Способ получения 1ба-оксистероидов

О П И С А Н И Е 23177ИЗОБРЕТЕНИЯ Сокгз Советских Социалистических РеспубликК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ исимое от а свидетельст66 ( 109аявки ЛЪ аявлено 11 1/111 3/31-16) л. ЗОВ, 2/04 301, 2/1 с присоединением 1 риорит 1 ПК А 61 с А 611 с УДК 57.17:577.151:663Комитет по делам зобретений и открытий при Совете Министров СССРликовано 28.Х 1.1968. Бюллетень М 3 Дата опубликования описания 6 ч.19 АвторыизобретенияЗаявители. М. Коган, И, М, Волкова, И, В, Торгов и Г. К. Скрябин Институт химии природных соединений АН СССР и Институт микробиологии АН СССРПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ 16 а-ОКСИСТЕРОИД Известны способы получения 16-а-оксистероидов путем ферментации с актинохгицетахги,Предлагаемый способ позволяет расши. рить ассортимент микроорганизмов, использу. емых для получения 16 а-оксистероидов. В качестве таких микроорганизмов рекомендуются, в частности штаммы Ас 1. саргае 206 1.А, 1 Ч., Ас 1. з 1 гер 1 огпусп 1 (Кгапзсу егпгпепс 1 %КЯ) 1 сгазз Ас 1. Пачцз 3369, Ас 1. чепекцеае 3624, Ас 1, 1 цчочгс 11 з 607, Ас 1. дгзецз чаг. рцгрцгезсепз, Ас 1. десапепзз 4880 АТСС.Стероид ферментируют с указанными культурами, выращенными на питательной среде, содержащей источники углерода, азота и минеральные соли. По окончании ферментации продукты реакции извлекают несмешивающимися с водой растворителями и выделяют стероид хроматографированием на окиси алюминия,П р и м е р 1. В две колбы, содержащие по 100 мл питательной среды (2% глюкозы, 1% кукурузного экстракта, 0,5% поваренной соли и 0,5% карбоната кальция в водопроводной воде,рН 7, вносят,по 10 лгл 72-час, культуры Ас(. дес 1 апепз 1 з 4880 АТСС, выращенной на гитательной среде, содеркащей 0,2% сульфата аммония, 0,1% сульфата магния, 0,1% поваренной соли, О,1 % карбоната кальция, 0,1 % фосфата калия и 1% крахмала, Культуру выращивают 24 час на круговой качалке(200 об/лгин) при 28 С, затем вносят в каждую колбу раствор 15 лгг прогестерона в 0,5 лгл этилового спирта и фергментируют,при тех же условиях 66 час. По окончании ферментации мицелий отфильтровывают, промывают водоц и экстрагируют фильтрат 4 раза по 50 лг.г хлороформа. Экстракт упаривают в вакууме до 50 лгл, сушат над безводным сульфатом магния и выпаривают в вакууме досуха. Остаток 10 растворяют в 0,5 лгл хлористого метилена итонкослойным препаративным хроматографированием на нейтральной окиси алюминия (пластинка ЗА 8, толщина слоя 1 лья) выделяют 19 лгг 16 а-оксипрогестерона, который 15 очищают двукратной перекристаллизацпей изацетона.П р и м е р 2. Так же, как это описано впримере 1, осуществляют ферментацию 30 лгг прогестерона с культурами Ас 1. саргае 1.А, г.20 206, Ас 1, згер 1 огпусп (Кгапз 1 су еп 1 гпепсЮК 8) 1 сгазз, Ас 1. Пачцз 3369 и Ас 1. чепекце 1 ае 3624 и после хроматографирования на окиси алюминия получают соответственно 15, 22, 16 и 10,иг 16 а-оксипрогестерона.25 Пример 3. В 10 колб, содержащих по50 мл питательной среды с кукурузным экстрактом, как это описано в примере 1, вносят по 5 лгл 48-час культуры Ас 1, 1 ц 1 чолгкЪ 607, выращенной на той же питательной среде.30 Культуру выращивают 24 час на круговой каЗаказ 341/11 Тираж 530 Подписное ЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР Москва, Центр, пр. Серова, д. 4Типография, пр, Сапунова, 2 3чалке при 28 С, затем вносят в каждую колбу раствор 10 мг,прогестерона в 0,5 мл этилового спирта и ферментируют в тех же условиях 72 час. По окончании ферментации культуральную жидкость экстрагируют 4,раза по 100 мл хлороформа. Экстракт концентрируют в вакууме до 50 мл, сушат над безводным сульфатом магния и выпаривают в вакууме досуха, Остаток растворяют,в 1 мл хлористого метилена и препаративным хроматографированием в тонком слое окиси алюминия (пластинка 20 Х 20, толщина слоя 1,2 мм) выделяют 31 мг 16 а-оксипрогестерона с т. пл. 220 - 224 С.П р и м е р 4, Ферментацию 100 мг прогестерона с культурой Ас 1. дг 1 зсцз чаг, рцгрцгезсепз проводят, как это описано в примере 3, и после хроматографирования на окиси алюминия получают 18 мг 16 а-,оксипрогестерона,5 Предмет изобретенияСпособ получения 16 а-оксистероидов путемферментации с актиномицетами, отличающийся тем, что с целью расширения ассортимента 10 микроорганизмов, осуществляющих 16 а-гидроксилирование, используют штаммы Ас 1, саргае 206 Л.А,%., Ас 1. з 1 гер 1 отус 1 п 1 3369 (Кга 1 пз 1 у епппепй ЮКЗ) багаза., Ас 1. Пачцз 3369, Ас 1. чепекце 1 ае 3624, Ас 1, 1 ц 1 чоч 1 г 115 йз 607, Ас 1. дпзепз чаг. рцгрцгезсепз, Ас 1,дег 1 ап 1 епз 1 з 4880 АТСС.