Способ получения аддитивной соли бензолсульфокислоты сультамициллина

.ЯО ГОСУДАРСТВЕННЫЙПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕН МИТЕТ СССРЙ И ОТКРЫТИЙ БРЕТЕНИ Н ПАТЕНТ итаутас Джо а; СБН 5 Сн - СОМК О С О 3 СНЙсн,о т л и ч а ю щ и й с я тем, что соединение формулы В или его гидрогалогенид подвергают взаимодействию с бензолсульфокислотой формулы 4 - ХСН 450 где Х имеет указанные знв водной, органической илнической среде при комкатуре нли гидрогалогенид сформулы В подвергают взас щелочной солью бензолсуформулы ХС Н 5 ОН ОПИСАНИ(72) Вейн Эрнест Барт иДжэсис (США)(53) 547.789.61,07(088.8 чения,и водноорганой темпераоединения имодействию льфокислоты 4(51 С 07 0 499 64 А 6 . К(56) 1, Патент США У 4234 кл. 424-246, опублик, 1982. Патентная заявка Ве В 2044255, кл. С 2 С опу (54)(57) 1. СПОСОБ ПОЛУЧЕ .НОЙ СОЛИ БЕНЗОЛСУЛЬФОКИСЛ ИИЦИЛЛИНА формулы4-хСНБОН 8 ЯЙО где Х-атом водорода или хВ-соединение формулы 579,О,ликобританииблик, 1980НИЯ АДДИТИВОТЫ СУЛЬТА - ХСН, БО Нгде Х имеет указанные значения,в водной среде при комнатной температуре.2. Способ по п; 1, отличающ и й с я тем, что в качестве гидрогалогенида соединения формулы В испол эуют его гидрохлорид и подвергают его взаимодействию с натриевой.солью бензолсульфокислоты формулы е Х имеет укаэанные значени1138030 риальных агентов, а также для увеличения эффективности бета-лактамных антибиотиков, таких как ампициллин, действие которых направлено против многих бактерий, вырабатывающих бета-лактамазу 1 .Известны сопряженные соединения 1, 1-двуокиси пенициллановой кислоты с известными пенициллиновыми антибиотиками, которые соединяются при помощи метилендиоксигруппы. Эти сопряженные соединения имеют общую формулу 1 15 20 25 СНС - О0 0сн Ни3 вЬн 0 Ф 0ЗО СНзС 0 в которой к представляет ацильную группу натурального или полуискус ственного пенициллина 2 .Соединение, имеющее приведенную форМулу, в которой 1( представляет 2-(2-амина-фенилацетил) является сультамициллином. Это соединение 45 представляет связанное при помощи метилендиоксигруцпы сопряженное соединение 1, 1-двуокиси пенициллановой кислоты и ампициллина.Свободное основание сультамицил лина обладает плохими характеристиками обработки и не отвечающей требованиям устойчивостью. Единственной известной солью сультамициллина является хлористоводородная соль. 55 Хотя она пригодна для получения определенных антибактериальных составов, она также характеризуется плоИзобретение относится к способу получения новых солей бензолсульфокислоты 1,1-диоксопеницилланоилокси 1 етил-О;(2-амина-Аенилацетамидо) пеницилланата (сультамипиллина), об ладающих преимущЕствами при использовании в антибактериальных составах.Известны 1,1-двуокись пенициллановой кислоты (сульбактам) и ее сложные эфиры, которые легко гидро лизуются в живом организме и являются полезньви в качестве антибакте.СО О соединение формулы В или его гидрогалогенида подвергают взаимодействию 15с бензолсульфокислотой Формулы ХС Н 50 згде Х имеет указанные значения,в водной, органической или водноорганической среде при комнатной температуре или гидрогапогенид соединения формулы В подвергают взаимодействию с щелочной солью бензолсульфокислоты формулы где Х имеетв водной сртуре,В качест азанные значения, при комнатной темпера ве гидрогалогенида соедирмулы В используют его гидро- подвергают его взаимодействию35 вой солью бензолсульфокислоты ния фо орид и снатрие формулы 4 - ХС 6 Н 460где Х имеет указанные значения. 