскнпцзз 1 е Ьг 111 Ь 1 це в смеси изопропанол-уксусная кислота, вода(3:1:7) в течении 2-3 ч, Отмывку отнесвязавшегося красителя производят7 уксусной кислотой до исчезновения 33Фоновой окраски. Сравнение полученных электрофореграмм производятденситометрически (на денситометрахИФО, Уцп 1 ог, К 1 рр 8 Еопеп, Репа 3.оаЬ 174 и т. п. ) .П р и м е р 2. Полностью сохраняют условия и режим электрофореза,приведенные в примере 1, однако вблоке трапециевидной формы или вблоке-клине находится однородныйПААГ (например, 10). Сравнение 36электрофореграмм в блоке параллелепипеде и в предлагаемых блоках проводят денснтометрически.Использование блоков трапециевидной формы или блоков в форме клинас градиентом ПААГ позволяет увеличить разрешающую способность электроФореэа до 400 Д, т.е. более, чемв два раза, а также сократить времяэлектрофореза в 1,5-2 раза по сравнению с блоками .в форме прямоугольного параллелепипеда. Кроме того, при"менение предлагаемого типа пластинбез градиента ПААГ позволяет получить приблизительно тот же уровеньразрешения, что и в пластинах в форме прямоугольного параллелепипедас градиентом ПААГ. 1. Блок геля для электрофореэа,о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, сцелью повиаения разрешающей способности, он выполнен расширяющимся внаправлении миграции разделяемыхкомпонентов,2. Блок по п. 1, о т л и ч а ющ и й .с я тем, что, он выполнен вформе пластины, противоположные широкие плоскости которой параллельны друг другу и имеют Форму равнобочной трапеции.3. Блок по п, 1, о т л и ч а ющ и й с я тем, что он выполнен клинообразной Форма.Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1. Патент США Р 3047489,кл. 204/299 1962.2. Филиппович Ю.Б Егорова Т,А.,Севастьянова Г.А. Практикум по об.щей биохимии. И фПросвещение,1975, с. 85-94 (прототип) .1