159260
Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Номер патента: 159260
Текст
Класс А 611; 301 т, 14 М 159260 СССР ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ,Подписная група Л 189 3, И. Галунина и Л. М. Шефтель СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ ДИФТЕРИЙНОГО ТОКСИНА ШИКАЗаявлено 20 апреля 1962 г. за М 77-1766,31-16 в Комитет по делам нзооретений и открытий ири Совете Чинистров СССР Опубликовано в Бюллетене изобретенчй и говарнык знаков М 24 за 1963 г.Известные способы определения активности дифтсригиюго токсина по его цитотоксическо 1 у действию на 1 лльтуру леток недостаточно точны и требуют весьма длительного времени дгя осуществления.По описываемому способу, с целью ускорения и повышения точности исследования, исследуемый токсин вносят в культуру фибробластов из эмбриональной ткани человека,Культуру готовят по общепринятой методике, применяемой при вирусологических исследованияЭмбриональную ткань человека измельчают, промывают пасгвором Хснкса с антибиотиками и оставляют на один день прн смпературс 4 - 8 С в питательной среде с антибиотиками. На слезуогц лень ткань промываот 2 раза фосфатным буферным раствором, а затем подвергают панкреатизации прн комнатной температуре 0,2 в,в ныч раствором панкреатина в фосфатном буфеоном растворе. От еливпнеся клетки через каждые 10 ин удаляют в центрифужные пробирки и центрифугируют при 500 об/лин в течение 20 лсин. Осадок суспендиру от в питательной среде из расчета 600000 клеток на 1.ч, . Затем в пробирку вносят 1 л.г клеточной взвеси в питательной среде, состоящей из 850/а раствора Хенкса, 10 а/в бычьей сыворотки и 5 в 7 в аминопептида. На каждый миллиметр среды вводят по 100 единиц пенициллина. Клетки культивируют в стационарном положении при 37"С. Однослойный пласт клеток получают на второй или третий день выращивания.После заражения культуры фибробластов токсины,.нк 1,1;.фтерийпым токсином) циготоксический эффект проявляется сначала в округлении клеток, затем в разрушении клеточного пласт и, пакон ц, в по,.шой дегенерации ткани и отделении ее от стенки пробирки, Срав Ло 159260нительную активность различных партий токсинов определяют по интенсивности дегенерации за определенный промежуток времени. При достаточной активности токсина результаты опыта можно наблюдать уже через 3 час после начала его проведения. В то же время при определении активности токсина Шика, например, на морских свинках некроз кожи наблюдается лишь через 48 час после внутрикожного введения, При значительной чувствительности предлагаемый способ определения активности дифтерийного токсина, характеризуется также стандартностью, поскольку исключается такой нежелательный фактор, как индивидуальная чувствительность животных. Применение большого количества пробирок с культурой ткани для каждой дозы испытуемого токсина позволяет с наибольшей статистической достоверностью оценивать активность различных серий токсина.Предлагаемый способ весьма прост, экономичен и обладает большой чувствительностью, что позволяет с успехом исползовать еео в лабораториях, в которых изучаются свойства диф 1 ерий 1 ного токсина.Предмет изооретенияСпособ определения активности дифтерийного токсина Шика по его цитотоксическому действию на культуру клеток, о т л и ч а ю щ и йся тем, что, с целью ускорения и повышения точности исследования, вносят исследуемый токсин в культуру фибробластов пз эмбриональной ткани человека.Редактор Л. И. Колыбина Техред А. А, Камышникова Корректор Р. Т. КелембегГ 1 одп. к печ. 17/Х 11 - 63 г, формат бум. 70)(108/1 в Объем 0,18 изд. л,Заказ 3048/10 Тираж 400 Цена 4 коп,ЦНИИПИ Государственного комитета по делам изобретений и открытий СССРМосква, Центр, пр. Серова, д. 4.Типография, пр. Сапунова, 2.
СмотретьЗаявка
774766
МПК / Метки
МПК: C12Q 1/18
Метки: 159260
Опубликовано: 01.01.1963
Код ссылки
<a href="https://patents.su/2-159260-159260.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">159260</a>