Способ количественного определения антисептика

(45) Дата опубликования описания 07.11.81по долам изобретений и открытий(71) Заявитель Научно-исследовательский институт химиипри Горьковском ордена Трудового Красного Знаменигосударственном университете им. Н, И. ЛобачевскоГо(54) СПОСОБ КОЛИ Ч ЕСТВ ЕН НОГООПРЕДЕЛЕНИЯ АНТИСЕПТИКА 1Изобретение относится к аналитической химии антисептиков.Известен способ количественного определения антисептика путем внесения разве. дений исследуемого материала в лунки пи тательного агара, предварительно засеянного тест-культурой, с последующим определением концентрации антисептика по величине зон ингибирования роста тест-культуры 111. 10Однако известный способ не позволяет определить трилан.Целью изобретения является определение трилана.Эта цель достигается тем, что способ 15 количественного определения антисептика осуществляют путем внесения разведений исследуемого материала в лунки питательного агара, предварительно засеянного тест-культурой, с последующим определе нием концентрации антисептика по величине зон ингибирования роста тест-культуры, в качестве тест-культуры используют штамм Вас 111 цз птезец 1 ег 1 сцз 5 Тгелзап.П р и м е р. В чашкп Петри разливают 25 по 25 мл питательного агара. Состав среды: рыбный гидролизат 98%, агар-агар 2%, рН 7,2 - 7,4, Питательный агар стерилизуют в течение 20 - 30 мин, разливают в чашки, затем подсушивают в термостате 30 2при 37 - 40 С в течение 30 - 40 мин. После этого питательный агар засевают суспензией суточной бактериальной культуры Вас. гпезецепсцз 5 Тгс.1 зап. в колпчсстье 0,2 мл, содержащей в 1 мл 1 млрд бактериальных клеток по оптическому стандарту. Высев культуры проводят сплошным равномерным газоном, На питательной сре. де делают лунки диаметром 8 мм и в них вводят по 0,1 мл раствора трилана, Посевы инкубируют в термостате прп 35 - 37 С в течение 18 - 20 ч, (Возможна предварительная оценка результатов через 6 - 8 ч инкубации). Вокруг лунок с раствором трилана образуются зоны угнетения роста тест-культуры Вас. птезец 1 ег 1 сцз 5 Тгепзап. Величина диаметра зоны угнетения тест- культуры изменяется в зависимости от кон центрации трилана в растворе, с увеличением концентрации трилана зоны угнетения увеличиваются.На основании данных замеров величины диаметров зоны подавления роста культуры в зависимости от логарифма концентрации стандартных растворов трилана строят калибровочный график.Зависимость диаметра зоны подавления роста бактериальной культуры Вас, тпезец 1 ег 1 сцз 5 Тгеизап. от концентрации трила. на в растворе приведена на чертеже.878796 3Результаты определения трилана приведены в таблице. Статистическая ошибка, % Введено Найдено 3,86 я 0,34 8 44-0,7 22,02 . 1,26 55,29+ 3,15 110,36 -6,1 5 10 20 50 00 8,8 8,3 5,7 5,7 55 Из таблицы следует, что предложенным способом можно определять трилан в концентрациях от 5 до 100 мкг в пробе 0,1 мл раствора. Результаты анализа хорошо сог ласуются с контрольными пробами. Статистическая ошибка определения составляет 6 - 9%.Трилан применяют для пропитки бумаги с целью защиты ее от биоповреждений. Для контроля производства такой бумаги необходимо определение содержания трилана в ней, Предложенный способ позволяет выполнить это. Бумагу, содержащую трилан, предварительно измельчают на по. лоски размером 0,5 - 10,2 - 0,5 см. Затем берут навеску бумаги равную 1 г, помещают в колбу на 50 - 100 мл и заливают 10 мл 0,1 М раствора 1(ОН. Содержимое колбы нагревают до 80 С и выдерживают при этой температуре в течение 15 мин, Периодически содержимое колбы встряхивают и перемешивают. Затем после 3 - 4 Составитель С. Малютина ехред И. Пенчко 1(оррект. Л. Слепая и Н. федоров едактор П, Горькова Изд,572ВНИИПИ Государственного по делам изобретений и13035, Москва, Ж, Раушс Тираж 530омитета ССоткрытийая наб., д, 4 Заказ 739 одписное Загорская типография Упрполиграфпздата Мособлисполко Содержание трилана, мкг/0,1 мл растворачасовой экспозиции смеси при комнатнойтемпературе из раствора отбирают пробу4 мл и готовят разведения 1:2, 1:3, 1:4,1:б. При содержании трилана в бумаге5 в количестве 2 - 3% к ее весу в данныхразведениях содержание трилана ориенти.ровочно будет составлять 0,5 - 1 мг/мл.Данные водно-щелочные растворы трилананепосредственно используют для определе 10 нпя трилапа по выше описанной методике.Предложенный способ дает возможностьопределить антисептик нерастворимый вводе на фоне сульфатной целлюлозы, чтопозволяет осуществлять контроль за содер 15 жанпем трилана в бумаге в процессе еепроизводства, способ обладает высокойчувствительностью, позволяя определять50 мкг трилана в 1 мл раствора.Ф о р м ул а и зо бр етсни я20 Способ количественного определенияантисептика путем внесения разведений исследуемого материала в лунки питательного агара, предварительно засеянного тесткультурой, с последующим определением25 концентрации антисептика по величине зонингибирования роста тест-культуры, о тл и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью определения трилана, в качестве тест-культурыиспользуют штамм В ас 111 цз мевец 1 ег 1 сиз30 5, Тгс.лзап.Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1. Егоров Н, С, Микробы - антагонисты и биологические методы определения35 антибиотической активности, М Высшаяшкола, 1965, с. 120- - 130.