Среда для экстракции полового секретаиз придаточных желез самцов komapob

О П И С А Н И Е 1)843897ИЗОБРЕТЕНИЯ Союз Советских Социалистических Республик(21) 2817823/30-1 М К, з А 01 К 67/О присоединением заявк осударственный иом) Дата опубликования описания 72) Авторы изобретении(71) Заявитель Ордена Трудового Красного Знамени инедицинской паразитологии и тропической им, Е. И. Марциновского(54) СРЕДА ДЛЯ ЭКСТРАКЦИИ ПОЛОВОГОЕКРЕТА ИЗ ПРИДАТОЧНЫХ ЖЕЛЕЗ САМЦОКОМАРОВ АЕОЕЯ АЕОУРТ став 240 опре 2; вмесмик став стра вой, 20 ном. Поставленная в качестве солей пользуют 1,27 -МаС. Пример 1,рета из придаточль достигается тем, что щелочных металлов ис М водный раствор кстракция полового с тх желез некопулиров Изобретение относится к области сельского хозяйства и медицины, в частности к физиологии размножения насекомых.Известна среда для экстракции секрета из половых желез самцов дрозофил, состоящая из (г/л) ХаС 6,0, КС 1 0,1, СаСз 0,1, ЯаНСОз 0,1 - раствор Рингера 1.Известна среда для экстракции секрета из половых желез сверчков, содержащая (г/л) СаС 12 0,302; ИаС 5,22, КС 1 0,968, МАЗО 7 Н 20 2,50, Ча,НРО 4 0,105, КНзРО 4 0,060, декстроза 1,00, неомицин 0,12, стрептомицин 0,12, пенициллин 0,06 - раствор К 1 гзепз 2.Известна среда для экстракции секрета из половых желез самцов комаров, состоящая из (г/л) ХаС 9,0, КС 1 0,2, СаС 2 0,2. ХаНСОз - 0,1 раствор Аейез аедур 1 (3),Известные среды не обеспечивают полной экстракции секрета из придаточных желез самцов насекомых,Цель изобретения - повышение выхода полового секрета. ших самцов А. аедур 1 4-дневного возраста водным раствором 1,28 М чаС.Выделили 25 пар придаточных желез врастворе аедес, перенесли в микропробир ку с 25 - 30 мкл. раствора 1,28 М МаС и на1 сут. поместили в холодные условия для полной экстракции секрета, Затем содержимое микропробирки перемешали мандреной с электроприводом в течение 30 с, отцентри- О фугировали в течение 10 мин при 8000 об//мин, надосадок перенесли в чистую мерную микропробирку, осадок дважды промыли дополнительными порциями 1,28 М ЯаС по 25 мкл каждая, осадили центрифугировани ем и надосадки объединили. Общий объемэкстракта довели до 100 мкл раствором 1,28 М ИаС 1, определили содержанис в нем белка по Лоури в модификации А. А. Покровского микрометодом.о Конечный объем измеряемой пробы соил 320 мкл, из них 80 мкл экстракта и мкл реактивов. Оптическую плотность деляли против контроля, содержащего то экстракта 80 мкл 1,28 М МаС 1, в рокюветах на СФА с оптической прикой при 750 нм. Количество белка в эккте рассчитали по калибровочной крипостроенной с сывороточным альбуми" До мгк белка на особь М. гп Д о о о,.5О Е 1,34 141,8 0,780,05 1,28 М ха С Дистиллированная водаРаствораедес 6,4 8 200 13,2 3,00 0,53:. 0,07 0,55 й 0,06 98,2 8 200 12 300 100,0 1 0,9 Составитель М. Маландииа Техред И. Заболотнова Корректор Н. Федорова Редактор Е. Хорина Заказ 4600 Изд. 433 Тираж 712 ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и откртятпй 113035, Москва, Ж, Раугпская иаб., д. 4(5Подписное Загорская типография Упрполиграфиздата Мособлисполкома 3Результат: количество белка секрета, экстрагированного из придаточных желез раствором 1,28 М 1 хаС 1, составило 0,78 мкг на особь.П р и м е р 2. Экстракция полового секрета из придаточных желез некопулировавших самцов А. аедур 1 4-дневного возраста дистиллированной водой.Выделили 25 пар придаточных желез в растворе аедес, выделенные железы поместили в микропробирку с 25 - 30 мкл дистиллированной Бодь. Дальешая Оследовательность действий, как в примере 1, с использованием дистиллированной воды вме. сто 1,28 М 1 х 1 аС.Результат: количество белка секрета, экстрагировацного из придаточных желез дистиллированной водой, составило 0,53 мкг ца особь.П р и м ер 3. Экстракцця полового секрета из придаточных желез цекопулировавших самцов А. аедур 1 4-7 цевного возраста раствором аедес.Выделили 25 пар придаточных желез, выделенные железы поместили в микропробирку с 25 - 30 мкл раствора аедес. Дал- цейшая последовательность действий, как в примере 1, с использованием раствора аедес вместо 1,28 М хаС.Результат; количество белка секрета, изолированного из придаточных желез раствором аедес, составило 0,55 мкг на особь,4Количество белка полового секрета, экстрагировацного цз придаточных желез девственных самцов Асссз аедурц 4-дневного возраста различными средами, представлс цо в таблице.Предлагаемая среда для экстракции полового секрета из изолированных придаточны.; желез самцов насекомых обеспечивает по сравнению с существующими среда ми увеличение болес чем на 40% (по белку)выхода секрета, повышение точности, воспроизводимости и достоверности результатов, Использование данной среды делает возможным разработать метод количест венной оценки секреторцой активности придаточных желез, позволяет сократить число экспериментов и расход насекомых, необходимых для получения достоверных результатов, а таккс обеспечивает возмож- :0 ность расширения биохимических и токсикологических исследований ца изолированных половьх железах насекомых, что имеет важное значение при разработке методов борьбы с насекомыми и методов стацдартл зацци лабораторного культивирования цх,Формула изобретения Среда для экстракции половохо секрета 30 цз придаточных желез самцов комаровАедез аедур 11, содержацая хлористые соли щелочных металлов, о т л и ч а ю щ а я с я тем, что, с целью повышения выхода полового секрета, в качестве солей щелочных 35 металлов используют 1,27 - 1,29 М водныйраствор 1 х 1 аС 1. Источники информации,принятые во внимание при экспертизс 40 1, Р. Б. С 1 еп Ехрегеп 1 а, 1976, т. 32, 5, р. 549.