Способ количественного определения фурадонина

)5 ОБРЕТЕН ЬСТВУ едицинс ный к.О.Нови СССР,акоп3.томенных ичес нит оный ени ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И СКРЫТИЯМПРИ ГННТ СССР ПИСАНИЕ И АВТОРСКОМУ СВИД(71) Курский государствекий институт(56) Государственная фармизд. Х, 1968, с. 322 - 3Куринна Н,В. Спектрофкое определение лекарствратов на основе произвофурана. - Фармацевтическ1973, Вф 6, с, 15 - 18. Изобретение относится к аналитической химии и может быть использовано для количественного определ яфурадонина как в чистом виде, так влекарственных формах,Известен способ количественногоопределения .,екарственных препаратовна основе производных 5-нитрофуранапутем обработки пробы анализируемоговещества щелочью с последующим фотометрированием полученного раствора,Однако данный способ характеризуется невысокой стабильностью окрашенного .продукта (4 мин) и связанной сэтим трудностью получения воспроизводимых результатов.Наиболее близким к предлагаемомуявляется метод, в котором поставленная цель достигается. обработкой анализируемой пробы 503"пым растворомсерной кислоты. Оптическую плотность 801719972 2(54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФУРАДОНИНА(57) Изобретение касается аналитичесой химии, в частности определения фурадонина в его лекарственных формах или в чистом виде, Цель изобретения - повышение точности и чувствительности анализа. Для этого пробу обрабатывают сначала пирогаллолом "А", затем концентрированной серной кислотой с последующим фотометрированием полученного раствора. В этом случае ошибка анализа снижается с + 2,2 до + 2,9.10 табл окрашенного продукта измеряют при Ъ = = 227 нм.Однако при анализе фурадонина этим методом в чистом виде и в лекарственных формах выявлены большой расход реактива, невысокая точность и чувствительность определенияЦель изобретения - повышение точности и чувствительности определения фурадонина в чистом виде и в лекарственных формах.Поставленная цель достигается тем, что пробу, содержащую фурадонин, обрабатывавт химическим реагентом с последующим фотометрированием полученного окрашенного раствора. В качестве фф химического реагента используют 0,27- ный водный раствор пирогаллола "А", обработку ведут в сернокислой среде. В качестве раствора сравнения используют раствор "холостого" опыта.1719972 Т а б л и ц а 8 Значение оптической плотности в случаедобавления вначале к анализируемойпробе реагента, азатем конц.сернойкислоты Значение оптической плотйости в случае добавления вначале к анализируемойпробе конц.сернойкислоты, а затемреагента Прибор Опыт 0,67 0,67 0,67 0,67 Таблица 9 12,0 0,5 200,0 1,0 2,0 3,0 200,0 0,65 12,0 4,9 200,0200,0 10 5,0 0,65 12,0 13 14 0,00 12,0 0,1 50,0 0,2 0,04 12,0 50,0 0,08 12,0 0,3 50,0 0,12 12,0 12,0 0,4 50,0 0,15 50 ф 0 1 КФК2 КФК3 КФК4 КФК5 КФК200,0 200,0 200,0 200,0200,0200,0200,0 200,0 200,0 200,0 0,67 0,67 0,67 4,0 4,2 4,5 4,7 6,0 7,0 8,0 12,0 12,0 12,0 12,0 12,0 12,0 12,0 12,0 12,0 12,0 12,0 0,67 0,67 0,67 0,04 0,40 0,62 0,67 0,67 0,67 0,67 0,67 0,66 0,60 0,57 0,52. 0,16 12,0 50,0 50,0 50,0 50,0 12,0 12,0 12,0 1,0 2,0 3,0 4,0 4,2 4,4 5,0 6,0 12,0 50,0 10 12,0 12,0 12,0 12,0 50,0 12 50,0 50,0 13 50,0 14 15 16 7,08,0 12,0 12,0 50,0 50,0Числовые значения оптической плотности приведены каксреднее из трех независимых переменных.1719972 Продолжение табл, 10 4,0 4,0 50,0 0,16 14,0 50,0 15,0 0,15 4,0 200,0 200,0 200,0 1,0 0,00 4,0 2,0 О, 1 О 3,0 4,0 0,21 4,0 200,0 200,0 4,0 0,32 4,0 5,0 6,0 0,42 4,0 4,0 4,0 4,0 4,0 0,5250,60 7,0 8,0 0,66 0,67 9,0 10,0 0,67 11,0 0,67 12,0 13,0 14,0 0,67 0,67 0,67 0,62 15,0 П р и и е ч а н и е. Числовые значения оптической плотности здесь и далее по тексту приведены как среднее из трех независимых переменных. Составитель С.