40В качестве органической среды мож но использовать этилацетат, метанол, бутанол, ацетон, метилэтилкетон или тетрагидрофуран.В качестве водноорганической среды можно использовать смесь воды с вышеприведенными растворителями. Предлагаемые кристаллические дигидраты характеризуются высокими фармакокинетическими свойствами, почти оптимальной растворимостью в водных системах.и улучшенной устойчивостью в насыпном виде и в вбдньм суспензиях. В результате этого предлагаемые кристаллические соли имеют ценные преимущества при изготовлении различных дозированных форм,50 где Х - атом водорода или хлора,В - соединение Формулы Кристаллические дигидратные соли обладают полезными свойствами, которые делают их особенно пригодными в качестве принимаемых через рот антибактериальных агентов. Для них характерно быстрое поглощение из желудочно-кишечного тракта. Во время или после поглощения в живом организме происходит эфирный гидролиз с высвобождением ампициллина и ингибитора бета-лактамазы, 1, 1-двуокиси пенициллановой кислоты (сульбактама) . Эти соли характеризуются относительно низкой, но вполне достаточной растворимостью в водных системах, что ведет к улучшению устойчивости водных дозированных форм, предназначенных для приема через рот, которым отдается предпочтение в педиатрии.Установлено, что при введении лабораторным животным через рот предлагаемых кристаллических соединений и хлористоводородной соли оба эти вещества показали великолепные фармакокинетические свойства. В табл. 1 приведены формакокинетические данные после введения крысам через рот 20 мг/кг соли сультимициллина.Данные табл. 1 показывают, что каж" дая из трех солей быстро поглощается и гидролизуется при.введении через рот.с достижением высоких уровней в сыворотке как ампициллина, так и ингибитора бета-лактамаэы, сульбактама. Было установлено, что различия между тремя долями, представленными в табл. 1, являются статистически несущественными.Приведенные в табл. 1 данные были получены при Использовании аутбридинговых крыс Бргаяце-Ваю 1 еу. Эти соединения вводили через рот (по 5 крыс на одно соединение) в виде водной сус-, 1138030пензии 0,5 мп, содержащей 20 мг/кглекарственнрго препарата.Пробы крови брали через указанныепериоды времени и подвергали их дифференциальному биоанализу с целью 5определения уровней ампициллина исульбактама. В биоанализе ампициллина используется Багс 1 па 1 цйеа(АТССС 9341), который является чувствительным к ампициллину, но нечувствительным к сульбактаму при концент.рациях, достигающих 100 мкг/мп, -таккак этот вид не содержит бета-лактамазы. Таким образом, этот организмне проявляет синергии в отношении 15сочетаний ампициллина и сульбактама,Стандартная кривая была полученав нормальной сыворотке при уровняхампициллина, равных 4, 2, 1, 0,5,0,25 и О, 125 мкг/мл. Стерильные диски из фильтровальной бумаги загружали 25 ламбдаобъемами, Аналитическиечашки готовили с использованием семенного агара (Дифко), Вьдержаннуюв течение ночи культуру Яагспа 21 цеа разбавляли до отношения 1:100,и 1 кп этого раствора добавляли к100 мл агара в пластмассовых чашкахразмером 12/12 дюймов. Культуры вэтих чашках выращивали при 37 С в те чение 18 ч, после чего измеряли полученные зоны,Определение сульбактама основывается на нечувствительности Разгецге 11 а Мзго 1 угса (59 В 010) к высоким З 5концентрациям ампициллина или сульбактама в отдельности. Однако поскольку ее устойчивость опосредована бета-лактамазой,то эта культура синергически реагирует на сочетания ампициллина и сульбактама. Стандартнаякривая была получена способом, аналогичным описанному для ампициллина.