Матрица для изготовления образцов для прицельной электронно микроскопической ультрамикротомии

СОКИ СОВЕТСКИХсавлкпьипикРЕСПУБЛИК а 01 ЫО 2 ОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИГ ИЗОБРЕТЕНИЯ(56) 1. Архив анатомии, гистологии и эмбриологии.,1978 В 11,с.98-99. . (54) (57) 1.МАТРИЦ ДЛЯ ИЗГОТОВЛЕНИЯ ОБРАЗЦОВ ДЛЯ ПРИЦЕЛЬНОЙ ЭЛЕКТРОННО- МИКРОСКОПИЧЕСКОЙ УЛЬТРМИКРОТОМИИ, содержащая ячейки, о т л и ч а ющ а я с я тем, что , с целью упрощения технологии изготовления образцов и снижения расхода заливочАВТОРСКОМУ Св.ВО 100 А ных сред, матрица снабжена приживной пластиной и носителем исследуемого объекта, размещенного междуприжимной пластиной и матрицей, акаждая ячейка выполнена в видесквозного отверстия, имеющего вверхней части цилиндрическую форму,а в нижней - форму усеченного конуса.2. Матрица по и. 1, о т л ич а ю щ а я с я тем, что носительисследуемого объекта выполнен в виде стеклянной пластины, а отношение диаметров усеченного конусаравно 1,25 - 2, 1006967Тираж 871 Подписное ВНИИПИ Заказ 212765 филиал ППП Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 Изобретение относится к техникеподготовки материалов для электрон"ного микроскопа, в частности к прв"паративной технике подготовки образцов для прицельной ультрамикротомии.Известна матрица, содержащаяячейки 13С ощью данной матрицЫ можнлучить лишь цельнополийерные образ"цы. Однако монолитный образец обла"дает высокой твердотельной текучестью 10проявляющейся при зажатии его в патронеобъектодержателя ультрамикрото"ма, что снижает качество получаемыхсрезов, а также требует большого расхода эаливочных сред. 15Целью изобретения является упрощение технологии изготовления образцови снижение расхода эаливочных сред.Указанная цель достигается тем,что матрица для изготовления образ Оцов для прицельной электронно-микроскопической ультрамикротомии,содержащая ячейки, снабжена прижимной пластиной и носителем исследуемого объекта, размещенного между при жимной пластиной и матрицей, а каждая ячейка выполнена в виде сквоз,ного отверстия, имеющего в верхнейчасти цилиндрическую форму, а в нижней - форму усеченного конуса,Целесообразно носитель исследуемогообъекта выполнить в виде стекляннойпластины, а отношение диаметров усеченного крнуса должно быть равно 1,25-2,На чертеже изображена матрица,общий вид,35Матрица 1 выполнена с ячейками 2и снабжена прижимной пластиной 3.Между матрицей 1 и прижимной пластиной 3 установлен носитель исследуемого объекта 4, выполненный в 40виде стеклянной пластины.Поджим носи-теля исследуемого объекта 4 к нижнему торцу матрицы 1 осуществляется припомощи винта 5,жестко закрепленногона прижимной пластине 3, и гайки б. 45Ячейки 2 матрицы 1 выполнены в видесквозных отверстий, имеющих в верхней части цилиндрическую форму, ав нижней - форму усеченного конуса.Стеклянная пластина 4 образует дноматрицы 1, на котором размещеныисследуемые объекты 7, а ячейки 2снабжены твердотельными цилиндрами8 и заполнены заливочной средой 9.Отношение диаметров усеченного конуса варьируют от 1,25 до 2,причембольшее снижение размеров меньшегодиаметра конуса нецелесообразно,так как это приведет к значительномууменьшению площади торца и, следовательно, к снижению количестваплоских исследуемых объектов 7 наэтой площади, что ухудшит условия выбора участка для прицельной ультра,микротомии.Увеличение размеров малогодиаметра конуса ячейки, сопровождающееся снижением отношения диаметровниже 1,25, также нецелесообразно,так как в этом случае конус будетприближаться к цилиндру, что затруднит .извлечение образцов из ячеекпосле полимеризации,С матрнцей для изготовления образцов для прицельной электронномикроскопической. Ультрамикротомииработают следующим образом.Между нижней поверхностью матрицы 1 и поджимной пластиной 3 размещают носители исследуемого объекта 4 и производят поджатие путемзакручивания гайки б, При этом носитель исследуемого объекта 4 становится дном ячейки 2 в матрице 1, накотором располагают монослой объектов 7. Ячейку 2 матрицы 1 заполняютзаливочйой средой 9 и в нее вводяттвердотельный цилиндр 8,соприкасаяего торец с заливочной средой. Твердотельный цилиндр 8 удерживается вматрице 1 в вертикальном положенииза счет сил трения между наружной поверхностью твердотельного цилиндра 8 и по-.:верхностью цилиндрической части ячейки 2.Происходит процесс полимеризации.По завершении процесса полимеризации монослой исследуемого объекта7 переносят с плоской поверхности наторец образца путем отделения обраэ ца от этой поверхности. Эта операциясопряжена с извлечением образца изячейки 2 матрицы 1. Для этого гайкуб отвинчивают, прижимную пластину 3отделяют от матрицы 1, Затем матрицу1 помещают кратковременно на сухойлед с целью облегчения отделения образцов от пластины 4, За свободнуючасть твердотельного цилиндра 8, выступающего над ячейкой 2, образец изячейки 2 извлекают, прн этом монослойисследуемых объектов вместе с заливочной средой 9 отделяется от стек"лянной пластины 4 и остается на торцовой плоскости полученного образца,Образцы исследуют с помощью светово"го микроскопа, отмечают интересующиеисследователя участки и на них затачивают пирамидки для последующей прицельной ультрамикротомии.Использование матрицы позволит значительно упростить процедуру изготовления двухфрагментных образцов дляприцельной ультрамнкротомии и.снизитьзатраты времени на подготовку препаратов для электронно-микроскопическогоанализа. Кроме того, сокращается расход заливочного материала, приобретаемого, как правило, на валюту вкапиталистических странах.