ХованскаяРедактор М,Петрова Техред М,дидык Корректор М.Самборская Заказ 768 Тираж ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Производственно-издательский комбинат Патент , г. Ужгород, ул. Гагарина, 01н 11г, ин. 10 200,0 200,0 200,0 200,0 200,0 200,0 200,0 200,0 200,0 200,0 4,0 4,0 4,0 4,0 4,017199Данное техническое решение предлагает использование нового реагента - 0,2 Х-ного водного раствора пирогаллола "А", с последующим добавлением концентрированной серной кислоты.В табл. 1 приведены оптимальные условия количественного определения фурадонина, соответствующие удельные и молярные коэффициенты светопоглощения.Химизм реакции количественного определения фурадонина предположительно основан на образовании красителя Стенгауза. В среде 507-ной серной . кислоты происходит раскрытие фуранового кольца фурадонина и конденсация полученного продукта с пирогаллолом "А" с образованием окрашенного раст 20 вора.В табл. 7 приведены условия количественного определения фурадонина с производными фенола, применение которых обеспечивает перевод фурадонина в окрашенное соединение, соответствующие.значения молярного и удельного коэффициентов светопоглощения. Для фурадонина оптимальным фенолом является пирогаллол "А",Количественное фотометрическое определение фурадонина.Построение калибровочного графика.Около 0,01 г (точная навеска) порошка фурадонина количественно пере носят в мерную колбу на 100 мл, прибавляют около 80 мл дистиллированной воды и нагревают на кипящей водяной бане до полного растворения.После охлаждения объем полученного 40 раствора доводят дистиллированной водой до метки и перемешивают. Получают раствор "А", в 1 мл которого содержится 100 мкг фурадонина.20 мл полученного раствора "А 1 пе- ф 5 реносят в мерную колбу йа 100 мл и доводят объем раствора дистиллированной водой до метки. Получают раствор "Б", в 1 мл которого содержится 20 мкг фурадонина. 50Исходя из стандартного раствора "Б" готовят серию растворов с содержанием исследуемого вещества от 10 до 40 мкг. Для этого в мерные колбы на 25,0 мл помещают соответственно , 0,5 1,0, 1,25 1 5 и 2,0 мл стандартного раствора "Б" и недостающий до 5,0 мп объем дистиллированной воды, К 72растворам в колбах прибавляют по4,0 мл 0,2 Х-ного свежеприготовленноговодного раствора пирогаллола "А" и по12,0 мл концентрированной серной кислоты. Объем растворов в колбах доводят дистиллированной водой до метки,тщательно перемешивают. После охлаждения объем растворов в колбах сновадоводят водой до метки и перемешивают.Оптическую плотность полученных окрашенных растворов измеряют с помощьюфотоэлектроколориметра КФКпри светофильтре Ъ э , = 440+10 нм в кюветес толщиной рабочего слоя 50,0 мм.В качестве раствора сравнения используют охлажденную смесь, состоящуюиз 11,0 мл воды, 4,0 мл 0,2 Х-ного .свежеприготовленного водного растворапирогаллола "А" и 12,0 мл концентрированной серной кислоты,В табл. 2 приведена зависимость оптической плотности продукта взаимодействия фурадонина с пирогаллолом "А" от количества фурадонина, взятого на реакцию.Расчет уравнения калибровочного графика для фотоэлектроколориметрического определения фурадонина следующии:5 хбот 7 - 125 к 2 т 09 - 0 0 69 5 к 3625 - (125) ф ф3625 х 2 09 - 60,7 к 1255 к 3625 - (.125)2= -0,0045.Из данных табл. 2 следует, что светопоглощение окрашенных растворов фурадонина подчинается закону БугераЛамберта-Вера в пределах концентраций 10,0 - 40,0 мкг фурадонина в 25 мл конечного фотометрируемого раствора. Данные зависимости светопоглощения окрашенных растворов фурадонина, взятого на выполнение реакции, использованы для расчета параметров уравнения прямой, соответствующей прямолинейному участку калибровочного графика, имеющего общий видгде Э - оптическая плотность",К - коэффициент пропорциональности, равный тангенсу угла наклона калибровочного графика к оси абсцисс1719972Х - содержание определяемого вещества в анализируемой пробе,мкг;В - константа указывающая в каЭ5ком месте график пересекаетось ординат.