Аналитические чашки готовились посредством добавления 1 мп вьдержанной втечение ночи культуры Разгецге 11 аЬзго 1 уг 1 са к 100 мл агара МюллераХинтона, к которому добавляли 50 мкг/млампициллина и 5%-ный стерильный раст-.вор бычей крови, Культуры в этихчашках выращивали при 37 С в течениеО18 ч, после чего измеряли полученныезоны.Растворимость,Было произведено сравнение раст воримости этих солей в воде и в искусственном желудочном соке без пепсина (рН 1,2). Равновесная растворимость не определялась, поскольку этисоединения не являются совершенно устойчивыми в водных системах на протяжении длительных периодов времени,необходимых для достижения равновесия. Поэтому определялась кажущаясярастворимость посредством сильногоперемешивания с растворителем в те,чение 30 мин. Полученную смесь за-тем фильтровали, и количество сое- "динения в растворе определяли при помощи жидкостной хроматографии под высоким давлением (НРЬС).Кажущаяся растворимость солейсультамициллина в воде и в искусственном желудочном соке (без пепсина,рН 1,2) приведена в табл, 2,Кристалличность,На дифрактометре Сименса, оборудованном устройством для излучениямеди и детектором сцинтилляционного счетчика, были получены порошковыерентгенограммы. Интенсивность пучкав виде функции угла 2 тета регистрировалась со скоростью сканирования,оравной 2 /мин. Кристалличность дигидрата бензолсульфоната сультамициллина и дигидрата 4-хлорбензолсульфоната сультамициллина проверялась наосновании множественности пиков напорошковых рентгенограммах для этих солей.Устойчивость.При хранении .образцов этих трех солей при 50 С в течение трех недель было установлено, что кристаллический бензолсульфонат2 Н,О и 4-хлорбен. золсульфонат 2 НО сохранили соответственно 97 и 100% своей силы, Хлористоводородная соль сохранила только 67% от своей первоначальной силы при тех же условиях.Жидкостная хроматография под высоким давлением (НРС).В исследованиях растворимости и устойчивости представленные выше образцы веществ анализировались с по- мощью жидкостной хроматографии под высоким давлением при использовании колонки с хромгабондом С(торговая марка фирмы "ЕЯ индастриз"),внутренний диаметр 4,6 мм х 30 см. Подвижная фаза состояла из 30 вес.% ацетонитрила в фосфатном буфере с рН 3 (О, 1 М раствор). Скорость потока равнялась 1,6 мп/мин, Определение производилось в ультрафиолетовом свете при 230 нм,При использовании предлагаемой антибактериальной соли для лечения млекопитающих, в частности людей, это соединение может применяться в отдельности либо оно может смешивать 5 ся с другими антибиотическими веществами и/или фармацевтически приемлемыми носителями или разбавителями. Указанный носитель или разбавитель выбирается исходя из предполагаемо го спбсоба введения. Например, в случае введения этого препарата через рот предлагаемое антибактериальное соединение может использоваться в :форме таблеток, капсул, лепешек, 15 порошков, сиропов, эликсиров, воднь 1 х растворов и суспензий и т.