Есаки

Номер патента: 994554

Опубликовано: 07.02.1983

Авторы: Березов, Есаки, Сода, Шугие

МПК: C12N 9/00

Метки: метиониназы

...Клетки отмывают дважды раствором 0,853-ного МаСВ, а затем 0,01 МФосфатным буфером (рЬ 7,2), содержащим 10 ф М и пиридоксаль-фосфати 0,013 2-меркаптоэтанол. Клетки(150 г) разрушают и суспендируют втом же буферном растворе,Супернатант диализируют в течение 21 ч против вышеуказанного буфера. Образующийся осадок удаляютцентрирфугированием. Полученный грубый экстракт объемом 2500 мл с удель" ной активностью 0,07 нмоль наносят на колонку с ДЭАЭ-целлюлозой.Элюирование .фермента проводят КСР (0,12 М) в течение суток, затем постепенно заменяют на более концентрированный раствор КСР (0,18 М).Элюируют калийфосфатным буфером 0,1 М (рЬ 7,2), содержащего 2.10- М пиридоксальфосфата 0,01 меркаптоэтанола и 0,0 М этилендиаминтетраацетата...