Способ приготовления препарата розеткообразующих клеток

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 1 й 33/5 Н О БРЕТЕНИЯ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ ный медицински мунология, 198 ЛЕНИЯ ПРЕПАРАЩИХ КЛЕТОК тся к медицине, м методам пригомунокомпетентны ия является повы медицине, в тодам приго- омпетентных ение качестного распреЙ дующим о ва раствораый глицери м спиртом ельно к 1 ч, добавляют 4 ем 5 ч,96 авляютшива ют ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР(56) Тущин И,С. и др, ИМ 5, 85 - 87,(54) СПОСОБ ПРИГОТОВ ТА РОЗЕТКООБРАЗУЮ (57) Изобретение относ частности к лабораторн товления препаратов им клеток. Целью изобрете Изобретение относится кчастности к лабораторным мтовления препаратов иммуноклеток,Цель изобретения - повышва препарата путем равномерделения клеток на стекле.Способ осуществляется слеразом.Предварительно готовят дРаствор М 1, Динамитнсмешивают с 98;-ным этиловьсоотношении 1:2,Раствор В 2, Последоватполивинилацетатной эмульсиич. дистиллированной воды, затного этилового спирта.К 4 ч. раствора М 1 прибраствора М 2 и хорошо перем шение качества препарата, Цель достигается за счет применения смеси, состоящей из глицерина, этилового спирта, поливинилацетата и воды в соотношении 4:16:1:4 соответственно. Для этого готовят раствор глицерина и 96-ного спирта в соотношении 1:2. Затем отдельно готовят второй раствор, содержащий 1 ч, поливинилацетатной эмульсии, 4 ч, дистиллированной воды и 5 ч, 96 О-ного спирта, К 4 ч, первого раствора добавляют 1 ч,второго раствора и хорошо перемешивают, Приготовленную смесь в виде тонкого слоя наносят на чистое предметное стекло, после чего делают мазок. Повышается качество препарата, так какмазок распределяется по поверхности стекла очень равномерно,тем взбалтывания, Приготовленную смесь в виде тонкого слоя наносят на чистое предметное стекло, после чего делают мазок,Пример. К 0,1 мл взвеси лимфоцитов добавляют 0,1.мл 0,5 (, взвеси эритроцитов и полученную взвесь осаждают центрифугированием в течение 5 мин при 200 д. Осадок фиксируют 0,05 мл 0,5 глютаральдегида при комнатной температуре в течение 20 мин. Действие глютаральдегида прекращают добавлением 1 мл дистиллированной воды и осаждают взвесь центрифугированием при 2009 в течение 5 мин. Супернатант удаляют пастеровской пипеткой, а осадок осторожно ресуспендируют в 2 - 3 каплях оставшегося в пробирке супернатанта.Полученную взвесь используют для приготовления препарата розеткообразующих клеток: на сухое чистое протертое предметное стек1649441 Составитель Ю, ВасильеваРедактор С, Лисина Техред М.Моргентал Корректор Т, Малец Заказ 1519 Тираж 416 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 ло стеклянной палочкой наносят каплю приготовленной смеси в виде пятна размером 5 - 8 мм и растирают ее равномерно по поверхности ватным или марлевым тампоном до исчезновения следов жидкости. После этой операции стекло должно быть чистым и сухим. На подготовленную поверхность выливают полученную ранее клеточную смесь, легким покачиванием равномерно распределяют ее по всей необходимой поверхности стекла и дают просохнуть, Фиксацию и окраску производят по общепринятым методикам, например по Романовскому,Предлагаемый способ обеспечивает высокое качество препарата, так как мазок распределяется на поверхности стекла очень равномерно даже при исключении тщательного процесса обезжиривания стекол, например с помощью спиртозфирной смеси Никифорова или с помощью двухромовокислого калия и серной кислоты, исключается большой расход проточной воды.В момент фиксирования препарата в мета ноле клеточные элементы прочно удерживаются на поверхности стекла и хорошо прокрашиваются. Формула изобретения 10 Способ приготовления препарата розеткообразующих клеток, включающий нанесение суспензии клеток на стекло с последующей их фиксацией, о т л и ч а ющ и й с я тем, что, с целью повышения 15 качества препарата за счет равномерногораспределения клеток, перед нанесением суспенэии клеток стекло обрабатывают смесью, состоящей из глицерина, этилового спирта, поливинилацетата и воды в соотно шении 4:16;1;4.