Способ приготовления гистологических пленочных препаратов, расслоенных на пластины

(19) я)5 А 61 В 10/ ЕТЕ СТОЛОРАТОВ,ный раствор 6,5-7,0 до пр цвета.Пример животное, Кон ли полоски фа правленном плотном карт растворе ней ние 75 дн (еже той же концен тное бра- расно ечеГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИПРИ ГКНТ СССР ИСАНИЕ ИЗОБ АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ(56) Куприянов В.В,. Пути микроциркуляции,Кишинев, 1969, с.10-16. Изобретение относится к медицине, а именно к гистологии и анатомии, и может быть использовано для изучения морфологических изменений, возникающих в пленочных препаратах, при моделировании различных заболеваний на животных, ведущих к утолщению оболочек (пленок) органов,Целью изобретения является получение максимального выхода высокой информативности пленочных препаратов с одновременным выявлением сосудов, нервов и соединительнотканного состава,а также сокращение времени имп регнации.Предлагаемый способ реализуют следующим образом,Свежие, тотальные полоски фасций, взятые вдоль оси голени, в расплавленном виде закрепляют на плотном картоне и фиксируют от 14 сут до 1 года в 10=,ь-ном растворе нейтрального формалина (рН 7,3-7,5), приготовленного на отстойной воде промывают в проточной воде 6-12 час и ополаскивают в дистиллированной воде, промокают фильтровальной бумагой и оставляют в 80 спирте на 25-30 мин, Ополаскивают (2-3 с)(54) СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ГИ ГИЧЕСКИХ ПЛЕНОЧНЫХ ПРЕПА РАССЛОЕННЫХ НА ПЛАСТИНЫ(57) Изобретение относится к способам приготовления пленочных препаратов. С целью одновременного выявления сосудов, нервов и соединительнотканного состава, импрегнацию осуществляют в 23-257 ь-ном растворе азотнокислого серебра при 37-38 С в течение 30-35 мин, проводят через аммиачное серебро с восстановлением в 0,5-1-ном растворе кислого формалина. дистиллированной водой, слегка осушают фильтровальной бумагой, Помещают в свежеприготовленный раствор 23-25-ного раствора аэотнокислого серебра при 37- 38 С в термостате на 30-35 мин в закрытых стаканчиках (бюксах). Ополаскивают отстойной (кипяченой, остуженной до комнатной температуры) водой, проводят каждую пластину отдельно через 5 стаканчиков 2 ф(,- ного раствора формалина (рН 7,3-7,5), Ополаскивают 0,5-1 мин дистиллированной водой, слегка осушают фильтровальной бумагой и погружают в аммиачное серебро (приготовленное перед его применением) на 3-4 мин, затем проводят через 0,5-1 ф,- кислого формалина при рН иобретения коричневатого 1. Собака М 8312 (Интак троль). После эвтаназии сций вдоль оси голени, в состоянии закрепляли оне, фиксировали в 10%- рального формалина в т месячно меняя формалин трации), промывали в тече)3 Заказ 2950 Тираж 428 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул,Гагарина, 101 12 ч в проточной воде и расслаивали на пластины, толщиной не более 100 мкм, Затем промывали в дистиллированной воде 25 мин, промокали фильтровальной бумагой, оставляли в 80 спирте на 35 мин. После этого быстро проводили через дистиллированную воду (2-3 с), слегка осушали фильтровальной бумагой и помещали в 25-ный раствор аэотнокислого серебра при 38 С в термостате на 30 мин в закрытых стаканчиках (бюксах). Пластины преобретали желтовато- бежевый оттенок. Ополаскивали в отстойной воде (кипяченой, остуженной до комнатной температуры), проводили через 5 стаканчиков 27)-ного раствора формалина (рН 7,3-7,5), ополаскивали дистиллированной водой 0,5 мин, слегка осушали фильтровальной бумагой и погружали в аммиачное серебро на 3 мин (готовят перед применением), Проводили через 0,5-1-ный раствор кислого формалина (рН 6,5-7,0), до приобретения пластинами коричневого оттенка.Для прекращения импрегнации пластины переносили на 10 мин е аммиачную воду, приготовленную на дистиллированной воде в соотношении 70; 80; 96(1); 96(11);100 О, Просветляли в толуоле, заключали в канадский бальзам, тщательно расправляли каждую пластину, плотно прижимая к стеклу. При микроскопии выявляется сосудистое русло, пучки волокон основного слоя и сопровождающие нервные волоконца.П р и м е р 2, Методика выполнения способа строго соответствует приведенному. Отличие состояло лишь в том, что используют 236-ный раствор аэотнокислого серебра при температуре 37 С. При микроскопическом исследовании одновременно 5 выявляют сосуды микроциркулярного русла, соединительно тканые структуры и нервные волокна,П р и м е р 3, При соблюдении всехусловий предварительной подготовки при мерое 1 и 2 при использовании 26-ногоазотнокислого серебра волокна основного слоя импрегнируются неравномерно, сосуды с явной передоэировкой окраски от темнокоричневого до черного цвета.15 П р и м е р 4, Снижение концентрациисеребра в растворе до 22 с сохранением других параметров приводило к неравномерной импрегнации звеньев сосудистого русла и слабому выявлению пучков волокон 20 основного слоя. Формула изобретения Способ приготовления гистологических пленочных препаратов, расслоенных 25 на пластины, путем фиксации формалином.промывки в воде и окраски в растворе азотнокислого серебра, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью одновременного выявления сосудов нервов и соединительнотканно го состава, импрегнацию осуществляют в23-25(,-ном растворе азотнокислого серебра при 37-38 С в течение 30-35 мин, проводят через аммиачное серебро с восстановлением в 0,5-1-ном растворе кисло го формалина,