С учетом рассчитанных параметров К и В уравнение прямой, соответствующей прямолинейному участку калибро вочного графика для фотоэлектроколо- о риметрического определения фурадонина р имеет следующий вид; П = О, 0169 Х - О, 0045.5Фотоэлектроколориметрическое определение Фурадонина в порошках.В мерную колбу на 25,0 мл помещают 2,0 мл водного раствора фурадонина (10,0 мкг в 1 мл) и 3,0 мл дистилли рованной воды. К полученному раствору добавляют 4,0 мл 0,2 -ного свежеприготовленного водного раствора пирогаллола "А" и 12,0 мл концентрированной серной кислоты, объем раствора в 25 колбе доводят водой до метки, охлаждают, После охлаждения объем раствора в колбе доводят до метки водой и снова перемешивают.Оптическую плотность полученного окрашенного раствора измеряют с помощью Фотоэлектроколориметра КюКпри светофильтре 9= 440+10 нм в кювете с толщиной рабочего слоя 50,0 мм. В качестве раствора сравнения используют охлажденную смесь, состоящую из 11,0 мл дистиллированной воды, 4,0 мл 0,2 -ного свежеприготовленного водного раствора пирогаллола "А" и 12,0 мл концентрированной серной кислоты.Расчет содержания препарата в пробах вычисляют по предварительно построенному калибровочному графику или по уравнению прямой, соответствующей прямолинейному участку калибровочного 45 графика.В табл. 3 приведены результаты количественного определения фурадонина в порошках фотоэлектроколориметрическим методом.50 Данные, приведенные в табл, 3,свидетельствуют о том, что с помощьюданного способа можно определять со"держание фурадонина в порошках с относительной ошибкой А = ф 1,6 .Фотоэлектроколориметрическое определение фурадонина в таблетках по0,05 и по 0,1 г,Точную навеску порошка растертых таблеток фурадонина количественно переносят в мерную колбу на 250,0 мл, прибавляют 200 мл дистиллированной воды и содержимое колбы нагревают на кипящей водяной бане до полного растворения. После охлаждения объем раствора в колбе доводят водой до метки и тщательно перемешивают, Необходимыйбъем пробы, полученный путем раствоения навесок таблеток Фурадонина по 0,1 или по 0,05 г помещают в мерную колбу на 25,0 мл, вносят до 5,0 мл дистиллированной воды, 4,0 мл 0,2 - ного свежеприготовленного водного раствора пирогаллола "А" и 12,0 мл концентрированной серной кислоты, перемешивают .и доводят полученную смесь водой до метки. После охлаждения смесь снова доводят водой до метки и перемешивают.Оптическую плотность полученного окрашенного раствора измеряют с помощью фотоколориметра КФКпри светоФильтре 9 з,Р, = 440 Ф 10 нм в кювете с толщиной рабочего слоя 50,0 мм. В качестве раствора сравнения используют охлажценную смесь, состоящую из 11,0 мл дистиллированной воды, 4,0 мл 0,2 -ного свежеприготовленного водного раствора пирогаллола "А" и 12,0 мл концентрированной серной кислоты.В табл. 4 и 5 представлены результаты количественного определения фурадонина. в таблетках по 0,05 (серия 180187) и по О, 1 г (серия 260185) соответственно фотоэлектроколориметрическкм методом. Данные табл. 4 и 5 свидетельствуют о том, что ошибка определения фурадонина в таблетках по 0,05 или по О, 1 г предлагаемым способом не превышает А = + 1,83%.Количественное спектрофотометрическое определение фурадонина.Построение калибровочного графика.