Друца

Номер патента: 1597392

Опубликовано: 07.10.1990

Автор: Друца

МПК: C12N 15/00

Метки: вставок, днк, мутагенности, неприродных, оценки

...узла, а по соотношению мутантных и немутантных клонов легко определить вероятность генерации мутаций.П р и и е р 1 (контрольньй). Конструирование гетеродуплексной ДНК.1 икг однотяжевой ДНК Фага М 13 шр 8 ор55 и 0,5 мкг большого ЕсоК 1/Н.пд 111 Фрагмента ДНК - Фага М 13 шр 8 орг нагревают в 90 мкл ТЕ-буфера 3 мин прн 100 С, быстро охлаждают, добавляюто10 мкл 10-ББС-буфера и отжигают 24 чпри 65 С. Осаждают ДНК 3 объемамиэтанола, растворяют в 30 мкл воды,добавляют 10 мкл 5"-лигазного буфера(0,1 мМ АТР) и 10 мкл водного раствора немодифицированного олигонуклеотида) рАССТТСССТССАССТССАСССАТССССССС(0,001 О Е гса). Смесь нагревают10 мин при 60 фС и медленно (3 ч) охлаждают до комнатной температуры.Добавляют 1 мкл раствора Фермента Т...