Способ серологического диагностированиябактерий группы bacilius thuringiensisiimfpisvrrvnpjr-i-“-ч.: . f, iiii ti, l: iifoteha12

378412 ОП ИСАНИЕИЗОБРЕТЕН ИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Союз Советских Социалистических РеспубликЗависимое от авт. свидетельства-М. Кл. С 121 104 Заявлено 04 Л.1971 ( 1662012(30-15)с присоединением заявки-Приоритет -Опубликовано 18 Л 7,1973, Бюллетень19Дата опубликования описания 18 Л 1.1973 Комитет по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССРУДК 63:576.8088.8) Авторыизобретения Е. Н. Михайлов, Г, А, Плужников и К. Е. Акоева Заявитель Среднеазиатский научно-исследовательский институт фитопатологии СПОСОБ СЕРОДОГИЧЕСКОГО ДИАГНОСТИРОВАНИЯ 1 -".С,".; - ,;Р;,1 дгБАКТЕРИЙ ГРУППЫ ВасПцз йигпрепязу Тт=йд Изобретение относится к области микробиологии и может найти применение при идентификации и лифференциальной диапностике энтомопатогенных кристаллообразующих бакте 1 рий, используемых при промы 1 шленном производстве бактериальных инсекпицидов,В настоящее время серологическую диагностику;вариететов бактерий группы Йцг 1 препяз проводят при помощи реакции флагеллярной агглютинацс.и, основанной на методах, разработанных фрасщузскими учеными Баржак и Бонфуа. Эта реакция заключается в воздействии на оуопензию исследуемых бактерий агглютинирующими моносьтворотками к Н-антигену, каждая из которых имеет специфичность к огдельному вариетету.Получение моносывороток производят раздельной иммунизацией кроликов многократными прогрессирующими дозами суспензый бактерий каждопо вариетета группы Вас, Йцппрепяз и последующю п 1 риданием сыворопкам селекиивных свойств. Селективные свойства сывороткам придают методом насыщения - осаждением общих ангител бактеРиальной суспензией других вариететов. Бактериальные суопензии (суспензии Н) штаммов каждого вариетета получают обработкой их формалином, т. е. разрушением осиатических групповых ангигенов. Для получения качествениных результатов реакции апглютинацип необходимым условием в получении бактериальных суапензий является предварительное селекционирование жульгур по гьризнаку большой мобпльносги в пробдрках Кредкп. Однако этим способом диагносгики невозможно дифференцировать все узкие таксономические группы Вас 111 цз йцг препяз по их иммунологической опецифичносги в связи с использованпем флагеллярной моносыворотки, голученной под воздейсивием ограниченного состава антигенных факторов: исследователи де Баржак и Бонфуа отнесли вариететы Вас.йцт 1 препв 1 з аг с 1 епдго 1 ппцз и Вас. Йцг 1 п репз 1 з таг. зотто к одному и тому же четвертому сиротину, а вариететы Вас. Йцппрепяз аг зцЫох 1 сцз и Вас 111 цз йцппрепз 1 з аг епФогпос 1 с 1 цв - к шесгому серотипу, несмотря 20на то, что покультурально-биохимическим признак 1 а,м они огнесены эгищи учеными к самостоятельньсм вариететам. Кроме тото, этим способом невозможно проводить экспрессреакции на предметном стекле ввиду образования в популяции бактерий К-форм, приводящих к спонтанной агглютинации, Проведение диагностической реакции связано с большими затратами времени на селекционирование исследуемой культуры по признаку боль- ЗО шеи моопчъностп378412 Предмет изобретения Составитель М. ДранишниковТехред Т. Миронова Корректор В, Жолудева Редактор Т. Шагова Заказ 338/1075 Изд. М 478 Ти:раж 467 ПодписноеЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий прп Совете Мшшстров СССМосква. Ж, Раушская наб., д, 4/5 Тип. Харьк, фил. пред. Патент Цель изобретения - дифференциация бактерий по более узким теысономичвским признакам.Это достигается получвнивм првципитиру 1 ощих мсносьввсроток к отдельным вариететам Вас 1 цз 11 цг 1 препз 1 з. Преципитирующие моносы 1 всрозки получают удалением гетерологичвских антител из нативных сывороток кроликов, гипернммунизированных антигенамн бактерий типовых вариететэв, а антигены получают ультразвуковой двзинтипрацией клеток,Применение в диатностике прецяпитирующих моносывороток позволяет использовать реекпню двойной диффузии в геле, благодаря чему результаты становятся известны через 1 - 2 дня и имеют четко выражвнные характеристихи, локументируемые в виде фопопрафий и зарисовок или могут сохраняться в виде постоянного препарата. применение в диагностнке метода Оухтерлони, особенно при использовании иамуноэлвктрофорвза, позволяет получить информацию об антигенной структуре вариететов исследуемых бактерий, а применение красителей и гистохимичео 1 сих методов анализа - химическую природу отдельных компонентов антигена.Используя предлагаемый способ диагностики с помощью преципитируюших моносывороток, удалось подтвердить таксономическую новизну группы диких штаммов и отнести их к новому вариетету аз 1 ае - тес 11 ае зр.поча, которые ранее идентифицировались с 5 культурой Вас 11 цз йцг 1 препз 1 з чаг Йцгит 1 епз 1 з Вег 1 шег,10 Способ серологического диагностированиябактерий группы Вас 11 цз йцппрепзз, включающий воздействие на их антигены моносыворотками, имеющими специфичность к отдельным вариететам и последующую регист рацию результатов, отличающийся тем, что, сцелью дифференциации бактерий по более узким таксономическим группам, в качестве моносывороток берут преципитирующие сыворотки, полученные гипериммунизацией лабо раторных животных, в частности кроликов, антигенами бактерий типового штамма, с последующим удалением из сыворотки гетерологи.ческих антител путем истощения антигенамп других вариететов, а антигены исследуемых 25 бактерий и типовых штаммов готовят посредством выращивания культур обычными приемами с дальнейшим разрушением клеток, например, ультразвуком,