Исходя из стандартного раствора "А" готовят серию растворов с содержанием исследуемого вещества от 50,0 до 200,0 мкг, Для этого в мерные колбы на 25,0 мл помещают соответственно 0,5, 1,0, 1,2 1,5 и 2,0 мл стандартного раствора "А" и добавляют недостающий до 5,0 мл объем дистиллированной воды, К растворам в колбах прибавляют по 4,0 мл 0,2%-ного свежеприготовленного водного раствора пи= -0,00465,Из данных табл. 6 следует, чтосветопоглощение окрашенных растворов 35фурадонина подчиняется закону БугераЛамберта-Вера в пределах концентраций50,0 - 400,0 мкг фурадонина в 25,0 млконечного фотометрируемого раствора.Данные зависимости светопоглощения 40окрашенных растворов фурадонина, взятого на выполнение реакции, использованы для расчета параметров уравненияпрямой, соответствующей прямолинейному участку калибровочного графика,имеющего общий вил:Р = КХ + В,оптическая плотность,коэффициент пропорциональности, равный тангенсу угла наклона калибровочного графикак оси абсцисс,содержание определяемого вещества в анализируемой пробе5мкг;константа указывающая в ка .ком месте график пересекаетось ординат. где 0 -К ХВрогаллола "А" и по 12,0 мл концентрированной серной кислоты. Объем растворов в колбах доводят до метки водой, тщательно перемешивают и охлаждают. После охлаждения объем растворов в колбах снова доводят водой до метки и перемешивают.Оптическую плотность полученных окрашенных растворов измеряют с помо щью спектрофотометра СФпри длине волны 9 = 468 нм в кювете с толщиной рабочего слоя 10,.0 мм. В качестве раствора сравнения используют охлажденную смесь, состоящую из 11,0 мл воды, 4,0 мл 2,07-ного свежеприготовленного водного раствора йирогаллола "А" и 12,0 мл концентрированной серной кислоты.В табл. 6 представлена зависимость 20 светопоглощения окрашенных растворов от количества фурадонина в пробах.Расчет уравнения калибровочного графика для спектрофотометрического определения фурадонина следующий: 25 С учетом рассчитанных параметров К и В уравнение прямой, соответствующей прямолинейному участку калибровочного графика для спектрофотометрического определения фурадонина, имеет следующий вид:0 = 0,00375 - 0,00465.Спектрофотометрическое определениефурадонина в порошке,В мерную колбу на 25,0 мл помещают2,0 мл водного раствора фурадонина,содержащего около 100 мкг препаратав 1 мл и 3,0 мл дистиллированной воды. К полученному раствору прибавляют4,0 мл 0,27-ного свежеприготовленноговодного раствора пирогаллола "А" и10,0 мл концентрированной серной кислоты. К полученному раствору добавляют 4,0 мл 0,27-ного свежеприготовленного водного раствора пирогаллола и12,0 мл концентрированной серной кислоты. Содержимое колбы тщательно перемешивают, объем раствора в колбедоводят водой до метки, охлаждают.После охлаждения объем раствора вколбе доводят водой до метки и сноваперемешивают.Оптическуюплотность полученногоокрашенного раствора измеряют с помощью спектрофотометра СФпри длиневолны 9 , = 468 нм в кювете с толщиной.рабочего слоя 10,0 мм.В качестве раствора сравнения используют охлажденную смесь, состоящуюиз 11,0 мл дистиллированной воды,4,0 мл 0,27;ного свежеприготовленноговодного раствора пирогаллола "А" и12,0 мл концентрированной серной кис-.лоты.Расчет содержания препарата в пробах вычисляют по предварительно построенному калибровочному графику илипо уравнению прямой, соответствующейпрямолинейному участку калибровочного графика.Результаты количественного определения фурадонина в порошках спектрофотометрическим методом, представленные в табл. 3, позволяют сделать вывод о том, что с помощью данного способа можно определять содержание фурадонина в порошках с относительнойошибкой А = +1,297.Спектрофотометрическое определение фурадонина в таблетках (по 0,05 г и по 0,1 г).Точную навеску порошка растертых таблеток Фурадонина количественно переносят в мерную колбу на 250,0 ыл прибавляют 200 мл дистиллированной воды и содержимое колбы нагревают на5 кипящей водяной бане до полного растворения. После охлаждения объем раствора в колбе доводят дистиллированной водой до метки и тщательно перемеши О вают.