Способ получения эритроцитарного диагностикума для выявления антител к типа “
Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Номер патента: 1072863
Авторы: Каверина, Левина, Мошиашвили
Текст
107 Составитель П, БонарцевТехред Ж,Кастелевич Корректор М, Шарощи. Редактор Т. МитейкоЗаказ 243/2 Подписное Тираж 688 ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и отирытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д, 4/5Филиал ППП "Патен 1", г, Ужгород, ул. Проектная, 4 Изобретение относятся к медицине, а именно к способам серологической диагностикиинфекционных заболеваний.Известен способ получения эритроцитарногодиагностикума для выявления антител Наепю -рЬ 1 цв п 11 цепгае типа ".В", в котором в качес.тве сенситина для эрнтроцитов используют ли.заты культур НаепюрЫ 1 ив т 1 цепгае типа "В",полученные в результате действия додецилсульфата с последующим освобождением от белков 10путем многократной обработки смесью хлороформ - амиловый спирт, очисткой активированным утлем; осаждением спиртом и обработкойферментом ДНК-азой 111,Однако данный способ недостаточно чувствителен и характеризуется нестабильностьюполучаемых реагентов.Целью изобретения является повышение чувствительности и стабильности эритроцитарногодиагностикума. 20Указанная цель достигается тем, что соглас но способу получения эритроцитарного диагностикума для выявления антител к НаеворЬ 1 цвЬйцепгае типа "В" путем сенсибилизации зритроцитов сенситнном, в качестве сенситина ис. 25. пользуют капсульный антиген Е,со 1( К 100, пе.рекрестно реагирующий с Наепюрй 1 цв аФ 1 цвпгаетипа "В" и полученный путем обработки водногоэкстракта культуры возрастающими концентрациями триметилцетиламмония бромистого инатрия хлористого,Способ осуществляется следующим образом,Культивируют Е.со 11 К 100 на коммерческихагаровых средах, Затем получают водные экстракты культур. После чего их обрабатывают триметилцетиламмонием бромистым и натрием хло 35ристым, Полученным сенситином сенсибилизируют. эритроциты,П р и и е р. Взвесь 20-часовой атаровойкультуры Е,со 1 К 100 смывают дистиллированнойводой, помещают в аппарат для встряхивания на401 ч и центрифугируют при 5 тыс. об/мин20 мин (схема 1),К надосадочной жидкости добавляют до 0,1%триметилцетиламмония бромистого (0,1 мл 286310%.ного раствора на 100 мл жидкости),оСформировавшийся в течение 2 ч при 4 С оса.док отделяют, К надосадочной жидкости, полу.ченной после центрифугирования при5 тыс, об/мин 20 мин, добавляют до 0,01 Мтриметилцетиламмония бромида (3,65 мл 10%-но.го раствора на 100 мл жидкости), Сформировавшийся в течение 2 ч при 4 С осадок отделяютцентрифутированием нри 5 тыс. об/мин и ресуопендируют в 0,1 й растворе МаС 1 и вновь центрифугируют при тех же условиях. Осадок ресус.пендируют в 2 М растворе йаС 1, центрифугируют,осадок отбрасывают, а к надосадку добавляютзтанол в соотношении 1:2. Осадок формируетсяо18 - 20 ч, при 4 С. Полученный мпигенный ком.плекс (КПС) отделяют центрифутированием, растрастворяют в 50 мл дистиллированной воды илиофильно высушивают,Сенсибилизацию формалиниэированных эпитроцитов барабана (или кур) проводят при 37 Св течение 2 ч, Доза КПС Е.со 1 К 100 составляет 50 мкг на 1 мл 5% эритроцитов. После, трехкратного отмывания физиологическим раст.вором (центрифутирование при 1000 об/мин10 мин) надосадочную жидкость удаляют и до.бавляют 0,85% МаС 1. с 1%-ного нейтральногоформалина (рН - 7,2) так, чтобы получить2,5%.нуЮ взвесь сенсибклизированных эритроцитов. Контроль проведенной сенсибилизации проводят в РПГА с применением стандартной аггяютинирующей сыворотки к Наепюрй 1 цв, пИцеп -гае типа "В" и Е,со 1 К 100, Полученныйпрепарат КПС Е,со 1 К 100 обладает высокойантигенной специфичностью и активностью. Наиболее высокие титры гемагглютининов выявлены в опытах с диагностикумом из КПС Е.со 1К 100, С диагностикумом КПС Е.со 1 К 100в 25 сыворотках выявлено наличие антител к НаепюрЬ 1 цв пЛцепгае типа "В" сдиагностическим титром 1:1280 и выше,Для выявления аналогичного количества поло.жительных сывороток (26) в опытах с диагностикумом из НаепюрЬ 1 цвпйцепгае типа"В" (прототип в качестве диагностическогоприходилось считать титр 1:20 и выше,
СмотретьЗаявка
3510480, 09.11.1982
МОСКОВСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ВАКЦИН И СЫВОРОТОК ИМ. И. И. МЕЧНИКОВА МИНИСТЕРСТВА ЗДРАВООХРАНЕНИЯ СССР
ЛЕВИНА ЛЮДМИЛА АБРАМОВНА, КАВЕРИНА КСЕНИЯ ГЕОРГИЕВНА, МОШИАШВИЛИ ИЛЬЯ ЯКОВЛЕВИЧ
МПК / Метки
МПК: A61K 39/02
Метки: антител, выявления, диагностикума, типа, эритроцитарного
Опубликовано: 15.02.1984
Код ссылки
<a href="https://patents.su/2-1072863-sposob-polucheniya-ehritrocitarnogo-diagnostikuma-dlya-vyyavleniya-antitel-k-tipa.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ получения эритроцитарного диагностикума для выявления антител к типа “</a>
Предыдущий патент: Способ лечения женского эндокринного бесплодия
Следующий патент: Массообменная тарелка
Случайный патент: Устройство для нанесения покрытия на внутреннюю поверхность изделий