Способ получения препарата гонадотропинов из сыворотки жеребых кобыл “оваритропина”

ОПИСАНЙЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ Союз Советских Социалистических Республик(22) Заявлено 17,0276 (21)2324703/28-25 с присоединением заявки Мх(45) Лата опубликований описания 060778 А 61 К 37/38 Государственный комитетСовета Министров СССРпо делам изобретенийи открытий(72) Авторы изобретения И.Я.Чистяков, Н.Н.Михайлов и В,В,Амелина Всесоюзный ордена Ленина институт экспериментальной ветеринарии(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕПАРАТА ГОНАДОТРОПИНОВ ИЗ СЫВОРОТКИ ЖЕРЕБЫХ КОБЫЛ ОВАРИТРОПИНА Изобретение относится к способам получения концентрата гонадотропных гормонов, обладающих фолликулостимулирующим и лютеинизирующим действием, из сыворотки жеребых кобыл (СЖК) и 6 может быть использовано в животноводческой и ветеринарной практике с целью стимуляции половой функции и при эндокринных нарушениях у сельскохозяйственных животных. 10Известные в настоящее время произ" водственные способы получения гонадо" тропинов из СЖК основываются на методах фракционирования сывороточных (балластных) белков и последующего 16 отделения гормонов с помощью этилового спирта (1 .Недостатком известных способов является невысокая степень очистки гормонов. Активность получаемых такими яп способами препаратов, как правило, не превышает 80-100 м,е,/мг сухого вещества (м.е. - мышиная единица).Многократное переосаждение гормонов спиртом обеспечивает более высокуюстепень очистки гормонов иэ СЖК и получение препаратов с активностью в пределах 300-600 м.е./мг и выше. Однако усложнение схем очистки гормоновприводит к удорожанию препарата и ограничивает возможности его массового производства для применения в животноводческой и ветеринарной практике.Целью изобретения является упрощение процесса очистки н сокращение времени получения концентрата гонадотропных гормонов из СЖК при одновременном повышении степени очистки препарата и увеличении выхода гормонов по биологической активности,Цель достигается тем, что удаление балластных белков (общего белка) иэ СЖК осуществляют вначале 12-15-ным раствором риванола (2-этокси"6,9- диамино-акридин лактата), добавляемым в количестве 1 объема к 9 объемам СЖК. Выпавшие в осадок балластные белки от" деляют. Вторичное осаждение общего белка проводят ацетоном при значении рН 8,5-9,0, Охлажденный ацетон добавляют в количестве, равном 90"95 объема сыворотки, оставшегося после обработки ривонолом, Выделение концентрата гормонов проводят путем добавления к очищенной СЖК ацетона до концентрации 70-75 и выдерживания в течение 30-60 минут при комнатной температуре. По" лученный осадок отделяют, промывают спиртом и эфиром, растворяют в дистиллированной воде и лиофилизируют. Активность препарата 220 м.е./мг,619188исключение необходимости длительного осаждения СЖК ацетоном на холоду аПроверка аллергенных свойств препарата на морских свинках н реакции прямой пассивной анафилаксии показа" ла отсутствие анафилактических признакон при введении гормонов н количестне 1200 м.е. на одно животное,Экономический эффект предлагаеМого изобретения состоит н обеспечении возможности создания массового произнодстна концентрата гонадотропинон СЖК, характеризующегося более высокой степенью очистки от сынороточных белкон и пригодного для широкого использонания н животноводческой и нетеринарной практике, а также н снижении стоимости изготовления препарата на 15-20 по сраннению с иэнестным способом.Формула изобретенияСпособ полУчения препарата гонадотропинон из сыворотки жеребых кобыл,включающий осаждение балластных белков иэ сыворотки и последующее выделение из нее гонадотропинон, о т л вч а ю щ и й с я тем, что, с целью упрощения процесса и повышения ныходагормона, осаждение балластных белковпронодят путем обработки сывороткивначале 12-15-ным раствором ринанола, добавленным к сыворотке н соотношении 1:9, н течение 15-20 мин при,комнатной температуре, затем рН останшегося объема сыворотки донодят до8,5"9,0 и добавляют к ней охлаждеиныйацетон н количестве 90-95 по отношению к объему, после чего смесь ныдержинают н течение 30-60 мин при комнатной температуре а выделение гонадотропинон проводят при дальнейшемдонедении н сыноротке концентрацииацетона до 70-75 и ныдержинании смеси н течение 30-60 мин при комнатнойтемпературе.Источники инФормации , принятые новнимание при экспертизе:1. Авторское свидетельство 9296573,кл, А 61 К 35/24, 1971,Составитель Л.МураяТех е Э.фанта Ко ектоРеедакто Н А истраЗаказ, 4326/9 Тираж 703 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Иинистрон СССР по делам изобретений и открытий 113035 Москна ЖРа нская наб. 4 5 филиал ППП Патентф, г. Ужгород, ул, Проектная, 4