Способ определения активности спермы

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 9) (11 18 ИСАНИЕ ИЗОБРЕТ Я ТЕЛЬСТВУ А ВТОРСКОМУ С ент. ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИ(71) Специальное конструкторско-технологическое бюро с опытным производством Института проблем криобиологиии криомедициныАН УССР иИнститутпроблем криобиологиии криомедициныАН УССР(56) Инструкция по организации итехнологии работы станций по искусственному осеменению сельскохозяйственных животных. - М.: 1968.Авторское свидетельство СССРВ 974270, кл. С 01 Н 33/48, 1976. 50 4 А 61 0 7/02 С О 1 И 33/48(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИСПЕРМЫ(57) Изобретение относится к медицине и ветеринарии. Целью изобретенияявляется повышение точности способа.Элкулят разбавляют фосфатно-солевымбуферным раствором. В полученную суспензию вводят агглютинирующий агВ качестве агглютинирующего агентаиспользуют лектины растительногопроисхождения. Кинетику агглютинациинепрерывно регистрируют самопишущимпотенциометром. Оценку двигательнойспособности спермиев осуществляютпо величине, обратной скорости образования клеточных агрегатов.30 Формула изобретения Составитель А.филипповаТехред М.Дидык Корректор С.Черни Редактор А,Шандор Заказ 5917/3 Тираж 595 Подписное ВНИИПИ Госудасртвенного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул, Проектная, 413570Изобретение относится к медицине и ветеринарии, а именно к способам оценки активности спермы, и может быть использовано в акушерстве и гинекологии для диагностики бесплодия, в животноводческой практике при проведении искусственного осеменения и может найти применение в биологии для объективной оценки эффективности методов низкотемпературной обработки и длительного хранения спермы сельскохозяйственных животных.Целью изобретения является повыше ние точности способа. 15П р и м е р 1,Исследуют сперму человека, полученную от 12 доноров, Перед определением активности спермы зякулят разбавляют фосфатно-солевым буферным раствором (0,01 М, рН 7,2-7,4) в соотношении 1:20 и объемом в 2,5 мл вносят в термостатируеомую при 37 С прозрачную кювету, оборудованную системой "мягкого" перемешивания. Контроль процесса агллютина ции проводят на экспериментальной установке методом измерения угловой анизотропии светорассеяния испытуемой суспенэии. В качестве агглютинирующего агента используют лектин растительного происхождения - фитогемагглютинин (ФГА) вводимый в испытуемую суспенэию из расчета 15 мкг на миллилитр. Кинетику агглютинации непрерывно регистриуют само 35 пишущим потенциометром КСП. Скорость образования клеточных агрегатов (агглютинатов) оценивается наклоном регистрируемой кривой.Для сравнения результатов парал - 4 О лельно проводят оценку активности спермы визуальным методом под микроскопом по 5-бальной системе.Анализ коррелятивных связей между активностью спермы и обратной величи ной скорости образования клеточных агрегатов позволяет сделать вывод о 182применимости предлагаемого способа для диагностической оценки качества спермы.П р и м е р 2Определяют активность образцов криоконсервированной спермы быков-производителей. Размораживание осуществляют по общепринятой методике на водяной бане. После от таивания образцы спермы разбавляют фосфатно-солевым буферным раствором в соотношении 1:10 и проводят определение активности предлагаемым способом аналогично примеру 1. В качестве агглютинирующего агента используют препарат агглютинина зародышей пшеницы в концентрации 1000 мкг в 1 мл физиологического раствора. Для определения активности в исследуемую суспензию с помощью микропипетки вводят 50 мкл растворенного препарата.В качестве агглютинирующего агента могут быть использованы любые, нетоксичные к сперме, биологически активные соединения, вызывающие аг-. глютинацию исследуемых клеток, Кроме фитогемагглютинина фасоли и агллютинина зародышей пшеницы, аналогичный эффект даст применение конкановоллина (лектина чеснока). Способ определения активности спермы, включающий разбавление ее активирующей средой и оценку двигательной способности спермиев в полученной суспензии, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения точности способа, после разбавления спермы активирующей средой в полученную суспензию вводят агглютинирующий агент и фиксируют скорость образования клеточных агрегатов, а оценку двигательной способности спермиев осуществляют по величине, обратной скорости образования клеточных агрегатов.