д. в соответствии с обычной фармацевтической практикой. Пропорциональное отношение активного ингредиента к носителю ес тественно зависит от химической природы, растворимости и устойчивости активного ингредиента, а также от предполагаемой дозы. В случае таблеток, предназначенных для д введения через рот, обычно используемые носители включают лактозу, лимоннокислый натрий и соли фосфорной кислоты. Обычно в таблетках используются такие дизентеграторыкак крахмал, и замасливатели, такиекак стеарат магния, лаурилсульфатнатрия и талькДля введения черезрот в виде капсул полезными разбавителями являются лактоза и полиэти 35ленгликоли с высоким молекулярнымвесом, например полиэтиленгликоли,имеющие молекулярный вес 2000-4000. Благодаря хорошей растворимости и устойчивости кристаллических ди гидратных солей бензолсульфокислоты сультамициллина особо предпочтительнь 1 м способом введения этого препарата при лечении детей является введение через рот в виде водной сус пензии. Для получения таких суспензий кристаллический дигидрат формулы ( 1) может соединяться с буферными растворами, эмульгирующими и суспендирующими агентами. При желании в 50 препарат могут быть добавлены опре. - деленные подслащивающие и/ипи ароматизирующие агенты. Полученная суспензия может храниться в присутствии воды, особенно в холодильнике, в те чение значительных периодов времени. Однако предпочтительным способом является хранение смеси в виде сухо 1138030 8го порошка до тех пор, пока он непонадобится, когда он и смешивается ссоответствующим разбавителем, наприсмер водой.Как указывалгсь ранее, предлагаемые антибактериальные соединенияпредназначены для использования прилечении людей,и их суточные дозы неотличаются в значительной степениот других используемых в клиникепенициллиновых антибиотиков, Соответствующая доза для данного человекаопределяется в конечном счете лечащим врачом и она изменяется в зависимости от возраста, веса и реакциикаждого больного, а также от характера и серьезности симптомов болезни у пациента. Предлагаемые соединения обычно используются для введениячерез рот в дозах, составляющих 20100 мг на килограмм веса больногов день, и парентерально в дозах10-100 мг на килограмм веса больногов день, обычно в виде нескольких раз.деленных доз. В некоторых случаях может оказаться необходимым использо-,вать дозы, выходящие за пределы этихдиапазонов.1Следующие примеры и способы получения служат только для дальнейшейиллюстрации. Инфракрасные спектрыД) измерялись на дисках из бромис- ., того калия (КВгдиски), а диагностические полосы поглощения указываютсяв волновых числах (см) . Спектры ядер"ного магнитного резонанса (МИР) из;мерялись при частоте 60 мГц для растворов в дейтерированном хлороформе(СОС 63) или дейтерированном диметилсульфоксиде (3."БО), а положенияпиков указываются в частях на миллионвниз от тетраметилсилана. Для обозначения форм пиков используются следук- . щие сокращения: 5 сийгулентный, 3 дуплетный, 1 триплетный,квартетный,Ф мультиплетный.Н р и м е р 1. Дигидратная сольбензолсульфокислоты 1, 1-диоксопеницилланоилоксиметил-3-(2-аминофенилацетамидо)1 -пеницилланатаК 6,31 г (О,Ъ 1 моаь) хлористоводородной соли 1,1-диоксопеницилланоилок"симетил-Э-(2-амино-фенилацетамидо) пенициллата добавляли 40 мл воды,и полученную смесь перемешивали в течение примерно 15 мин. Нерастворимоевещество (примерно 0,75 г смолы) удаляли фильтрованием, и к фипьтрату до9 11380 бавляли раствор 1,58 г (0,01 моль) бензолсульфокислоты в 10 мл воды. По- лученную клейкую смесь перемешивали стеклянной палочкой до тех пор, пока соль