Способ идентификации гаплоидов кукурузы

.":, Ф,Р-. РЕСПУБЛИН . 4 А 01 Н 1/ ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ ВТОРСКОМУ СВ ЕЛЬСТВ В 30 ичес и генети С.Т.ЧалыкЛ.В. Голышк авалишина А.Н.стоты возникноаплоидов у куССР, т. 276,38.(57) Изобретениму хозяйству и ПЛОИДО Н ТИФИКАЦ ельск льзов относитсяжет быть и укурузы. Известен способ вы ов, основанный на исления гаплоильзовании доа мор- лоидов аркерных генов и х особенностях г мин антныхфологическкукурузы.Цель из ние точв и усса. бретения - повыш ификации гаплоид сти иде рение с екционного процессуществляют следую щ Способразом. шем с гаплоидным за олевых условиях ерно езу чаю бр идивания нескольки ате скр ых комб оиндуий с маркерно га ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЬГГИЯМПРИ ГКНТ СССР(71) Институт экологки АН МССР"Индукция высокой чвения матроклинныккурузы. Доклады АНк 33, 1984, с, 735 Изобретение относится к сельско хозяйству и может быть использован в селекции для выявления гаплоидов ЯО 1500213 А 1 о в селекции для выявления гаплоиов кукурузы. Цель изобретения - по ышение точности идентификации гаплоидов и ускорение селекционного процесса. Зерновки с гаплоидным зародышем получают в результате скрещивания гибридной комбинации с маркерной,гаплоиндуцирующей линией. Полученныесемена высаживают в чашки Петри ипроращивают в термостате. Предварительно отбирают предполагаемые гаплоиды по морфологическим признакамкорешков и первого листа проростков.У 7-8 дневных проростков получаютэлектрофоретические спектры пероксидат, а к гаплоидам относят проростки, в спектре которых присутствуетодна верхняя зона с Р 0,17. 1 з.п .ф-лы,цирующей линией КМС (коричневый маркер Саратовский) . Гибридные комбинации используют в качестве материнского компонента. На початки материнских растений до появления рылец надевают пергаментные изоляторы. Пыльцу1с КМС наносят вручную. Изоляторына початках сохраняют до созреваниясемян. После созревания полученныесемена высаживают в чашки Петри итрое суток проращивают в термостатепри 30 С, Предварительный отбор предполагаемых гаплоидов проводят по отсутствию антоцианового окрашиваниякорешков, а также по морфологическим признакам корешков и первого листа проростков.1500213 возможность ошибок в отборе гаплоидов по морфологическим признакам, Среди гаплоидов и предполагаемых гаплоидов, выделенных по морфологическим маркерам, методом электрофореза обнаружены диплоиды.Применение предлагаемого способа увеличивает надежность отбора истинных гаплоидов, что очень важно для ускорения селекционного процесса. Формула изобретения Составитель Е.ШкрадюкРедактор В.Ковтун Техред А,Кравчук Корректор М,Самборская Заказ 4785/3 Тираж б 21 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская ваб., д. 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул, Гагарина, 10 Для анализа берут часть листовойпластинки 7-8-деннных проростков кукурузы. Образцы гомогенизируют в течение 1-2 мин в трисглициновом буфе 5ре рН 8,3. Гомогенат после 1 ч настаивания центрифугируют (5 тыс,об/минв течение 10 мин). Для анализаберут надосадочную жидкость, смешанную с 40 -ным раствором сахарозы. Электрофорез проводят в вертикальных двуслойных пластинах полиакриламидного геля. Пероксилазу выявляютпо реакции окисления бензидина дообразования продукта окисления, Элект"5рофореграммы обрабатывают на лазерном денситометре,На электрофореграммах и денситограммах различия между гаплоидами идиплоидами выявлены в верхней части 20спектра: у гаплоидов присутствуеткомпонент с КГ 0,17, тогда как удиплоидов - с Ы 0,17 и В.Е 0,20,Метод отличается точностью и исключает ошибки в идентификации гаплоидов. Так, например, электрофорезпероксидазы листьев проростков гаплоидов из нескольких гибридных комбинаций, отобранных с помощью известных морфологических маркеров ЗМС(зародьппевый маркер Саратовский) иКМС (коричневый маркер Саратовский)по известному способу, и предполагаемых гаплоидов, у которых данныймаркер проявляется не четко, показап 35 1. Способ идентификации гаплоидов кукурузы, включающий скрещивание маркерной формы, содержащей гаплоиндуцирующий фактор с исходной гибридной комбинацией, и последующий отбор ,гаплоидных проростков по иорфологическим признакам, о т л и ч а ю - щ и й с я тем, что, с целью повышения точности идентификации гаплоидов и ускорения селекционного процесса, у отобранных по морфологическим признакам проростков дополнительно получают электрофоретические спектры пероксидазы и к гаплоидам относят проростки, в спектре которых присутствует одна верхняя зона с НК 0,17. 2. Способ по п. 1, о т л и ч а ющ и й с я тем, что получают электрофоретические спектры 7-8 дневных про" ростков,