Микрофлуориметр

ОПИСАНИЕИЗОБРЕТЕН ИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ цц 574646 Сова Советских Социалистических(51) М, Кл.в С 01 Я 2 с присоединением заявк 3) Приоритет Государственнын комитет Совета Министров СССР по делам изобретенийи открытий 3) УДК 535.822(088,8) Опубликовано 30.09,77. Бюллетень М 3 Дата опубликования описания 05,10.77(72) Авторы изобретен Виноградова, В. оффе и Г В Папая И. Я. Барски 71) Заявител 4) МИКРОфЛУОРИМ Изобретение относится к ооласти технической физики, а именно к микроскопии, в частности к приборам для биологии и медицины, и может быть использовано для исследования процессов энергетики живых клеток, измерения количества веществ, составляющих клетки и ткани биологических объектов.Известны микроспектрофлуориметры, которые позволяют записывать спектры флуоресценции объекта при возбуждении лучами определенного спектрального диапазона и оценивать по этим спектрам интенсивность флуоресценции в максимумах излучения различных входящих в состав объекта веществ.Ближайшим из известных является микрофлуориметр, содержащий осветитель с источником света и коллектором, светофильтры, опак-иллюминатор, микроскоп и регистрирующую систему с двумя фотоумножителями, перед каждым из которых установлен запирающий светофильтр, соответствующий максимуму излучения одного из двух входящих в состав объекта флуоресцирующих веществ.Однако возбуждение флуоресценции этих веществ осуществляется лучами одного и того же спектрального диапазона, выделяемыми из излучения источника света светофильтром возбуждения, установленным в осветительной системе прибора. Таким образом, основным недостатком этого прибора при измерении всществ, спектры возбуждения которых не совпадают друг с другом, являются энергетические потери, так как оптимальное возбуждение флуоресценццц одного вещества не соот ветствует условиям оптимального возбуждения второго либо третьего вещества, входящих в состав излучаемого объекта.Целью изобретения является уменьшениеэнергетических потерь ц повышение точности 1 о измерений.Это достигается тем, что микрофлуориметрснабжен диском, установленным с возможностью вращения и содержащим попарно размещенные возбуждающие и запирающие свето фильтры, расстояния которых от оси вращения диска не равны друг другу, причем одна часть диска расположена между осветителем и опак-иллюминатором, а другая - между опак-иллюминатором и фотоприемником.На фцг. 1 представлена принципиальная оптическая схема предлагаемого микрофлуориметра; на фиг, 2 - вид по стрелке А на фцг. 1.Лцкрофлуорцмстр содержит осветитель систо ником 1 света и коллектором 2; возбуждающие светофильтры 3, установленные на диске 4; цнтерференционную светоделительную пластинку опак-пллюмцнатора 5; объектив б микроскопа; объект 7; тубусные линзы 8 микроскопа; зеркало 9 микроскопа; фото3метрическую диафрагму 10; систему 11 визуального наблюдения в микроскопе; запирающие светофильтры 12, установленные на диске 4; фотоумножитель 13; систему освещения в микроскопе в проходящем свете, состоящую из лампы 14 накаливания, коллектора 15, светофильтра 1 б, зеркала 17 и фазоконтрастного конденсатора 18; линзы 19 микроскопа, предназначенные для фокусировки с контактными объективами.Лучи определенного спектрального состава, выделяемые из излучения источника 1 света с помощью коллектора 2 и светофильтров 3, установленных по внутреннему диаметру диска 4, интерферснционной светоделительной пластинкой опак-плл 10 ыпнатора о и ооъективом 6 собираются на обьекте 7 и возбуждают его флуоресценцию. Изображение объекта в лучах флуорссценции объективом 6, линзамп 8, зеркалом 9 образуется в плоскости зеркальной фотометрической диафрагмы 10, выполненной в виде кошачьего глаза. Это изображение наблюдается с помощью оптической системы 11. Интенсивность флуоресценции участка изображения в пределах прозрачного места фотометрической диафрагмы измеряется в определенной области спектра, выделяемой запирающим светофильтром 12, установленным по наружному диаметру диска 4, с помощью фотоумножителя 13.Система освещения объекта снизу в проходящем свете применяется для выбора места препарата на его фокусировки перед измере 574666 нием. При измерении клеток и тканей целых органов животных вместо объектива б устанавливается контактный объектив и вместо линз 8 - система линз 19, состоящая из неподвижной отрицательной и перемещаемой вдоль оптической оси положительной линз. В этом случае наблюдение объекта перед фотометрированием осуществляется методом флуоресцентной микроскопии при освещении объ екта сверху через объектив,При вращении диска 4 с частотой 50 Гцпроизводится измерение интенсивности флуоресценции объекта в двух участках спектра при возбуждении этой флуоресценции соответ 1 з стиующими лучами,Формула изобретенияМикрофлуориметр для регистрации интенсивностей флуоресценции нескольких веществ, 20 содержащий осветитель с источником света иколлектором, светофильтры, опак-иллюминатор, микроскоп и регистрирующую систему с фотоприемником, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью уменьшения энергетических по 2 з терь и повышения точности измерений, онснабжен диском, установленным с возможностью вращения и содержащим попарно размещенные возбуждающие и запирающие светофильтры, расстояния которых от оси враще- ЗО ния диска не равны друг другу, причем одначасть диска расположена между осветителем и опак-иллюминатором, а другая - между опак-иллюминатором и фотоприемником,