не затвердевала и не распада лась на мелкие кусочки. Перемешивание продолжали в течение 1 ч (магнитная мешалка), после чего тверДое вещество собирали фильтрованием и хорошо промывали водой. Промытое 1 О твердое вещество высушивали в атмосфере азота, в результате чего было получено 5,8 г (77 ) бесцветного про. дукта, т,пл. 138 С (разл.). Спектр ядерного магнитного резонанса Н 15 ВМЯЛО-д) в частях на миллион (дельта): 1,38 (5,6 Н)ф, 1,45 (5,6 Н); 3,0- 3,9 (в,2 Н); 4,4 (5,1 Н), 4,5 (5,1 Н);4,95-5,28 (т,2 Н), 5,3-5,66 (гп,21);5,89 (8,2 Н), 7,15-7,75 (в,101), ин фракрасный спектр: нуджол (торговая марка для сорта минерального масла, выпускаемого фирмойПлау"инк) широкая полоса при 1805-1770 смПорошковая дифракция рентгеновских 25 лучей: пики, градусы 2 тета:9,3, 11,4, 12 2; 13 4, 15 5; 16 2; 16 9, 17 1, 38,6 и 44,7.П р и м е р 2, Дигидратная соль 4-хлорбензолсульфокислоты 1,1-диоксопеницилланоилоксиметил-П-(2-амино 2-фенилацетамидо)1 -пеницилланата.К раствору 15 г (25,25 ммоль) 1, 1. диоксопеницилланоилоксиметил-Ц - (2-амино-фенилацетамидо)пеницилланата в 150 мл этилацетата добавляли в течение 10 мин раствор 4,85 г 40 (25, 25 ммоль) 4-хлорбензолсульфокислоты в;25 мл этилацетата и 6 мл воды. После завершения добавления в эту смесь вводили еще 50 мл зтилацетата, после чего полученную смесь пе-,45 ремешивали при комнатной температуре в течение ночи. Бесцветные кристаллы собирали посредством фильтрова,ния, фильтровальную лепешку суспендировали в 200 мя простого этилового 50 эфиРа и снова фильтровали. После высушивания на воздухе было получено 13,7 г бесцветных кристаллов.10 г кристаллов растворяли в 100 мп метанола при комнатной тем пературе. При температуре помутнения добавляли воду (примерно 200 мл), Полученный замутненный раствор пере 30 10/ мешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, причем на протяженииэтого времени продукт кристаллизовался. 11 осле фильтрования и естественной сушки в течение ночи было получено 7,5 г продукта. Спектр ядерного магнитного резонанса Н (РМЪО-)в частях на миллион (дельта): 1,36(б,бН), 1,47 (5, 6 Н); 3,34 (широкий5 Н), 3,74 ИД, 1 НД =4 Гц, 17 Гц),4, 40 (Б, 1 Н), 4, 5 1 (5, 1 Н); 5, 08 (ю, 2 Н)5,48 (тп,2 Н, Д дц = 4 Гц при наложении 3 0), 5,86 (б,2 Н), 7,45 (щ,9 Н) .Вычислено, : С 45,22, Н 4,77,"ЛЧ 6,81, Ь 11,68, С 0 4,31.1 302 ЙР 2 НгОНайдено, : С 4.5,04, Н 4,83, й6,86; 5 11,74; СЙ 4,27,Вода (Карл Фишер) 4,98 (теоретический результат 4,37).Порошковая дифракция рентгеновскихлучей: пики, градусы 2 тета: 8,910,8; 11,3; 13,2; 15,5; 16,0 17, 1;18,0; 19,3, 20,0, 22,4; 22,7; 23,3,26,0, 27,9; 30,0; 30,5; 34,1; 34,5,П р и м е р 3. Смесь 6,31 г(0,01 моль) хлористоводородной соли1, 1-диоксопеницилланоилоксиметил-(2-амино-фенилацетамидо)1 -пеницилланата и 40 мл воды перемешивалив течение 20 мин и фильтровали. Кфильтрату медленно добавляли раствор1,80 г (0,0 1 моль) бенэолсульфонатанатрия в 10 мп воды, Полученную смесьперемешивали в течение 2 ч, фильтровали, фитровальную лепешку промываливодой и высушивали в вакуумной печипри 45 С, в результате чего была полу 0чена кристаллическая дигидратнаяболь бензолсульфокислоты 1, 1-диоксо-пеницилланоилоксиме 4 гил-3-(2-амино 2-фенилацетамидо) -пеницилланата.Использование в вышерассмотреннойпроцедуре 4-хлорбензолсульфоната калия вместо бензолсульфоната натрияпозволяет получить соль 4-хлорбензолсульфокислоты 1, 1-диоксопеницилланоилоксиметил-0-(2-амико-фенилацетамидо) -пеницилланата, котораяпри рекристаллизации из смеси метанола и воды в соответствии со способом, предстваленным в примере 2,позволяет получить кристаллическийдигидрат.