Способ подготовки биологической ткани к исследованию в растровой микроскопии

Номер патента: 1168818

Авторы: Кейсевич, Медвецкий

ZIP архив

Текст

(51) 6.01 И 1/28, А 61 В 10 ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР .ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИИ(71) Киевский научно-исследовательский институт клинической и экспериментальной хирургии и Киевский государственный институт усовершенствованця врачей(56) Ровенский Ю.А. Растровая электронная микроскопия нормальных и опухолевых клеток. М., "Медицина" 1979,с, 36-41.Рыбаков А.Г. Растрбвая электронная микроскопия сосудов и крови. М.,"Медицина", 1976, с. 23-26,(54) (57) СПОСОБ ПОДГОТОВКИ БИОЛОГИЧЕСКОЙ ТКАНИ К ИССЛЕДОВАНИЮ В РАСТРОВОЙ МИКРОСКОПИИ, путем ее фиксации,обезвоживания с последующей обработкой драгоценным металлом, о т л ич а ю щ и й с я тем, что, с цельювыделения всех структур поверхности,ткань после фиксации обрабатывают0,5-2 Е-ным раствором хлорида олова,а обработку драгоценным металлом Проводят в 0,5-27.-ном растворе хлоридазолота, при этом каждую обработкуведут в течение 1-2 ч.1 1:688 Составитель В, ЧистяковТехред С.Мигунова Редактор О, Бугир Корректор М Роэман Заказ 4607/36 Тираж 897ВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб д. 4/5 Подписное Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 Изобретение относится к биологии и медицине и предназначено для подготовки биологических объектов к исследованию на растровом электронном микроскопе (РЭМ).Цель изобретения - выярление всех структур поверхности.Способ осуществляется следующим образом.1 ООбразец ткани фиксируют по приня.тому в электронной микроскопии методу, отмывают от фиксатора и на 1-2 ч при комнатной температуре погружают в 0,5-27-ный раствор хлорида олова 15 в 17-ной кислоте И = 1.,18), служащий сенсибилизатором поверхности, и 15-20 мин промывают в листиллированной воде для создания коллоидной пленки двухвалентного олова 20 (БпС 1, + Н,О -+ Бп(ОН)С 1 + НС 1, повышающей равномерность образования металлического покрытия и создающей условия для восстановления ионов металла. Затем на 1-2 ч переносят пре парат в 0,5-27-ный раствор хлорида драгоценного металла, например золота (БпС 1 + АцС 1 - БпС 1 + Ац), причем образующееся при этом металлическое покрытие и ионы металла, откладывающиеся внутри ткани, обеспечивают электропроводность образца по всей его толщине и на поверхности, что препятствует возникновению очагов статического электричества; отмывают препарат в дистиллированной воде, обезвоживают одним из способов, применяющихся в электронной микроскопии, и изучают на растровом электронном микроскопе. 18 ) 2П р и м е р. Предназначенный для исследования фрагмент ткани, например, поджелудочной железы или печейи промывают для очистки поверхности от загрязняющих веществ и фиксируют в 1-37-ном растворе глутарового альдегида в 0,1 М фосфатном буфере. За" тем его отмывают забуференным изотоническим раствором хлористого натрия и для окончательной фиксации переносят в 17.-ный раствор четырехокиси осмия в 0,1 М фосфтаном буфере, Вновь тщательно отмывают в дистиллированной воде.Фиксированную ткань на 1-2 ч погру. жают в 17-ный раствор хлорида олова в 17.-ной соляной кислоте, в течение 15-20 мин отмывают в дистиллированной воде, на 1-2 ч помещают в 1 Ж-ный раствор хлорида золота и вновь 15- 20 мин отмывают в дистиллированной воде, После этого подготовленный таким образом препарат обезвоживают в спиртах восходящей крепости от 30 до 100 С, наклеивают его на подложку и изучают на растровом электронном микроскопе.Опытным путем установлено, что если концентрация хлорида олова или хлорида золота в растворе менее 0,5 Ж, препарат свойств электропроводности не нриобретает, а при концентрации более 27. возникают искажения изображения.Изобретение позволяет выявить все структуры поверхности ткани, повысить разрешающую способность микроскопа, кроме того, исключить использование чистых драгоценных металлов и специальной вакуумной аппаратуры.

Смотреть

Заявка

3460645, 01.07.1982

КИЕВСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ КЛИНИЧЕСКОЙ И ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ХИРУРГИИ, КИЕВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ИНСТИТУТ УСОВЕРШЕНСТВОВАНИЯ ВРАЧЕЙ

МЕДВЕЦКИЙ ЕВГЕНИЙ БОЛЕСЛАВОВИЧ, КЕЙСЕВИЧ ЛЮДВИГ ВЛАДИСЛАВОВИЧ

МПК / Метки

МПК: A61B 10/00, G01N 33/48

Метки: биологической, исследованию, микроскопии, подготовки, растровой, ткани

Опубликовано: 23.07.1985

Код ссылки

<a href="https://patents.su/2-1168818-sposob-podgotovki-biologicheskojj-tkani-k-issledovaniyu-v-rastrovojj-mikroskopii.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ подготовки биологической ткани к исследованию в растровой микроскопии</a>

Похожие патенты