Способ диспергирования тканей животных

ФРлемтнв-тех иичеюеам е аМЬ Со оз СоветскихСоциалистическихРеспублик(и) 568020 ОГ ИСАИЗОБРЕТЕН ИЯК АВТОРСКОМУ СВИДВПДЬСТВУ(51) М 1 й 33/16 присоедииенн явкиоаудврственный камнтетСаввтв Инннатрав СССРаа делам иэааретеннйи аткрытий(45) П,ата опубликования описания 15.08.7 2) Авторы изобретения А. Г. Маленков, В, И. Левентал и Е. А, Модянова тут по биологическимих соединении(71) Заявитель 54) СПОСОБ ДИСПЕРГИРОВАНИЯ ТКАНЕЙ гианейния межруетпол Научно-исследовательский испытаниям хим. исследованиям и касается способа дисп рования тканей животных,Известен способ диспвргирования тк животных путем механического растира образца пестиком гомогенизатора и по та полученных целых клеток ).1),Однако известный способ не обеспе ет точного определения силы сцепления ду клетками в ткани, так как не регул ся усилие разрушения ткани.С целью обеспечения точного определения силы сцепления между клетками в ткани по предлагаемому способу тканевый образец 5 фиксированным усилием продавливают через отверстие (или ряд отверстий) диаметром, не превышающим размер образца, но большим размера единичной клетки, и подсчитывают число выделившихся клеток, 20Способ осуществляют следующим образом,Сначала животное декапитируют, брюшнуюость вскрывают, печень . т тт ат 1 п отмывают от крови через Г. рог тст, Центральную долю печени извлекают, укладывают на 25 парафиновую подложку и цилиндрическим резцом вырезают образцы массой 5+ 0,5 мг,Образец ткани помещают в цилиндр шприца, ча. носик которого насаживают камеру скалиброванным отверстием, затем цилиндрзаполняют изотонической жидкостью,. в объеме 3.Ж 0,1 мг. Писпергирование проводит путем перемещения поршня шприца с постояннойскоростью специальным устройством,При этом жидкость, проходя через камеру, заклинивает отверстие тканью и продав.ливавт вго в приемник-стаканчик или пробирку, Усилие проиавливания регистрируют записыающим устройством, что тюзволявт получить количественную оценку прочности испытуемого образца ткани,Полученную в приемнике суспензию разбавляют изотоничвской жидкостью и просчитывают счетчиком микрочастиц количество целых и разрушенных клеток. Такую операцию проводят с образцом ткани, не подвергавшейся какому-либо воздействию (контрольный опыт) и подвергнутой обработке, например, путем введения биологически активного вещвстс568020 Число выделившихся цельи Число разрушенных клеклеток в 1 мл суспензии ток в 1 мл суспензии Количествоопытов 8900+120 650 1 80 4700+ 160 14600 + 280 Контроль Составитель С. МалютинаРедактор Л, Гончарова Техред А. Демьянова Корректор 11, Небола Заказ 2794/34 Тираж 1101 Подписное ОНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССГ по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д, 4/5Филиал ПГ 1 П "Патент", г. Ужгород, ул, Проектная, 4 зва, На основании полученных. данных (количество выделившихся целых клеток при одной и той же нагрузке) делают заключениеоб эффективности обработки,П р и м,е р, Для испытания берут образцы ткани (печень крыс), подвергнутые инкубации а бескальциевой изотонической среде,ослабляющей клеточные контакты ткани,для чего в раствор Хэнкса добавляют этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭНТА) для свя-,1 О 20Величина ошибки в предлагаемом способе 12-14%, а в известном 40-100%,Предлагаемый способ позволяет проводить испытание химических соединений по их действию на межклеточные контакты и может быть использован для испытания новых химических соединений на биологическую активность и отбора этих соединений перспективных в качестве противоопухлевых препаратов. 30Формула изобретенияСпособ дисперг ирования тканеи путем механического разрушения образца, о т 4зывания Са и контрольные образцы, под+квергавшиеся инкубаиии в растворе Хэнкса без добавления ЗДТА. для каждого опыта берут по 5 образцов. Инкубацию проводят в течение 1 ч, при 36 оС, После чего каждый образец ткани продавливают через калиброванное отверстие специального устройства, Затем полученную суспензию помещают в целлоскоп, где определяют число выделившихся целых клеток (см. табл.). л,и ча ющи й с я тем, что, с целью.точного определения силы сцепления междуклетками в ткани, тканевый образец фиксированным усилием продавливают через отверстие (или ряд отверстий) диаметром,не превышающим размер образца, но большимразмера единичной клетки, и подсчитываютчисло выделившихся клеток. Источники информации, принятые во внимание при экспертизе:1, "Битология 1968, 10, 9,1081,