П р и м е р 4. Раствор 64,1 г030 12 5,00 2,00 11 1138тамидо) пеницилланата в 1400 мл этилацетата (кажущийся показатель рН 7,6)доводили до рН 2,5 посредством добавления 325 мп раствора 18,0 гбензолсульфокислоты (90 . технический сорт) в 400 мл этилацетата. Полученную бледно-желтую суспензию охлаждали до 5 оС и гранулировали приэтой температуре в течение 60 мин,Полученную суспензию промывали равным количеством воды, после чего слоиразделяли и слой этилацетата охлаждали до 5 С. Полученную густую белую суспензию фильтровали, фильтровальную лепешку промывали гексаном 15(4 х 100 мл) и высушивали в вакуумеГ 0при 35 С в течение ночи, в результате чего было получено 42 г кристаллической соли бензолсульфокислоты,анализ которой показап наличие 4,67 . 20воды (метод Карла Фишера); процентное содержание летучих веществ (60 ОС,высушивание в вакууме в течение 3 ч)составило 5,00 ,Вычислено, %: С 47,20 Н 5, 11; 25М 7,10, 5 12,19.С,31 Н 16 О й б2 Нг ОНайдено,: С 47,14, Н 5,21;М 7,12, 5 11,92.П р и м е р 5. Суспензия, пред- З 0назначенная для введения через рот,Готовили сухую смесь, содержащуюследующие игредиенты, г:Кристаллическая дигидратная соль бензолсульфокислоты сультамициллина 6,80Сахароза 20,00Маннит 10,00Лимоннокислый натрий 0,40Порошок гидроокисикремнекислого магнияи кремнекислого алюминия (Вигум, 8 )Каолин Сахарин натрия 2,00Порошок искусственногоароматизатора 0,10Сухую смесь хранили в закрытыхкоробках до возникновения в нейнеобходимости, когда эту смесь разбавляли водой до объема, равного100 мл. Эта суспензия характеризовалась эквивалентной концентрацией,равной 50 мг/мл сультамициллина,Получение препарата А,Хлористоводородная соль и свободное основание 1, 1-диоксопенилилланоилоксиметил-2-(2-амико-фенилацетамидо)1 -пеницилланата.К раствору 3,465 и (0,005 моль)1, 1-диоксопеницилланоилсксиметил 6-П в (2-1-метил-метоксикарбонилвиниламино-фенилацетамидо) пеницилланата в 50 мл ацетона добавляли5,5 мп 1,0 н. раствора соляной кислоты и 5 мл воды, после чего этусмесь перемешивали при комнатнойтемпературе . в течение 30 мин. Ацетон выпаривали в условиях вакуума,3водный остаток промывали простымэтиловым эфиром, фильтровали и лио"филизировали для получения хлористоводородной соли указанного соединения. Альтернативно водный остаток, полученный в результате выпаривания ацетона, промывали этилацетатом и простым этиловым эфиром. К водному;слою добавляли хлористый метипен, эту смесь охлаждали и порциями добавляли 460 мг бикарбоната натрия. Водную фазу отделяли, снова экстрагировали хлористым метиленом, соединенные органические слои высушивали (МоО ), и растворитель выпаривали в условиях вакуума, в результате чего было получено свободнре основание укаэанного соединения.л о Оо оСС СЧ л л о о СС л О + л л СЧ ,л л о о Ф + О 1 01 с м СЧ О л О +1, м л о Ю + л СО л Ю СО л О(2,0 5 онат, 2 Н 0 3,3Х Кристаллическая соль Составитель З.Латыповаедактор Н.Киштулинец Техред Т,Маточка Корре.Король 10558/44 , Тир ВНИИПИ Государственнпо делам изобретен 113035, Москва, Жаж 384 Подписиго комитета СССРй и открытийРаушская наб., д. 4/ Зак ал ПППБПатент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 Хлористоводоро Бензолсульона 4-Хлорбензосул скусстенный жеудочныйок