Необходимый объем пробы, полученный путем растворения навесок таблеток фурадонина по 0,1 или по 0,05 г помещают в мерную колбу на 25,0 мл, вносят до 5,0 мл дистиллированной во- ды, 4,0 мл О 2 Е-ного свежеприготовленного водного раствора пирогаллолаА и 1 2 , 0 мл дистиллированной серной кислоты , перемешивают и доводят полу ченную смесь водой до метки . После е охлажцения смесь снова доводят водой до метки и перемешивают .Оптическую плотность полученного окрашенного раствора измеряют с помо щью спек трофотометра СФ 6 при длине волны 9 = 4 68 нм в кювете с толщиной рабоче го слоя 1 0, 0 мм . В качестве р а- створа сравнения используют охлажденную смесь , состоящую из 1 1, 0 мл дистиллированной воды , 4 , 0 мл 0 , 2 7. - ного свежеприготовленного водного раствора пирс галлола "А" и 1 2, 0 мл концентрированной серной кислоты .Результаты количественного определения фур адонина в таблетках по 0 , 0 535 или по О, 1 г спектрофотометрическим методом представлены в табл, 4 и 5, данные которых свидетельствуют о том, что ошибка определения фурадонина в40 таблетках по 0,05 и по 0,1 г предлагаемым способом не превышает А = ф 1,292. В табл. 8 приведена зависимость оптической плотности продукта взаимодействия фурадонина с пирогаллоломА от последовательнос ти добавления пир о галлола "А" и концентрированной серной кислоты .50Вывод табл. 8; на значение оптической плотности последовательность добавления реагента и концентрированной серной кислоты не влияет.В табл. 9 показана зависимость оптической плотности продукта взаимодействия Фурадонина с пирогаллоломЛ в зависимости от количества пирогаллола А , взятого на реакцию.Вывод табл, 9; оптическая плотность продукта взаимодействия фурадонина с пирогаллолом "А" максимальнаесли на анализ берется объем 0,27-ного водного раствора пирогаллола А" от 0,6 до 4,2 мл для 50,0 мкг фурадонина, и от 2,0 до 4,0 мл 0,2 Ж-ного водного раствора пирогаллола "А", если на анализ берется 200,0 мкг фурадонина.В табл, 10 приведена зависимость оптической плотности продукта взаимодействия фурадонина с пирогаллоломЛ в зависимости от количества концентрированной серной кислоты, взятой на реакцию.Выводы табл. 10: оптическая плотность продукта взаимодействия фурадонина с 0,27.-ным водным раствором пирогаллола "А" максимальна, если на анализ берется концентрированная серная кислота в интервале 9 - 14 мл.Данные табл. 1 - 10 позволяет сделать вывод о том, что предлагаемый способ целесообразно использовать для количественного определения Фурадонина как в чистом виде, так и в лекарственных Формах. Предлагаемый способ по сравнению с известным повышает чувствительность и точность определения.Формула из о брет енияСпособ количественного определения Фурадонина путем обработки анализируемой пробы химическим реагентом с последующим фотометрированием полученного раствора, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью повышения точности и чувствительности определенияобработку ведут сначала пирогаллоломА , затем концентрированной серной кислотой .171997 Таблица Способт Известный Препарат Предлагаемый ЛмЛсм 23696,91Е Лсм = 925, 01ЛФо фурадонин= 468 нм А = 227 нм Ошибки метода Порошок А = + 1,29 Порошок А =т 2,2бъем ратвора,олученНомер опыта Объем трологиские хаприбор естаствоернстикн ра,взтого нвыпол объемепробы,аэ огзнали взятой наанализ,мкг ие ре" 5,25 97 О,ОЭ 24 0,0237 250 0,2 э 32 18 э 96 100 э ,75 44 э 72 96,96 э 46 э 40 250 7,28 98,4 3,10 97,9 7,803,50 О,018 0,0296 7,27 98,4,99 100,0,4 9,О Сф1 О, 03242 0,0237 1,0 94 0,3 Навеска порошка фурадон н взя т она ого