Способ выделения иерсиний

(5 ЕН АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ агния но-кр рией,го, с добавлением 0,04 г/л бумагния серно-кислого и 5 г/лнатрия хлористого, рН среды 7Посев подрашивают при 4 Счение 18 ч. Затем осуществляюнократный пересев на электнвнтательную среду, содержащую гсухая среда Эндо 40, сахарозамочевина 0,4, калий углеккслыикалий метабисульфат 0,8, желчхая 1,0, аммоний молибденово-к0,8, конго красный 0,07, генцивиолет 0,014, вода дистиллировдо 1 л, рН среды 7,2. медицин быть ис- желудоч ера уйера 4.те- одую пик стик и корение спо ь иэобретени стр О, су- исль а кислого двуМ раствора днозамещенно ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР ОПИОАНИЕ ИЗОБР(54) СПОСОБ ВЬЩЕЛЕНИЯ ИЕРСИНИЙ(57) Изобретение относится к медицинской микробиологии и может бытьиспользовано при диагностике желудочно-кишечных заболеваний. Цель изобретения - ускорение способа. Исследуемый материал засевают в накопительную среду, содержащую 300 мл 6,7 Мраствора калия фосфорно-кислого двуИзобретение относитс микробиологии и мож пользовано при диаг но-кишечных заболев соба.Способ иллю ируется следующими примерами.П р и м е р 1. Исследуемый ма:териал (испражнения, кровь, слизь из зева, влагалища) забирают эа 2 до исследования.в стерильные пробир ки с 5 мл концентрированной фосфатно-солевой средой накопления, приго товленной из расчета 300 мл 6,7 М раствора калия фос 5 орнозамещенного и 700 мл 6,7калия фосфорно-кислого о эамещенного, 700 мл 6,7 М раствора калия фосфорно-кислого одноэамещенного, 5-6 г/л буфера натрия хлористого и 0,04-0,05 г/л буфера м серно-кислого, рН 7,4-7,6. Подращиование осуществляют при 4-8 С в течение 18-24 ч. Затем культуру однократ но пересевают на элективную среду, содержащую, г/л: сухая среда эндо 40-50; сахароза 4,5-5; мочевина 0,4- 0,5, калий углекислый 0,8-1; калий метабисульфит 0,8-1; желчь сухая 1- 1,2; аммоний молибденово-кислЫй 0,8- 1; конго-красный 0,07-0,08; генцианвиолет 0,014-0,016; вода дистиллированная до 1 л. После 18-24 ч инкубации при 37 С отбирают колонии с темасным центром и светлой перифеПеред посевом среду подсушивают. осев инкубируют 18 ч при 37 С, посе чего отб 1 рают для дальнейшего ис4 4Результаты исследований показывают, что предлагаемый способ.по сравнению с известным в более короткий срок позволяет выявлять иерсиннй из исследуемого материала при сохранении высокой чувствительности. формула изобретения Сухая среда Эндо 40-50 Сахароза 4,5-5,0 , Мочевина 0,4-0,5 Калий углекислый 0,8-1,0 Калия метабисулъфит 0,8-1,0 Желчь сухая 1,0-1,2 Аммоний молибденовокислыйКонго красныйГенцианвиолетВода дистиллированная Дол и после инкубирования отбирают коло" нии с темно-красным центром и светлой периферией. 0,8-1,0 0;07-0,08 О, 014-0,016Составитель Г,.СмирноваТехред М,Дидык .,(в Фрее Корректор С.Шекмар Редактор И.Недолуженко Заказ 2785/21 Тираж 500 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, 3-35, Раушская наб., д. 4/5 Производственно-издателъский комбинат "Патент", г,ужгород, ул. Гагарина, 101 з 148294следования с темно-красным центром исветлой периферией,П р и м е р 2. Способ осуществляют в соответствии с примером 1,но в накопительной среде магний сернокислый и натрий хлористый исполь-зуют в количестве 0,045 и 5,5 г/л бу"фера соответственно, рН среды 7,5.. Подращивание ведут при 8 С в течение 1024 ч,Для приготовления основной средыкомпоненты исполъзуют в следующнхсоотношениях, г/л; сухая среда Эндо45, сахароза 4 7, мочевина 0,45, калий углекислый 0,9, калия метабисульфит 0,9, желчь сухая 1,1, аммониймолибденово-кислый 0,9, конго красный 0,075, генцианвиопет 0,015, водадистиллированная до 1 л. После инку" 20бирования в течение 24 ч отбирают ко- лонии иерсиний для дальнейшего исследования,П р и и е р 3. Способ осуществляют в соответствии с примером 1, но 25в накопительной среде добавки солейнатрия хлористого и магния сернокислого берут в концентрации 6,0 и0,05 г/л буфера соответственно, рНсреды 7,6. МПересев осуществляют на элективную среду, содержащую компонентыв следующем соотношении, г/л: сухаясреда Эндо 50, сахароза 5,0, мочевина 0,5, капий углекислый 1,0, калия метабисульфит 1,0, желчь сухая1,2; аммоний молибденово-кислый 1,0,конго красный 0,08, генцианвиолет0,016, вода дистиллированная дол.Через 24 ч инкубации отмечается рост ,И 1колоний пирамидальной формы размеф ром 2-3 мм со светлой периферией,и темно"красным центром. Способ выделения иерсиний путем подращнванияисследуемой культуры в фосфатно-буферном реакторе на холоду с последующим пересевом на плотную питательную среду, инкубированием посевов и отбором выросших колоний, о т л и ч. а ю щ и й с я тем, .что, с целью ускорения способа, подращивание осуществляют в фосфатно-буферном солевом растворе, содержащем 300 мл 6,7 И раствора капия фосфорно-кислого двузамещенного и 700 мп 6,7 М раствора калия фосфорно-кислого однозамещенного, 5-6 г/л буфера натрия хло" ристого и"0,04-0,05 г/л буфера магния серно-кислого, пересев осуществляют однократно на среду, содержащую, г/л: