193419

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕ 1 ЕНИЯ Союз Советских Социалистических РеспубликЗависимое от авт. свидетельства МЗаявлено 29,Х,1965 ( 1035050/28-13) л. 6 а, 22/О инением заявки МП 1 С 121 иорите Комитет по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССРОпубликовано 13.111.1967, Бюллетень МДата опубликования описания 24 А,1967 УДЫ 663.18:576.8,0Заявит ский и шленн 11 ОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ АМИЛАЗЬ 1 ИЗ ГЛУБИННОЙ КУЛЬТУРЬ МИ КРОО Р ГАН ИЗМОВЭлюцию амилазы сле вором углекислого натр нокислого кальция. Это повышению эффективноСпособ включает мод последующим выделени дует провия с добаотличие ссти процеификациюем амилазь одить раствкой уксуспособствуетсса,хмалаглубин Известен способ выделения амилазы из глубинной культуры микроорганизмов, например бактерий, путем высаливания амилазы из культуральной жидкости сульфатом аммония с последующей адсорбцией амилазы на крахмале, вводимом в культуральную жидкость, и отделением комплекса амилаза - крахмал о последней, например фильтрацией.Предложено крахмал предварительно модифицировать и вводить в культуральную жидкость в три приема, причем спустя некоторое время после каждого приема введения крахмала отделять комплекс амилаза - крахмал от культуральной жидкости. 1(ультуральную жидкость перед введением модифицированного крахмала в нее упаривать.Следует вводить в каждый прием 0,25% модифицированного крахмала (вес/объем), Модификацию последнего целесообразно проводить путем нагревания его в тонком слое (10 - 15 лтл) при 120=С, выдержки при этой температуре в течение 50 - 60 лтин и последуюгцей сушки при 50 С. нои культуры микроорганизмов и заключается в следующем.Крахмал тонким слоем (10 - 15 люлю) помещают в автоклав, где при 120 С выдержива 5 ют в течение 50 - 60 мин. Затем его сушат при50=С, измельчают и просеивают через сито сотверстиями 0,12 - 0,15 лтлт.После этого культуральпую жидкость бактериальной амнлазы (после отделения мице 1 О лпя) упаривают в вакуум-аппарате прн 30"С,направляют в соорпнк, куда добавляют сернокислый аммоний в количестве 20%, Растворохлаждают до 0 - плюс 2=С, после чего внего итосят модифицированный крахмал в15 количестве 0,25% и выдерживают в течение1 час периодически размешивая, затем раствор центрнсругнруют, а сорбент (крахмал) ссорбнрованнои амнлазой направляют насушку прн температуре не выше 50-С.2 О Таким же образом проводят последующую(вторуо и третью) сорбцию амилазы, расходуя каждый раз крахмала в количестве 0,25%(вес,1 объем),Полученный комплекс амилазы - крахмалможет быть в дальнейшем стандартизованкрахмалом,По такому способу можно получать каккомплекс амилаза - крахмал, так и высокоочищенный препарат путем предварительнойЗО элюции амилазы раствором углекислого нат193419 П рсдмет изобретени я Составитель М. И. АндрееваТехред Л. Бриккер Корректоры. О. Б, Тюринаи А, М. Смак Редактор В. ф. Чулкова Заказ 1074/14 1 ираж 5 Зо ПодписноеЦ 11 ИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССРМосква, Центр, пр. Серова, д, 4 Типография, пр. Сапуноьа, 2 рия с добавкой уксуснокнслого кальция и последуюшим осаждением ее спиртом. 1. Способ выделения амилазы из глубинной культуры микроорганизмов, например бактерии, путем высаливания амилазы из культу- ральной жидкости, сульфатом аммония, адсорбции ее на крахмале, вводимом в культуральную жидкость, отделения комплекса амилаза - крахмал от кульгуральной жидкости одним из известных способов, например фильтрацией, с последующей элюцией амилазы, отличающийся тем, что, с целью повыше ния эффективности процесса, крахмал предварительно модифицируют и вводят в культуральную жидкость в три приема с последующим отделением комплекса амилаза - крахмал От культуральной жидкости после каждО- го приема введения крахмала, а последнюю перед введением модифицированного крахма ла упаривают.2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что вкаждый прием вводят 0,25 омодифицированного крахмала.3. Способ по п, 1, от.гичающийся тем, что 10 модификацию крахмала проводят путем нагревания его в тонком слое (10 - 15 лм) при 120-С выдержки при этой температуре в течение 50 - 60 ягин и последующей сушки при 50 С.15 4. Способ по п, 1, отличающийся тем, чтоэлюцию амилазы проводят раствором углекислого натрия с добавкой уксуснокислого кальция,