Способ определения концентрации жизнеспособных спор бактерий bacillus тнuringiеnsis в концентрате, содержащем сульфат алюминия

СОЮЗ СОВЕТСНИСОЦИД ЛИСТ ИЧРЕСПУБЛИН 9) 111) 2 О 1/02 ОПИСАНИЕ ИЭОБРЕТК А 8 ТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ г(21) (22) (46) (71) им.А. ообменл с.23.М.: Изобретен биологическо быть использ осится к микроьшленности и может рля количественног пособных микрооре после концентрипровано определени ганизмов в омлс ОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЬПИЯМПРИ ГКНТ СССР 4377555/1315,02.8823.091. Бюл, " 3Институт тепло- и млссВ.Лыкова(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОНПЕНТРАЦИИЖИЗНЕСПОСОБНЫХ СПОР БАКТЕРИИ ВАСШЛБтицкпкдкыиБ В КОННРнтРАте, солеРЖА)ОЕМ СУЛЬФАТ АЛЗОМИНИЯ(57) Изобретение относится к микробиологической промьш)ленности и может рования ее методом коагуляции с применением электролитов.Бель изобретения - получение достоверных результатов количественного анализа жизнеспособных микроорганизмовСпособ заключается в том, что микроорганизмы дважды отмывают в физиологическом растворе путем периодиче" ского центрифугирования и ресуспеидирования в физиологическом растворе до стабилизации рН раствора в области 6,0-6,5. быть использован для количественного определения жизнеспособных микроорганизмов в биомассе после концентрирования ее методом колгуляции с применением электролитов. Целью изоб ретения является получение достоверных результатов количественного анализа жизнеспособных микроорганизмов. Способ элключлется в том, что микроорглниэмы дважды отмывают в физиологическом растворе путом периодическо го центрифугировлния и ресуспендирования в физиологическом растворе до стабилизации рН раствора в области 6,0-6,5Способ позволяет получить учет жизнеспособных микроорглнизмоп после коагуляпии биомассы практически 007, и достонер)1 о оценить эффективность процесса колгуляции с применением электролитов. 1 тлбл. Проводят определение концентрации жизнеспособных спор в сухом концентрате дендроблциллинл (культура - продуцент Вас 11 цэ СЬцг 1 пдепвв )втамм 49-8), полученном з результате распылительной сушки скоагулированной культурлльной жидкости.Колгуляцию производят сульфатом А 1, концентрация электролита состлвляе". 1 Х от объема биомассы. Определение производят следую.им образом.Навеску в 1 г суспенрируют в 100 мл стерильной воры, гомогенизируют суспензию на микроизмельчителе и по стандартной методике (метод последовательных разведений) осуществляют анализ. Высев пробы производят иа твердую агариэованную среду.1622399 Формула и э о б р е т е н и я Ътрискодиой 2-а отаека рНпослкокгула3 ии титрпослкоагу 1 итр рН Нико 1 итр104 кпу 104 ил/ил сус- лации,пиии, 1 О 1 кл/ 1 О кл(ил( рн )З ггэ ЗЗ) 2911 бг 196 574 26 Э 206 267 аг 42 12551,6 24747,4 19536,8 137ао,з 11857,5 38733,8 17657 17634,5 15366 342 6,4 105 6,5 102 6,5 99 6,5 98 6,4 107 6,4 102 6,5 105 6,6 98 6,5 92 6,4 97 235 ЗА 5 289 179 209 583 275 г 18 246 ао) 6,1 95,66,0 89,66,1 75,46,5 1076,4 1046,1 85,45,8 79,8б а 1 о 86,3 101б,г 9 а;5 556 гз 5,3 73 302 5,2 6) 254 5,4 75,2 196 4,9 60,2 203 5,2 67,5 490 51 67 210 5 5 85 4 223 5,2 57 271 5,3 81 398 4,04,1 3,9 а, 4,0 4,2 3,9 4,3 А,О 4,2 94 174 1 З 8 68 )9 ЭЭО 89 118 92 278 Составитель П.Иванов Техред Л,Олийнык Корректор Редактор Н.Яцола Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раущская наб., д. 4/5Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина,101 Параллельно проводят анализ этого же концентрата по предлагаемому способу. В этом случае навеску в 1 г суспендируют в 100 мл физиологического раствора и полученную суспензию гомогенизируют на микроизмельчителе в течение 5 мин. Затем суспензию центрифугируют 5 мин при 1000 р, фугат сливают и добавляют свежий физиологический раст вор до первоначального объема. Описанную операцию отмывки спор микроорганизмов повторяют до тех пор, пока рН раствора не стабилизируется в области 6,0-6,5. Результаты опыта приведены 15 в таблице.Анализ данных, приведенных в таблице, показывает, что одна отмывка, как правило, не дает окончательного положительного результата. В отдель ныл случаях требуется три раза промывать скоагулироваиную биомассу, но в основном достаточно провести двукратную промывку физиологическим раствором, чтобы получить достовер ный результат. Таким образом, предлагаемый способ позволяет достоверно оценить эффективность процесса коагуляции с применением электролитов. Способ определения концентрации жизнеспособных спор бактерий Вас 11- 1 цз йЬцггпВ 1 епвга в концентрате, содержащем сульфат алюминия, предусматривающий отбор пробы, приготовление суспензии, гомогениэацию, вы сев на твердую питательную среду с последующйм подсчетом колоний, о тл и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повьеения достоверности результатов, суспензию пробы готовят на физиологическом растворе, сульфат алюминия удаляют многократным центрифугнрованием и ресуспендированием осадка физиологическим раствором до получения суспенэии с рН 6,0-6,5.