изавескифурадонннзятого нелв, мп Теоретическое содерианиефурадонина в пробе, взятойна анализ,ЛмЛсм = 8061,47Л%Е Лсм 314,68 6,8.10,5 15,0 26,81719972 етрологические хаТеоретическое со Объем Номер опыта тичесНавеска порошка фурадоии на взя того на анализ Прибор я плотсть О раствора,взятого на рактеристики дераание Фурадонина в пробе, взятой а анализ, мкг в объеме Кпробы,взятой на выполнение реаналимкг 7,3 бр= 0 3 О, 0116 250 4 0,0189 250 0,33 90,3 74,6 8,7 2 1 1,2А+129И9856 ф+1,27 0,0296 2 0,431 16, 11 98,4 аблица 4 Найдено фурадомина Прн бъем рес орв, взя ъен рас Оптиче Теоретическое содерваниефурадоиинв навеске дерканиефурадоника пробе, ятого нв элиз,Иетрологические характеристики а, полу- ного иэ ескн фуоиина валия мл ппотв про" Х ение ции нос+1,89872+ в б л и ц в 5 етрологиеские хаНайдено фурадонинв ОптичесТеоретическое оретичое содвяие фнина а потаблерадовэятоОбъем раствора, полученного из навески фурадонинв, взятого ив квяплотность рв, в го иа олнеин рактертики в объе ме про радо невенлбывзятой нванализнкг нализ 2 22 2,82 0 706,23 8744,0 36,01719972 Таблица 6 Оптическаяпло тн Ос ть0; Х Р" .=2,299 ", =331,97:К=89400 п=5 Таблица 7 Иолярный коэффициентсветопоглоПрименяе- Условия проведения анализамый фенол Лнализи- Померруемыйпрепарат Длина Удельный коволны эффициент на светопоглоф 46 щениоЕ 1 ф нм 4 мщения,К 5,0 мл пробы прибавляют0,5 мл 107-ного водного раствора резорцина и 18,0 млконцентрированной сернойкислоты, охлаждают и доводят общий объем до 25,0 млводой, фотометрируют противконтроля 478 20066,96 783,32 2 Пирогаллол "Л" К 5,0 мл пробы в мернойколбе на 25,0 мл прибавляют4,0 мл 0,2 Ж-ного водногораствора пирогаллола "Л" и12,0 ил концентриронаннойсерной кислоты, объем доводят водой до метки, перемешивают, охлаждают и,сновадоводят до метки водой, фотометрируют против контроля 468 23696,91 925,01 К 5,0 мл пробы прибавляют2,0 мл 57-ного водного раствора пирокатехина и 18,0 млконцентрированной сернойкислоты, охлаждают и фотометрируют против контроля 3 Пирокате- хин 468 694,49 17791,55 4 Флороглю- цин К 5,0 мл пробы н мерной колбе на 25 мл прибавляют 1,0 мп 1 Х-ного водного раствора флороглюцина и 18,0 мл концентрированной серной кислоты, охлаждают и общий объем в колбе доводят до метки водой, фотометрируют против контроля 14448,30 455 593,9 фурадоннн 1 Резорцин 0,179 0,375 0,446 0,556 О, 743 8,95 2500 37,50 10000 53,52 14400 83,40 22500 148,68 400001719972 Продолжение табл. 7 ДлинанаСФ,нм Молярный ко.эффициентсветопоглоУдельный коэффициент светопогло-.и щение, ЕфОР Номер Применяемый фенол Условия проведения анализа гмщения 1 см 5 Фенол К 5 мл пробы прибавляют2,0 мл 1 Х-ного водного раствора фенола и 18,0 мл концентрированной.серной кислоты, охлаждают и фотометрируют против контроля 468 768,01 19674,88 К 5,0 мл пробы в мернойколбе на 25,0 мл прибавляют0,5 мл 1 Е-ного водного раствора тимола в 963-ном этаноле и 18,0 мл концентрированной серной кислоты, охлаждают и доводят до метки общийобъем 967-ным этанолом, фо-тометрируют через 15 минпротив контроля 6 Тимол 7 Гидрохинон468 4.96, 10 12709, 19 К 5,0 мл пробы в мернойколбе на 25,0 мл прибавляют1,0 мл 5 Х-ного водного раствора гндрохинона и 18,0 млконцентрированной сернойкислоты, охлаждают и общийобъем в колбе доводят водойдо метки, фотометрируют против контроля 10599,45 495 414,82 К 5,0 мл пробы в мерной колбе на 25,0 мп прибавляют 0,25 мл О, 1 Е-ного раствора 1-нафтола в 963-ном этаноле, 5,0 мл 963-ного этанола и 14,0 мл концентрированной серной кислоты, охлаждают и доводят общий объем до метки 962-ным этанолом, фотометрнруют против контроля 8 1-Нафтол 512145,13 3717,94 Реакция не идет ф9 Пикриновая к-та П р и м е ч а н и е. Во всех случаях контролем является раствор "холостого" опыта,